微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)-文庫吧在線文庫
【正文】 的雙線上，計(jì)數(shù)時(shí)則數(shù)上線不數(shù)下線，數(shù)左線不數(shù)右線，以減少誤差。這是一種應(yīng)用最廣泛最普遍的細(xì)菌基本培養(yǎng)基，牛肉膏提供碳原和能源，蛋白胨主要提供氮源，NaCl提供無機(jī)鹽，用HCl和NaOH調(diào)節(jié)pH，還要加入一定量的瓊脂最為凝固劑。注意：加熱時(shí)要不斷攪拌，避免瓊脂糊底燒焦。包扎：加塞后，三角瓶外包一層牛皮紙或兩層舊報(bào)紙，用麻繩以活結(jié)形式扎好；試管先用橡皮筋全部捆好，再在棉塞外包牛皮紙或舊報(bào)紙，防止滅菌時(shí)冷凝水潤濕棉塞。（二）下次實(shí)驗(yàn)無菌器材的準(zhǔn)備無菌水：每組在5支普通試管或刻度試管中裝入9ml蒸餾水，加塞、包扎、待滅。（2）裝鍋：將所要滅菌的物品放入鍋中，擺好，不要太擠保證通氣，滅菌徹底。注意：高壓容器，嚴(yán)格按要求操作，高度注意安全！實(shí)驗(yàn)三純種微生物的分離、培養(yǎng)及接種技術(shù)實(shí)驗(yàn)三 純種微生物的分離、培養(yǎng)及接種技術(shù)一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康恼莆仗荻认♂屍桨宸ǚ蛛x純種微生物的原理、方法掌握常規(guī)接種技術(shù)建立無菌操作意識二、實(shí)驗(yàn)儀器超凈工作臺、恒溫培養(yǎng)箱酒精燈、接種環(huán)、酒精棉球等無菌培養(yǎng)皿、無菌移液管、無菌水、滅菌的固體培養(yǎng)基、土樣（或活性污泥）等三、實(shí)驗(yàn)原理土樣或活性污泥中含有的微生物數(shù)量很多，而且聚集在一起，經(jīng)過無菌水的梯度稀釋可以將微生物充分分散，成單個(gè)細(xì)胞，涂布到固體平板上，長成單菌落，一個(gè)單菌落對應(yīng)于原土樣（或活性污泥）中的一個(gè)微生物，乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)可以計(jì)算出土樣的微生物濃度；將單菌落進(jìn)一步劃線純化可分離到純種微生物。培養(yǎng)將培養(yǎng)皿倒置，放于30186。在待接種的斜面培養(yǎng)基的試管上部，貼上標(biāo)簽，寫上菌名、接種日期等。五、思考題梯度平板稀釋法分離純種微生物的方法和原理是什么？平板培養(yǎng)皿為什么要倒置培養(yǎng)？觀察實(shí)驗(yàn)結(jié)果，并對結(jié)果進(jìn)行分析。在火焰旁，用右手小指、無名指和手掌夾住棉塞將它拔出。接種環(huán)在火焰上徹底殺菌并冷卻后，蘸取少量菌種，在平板表面輕輕地劃線（如圖），使得初始聚集在一起的細(xì)胞漸漸稀釋，最后有單個(gè)分散的細(xì)胞，長出單菌落，達(dá)到分離純化的目的。加菌將無菌平板編上1010106號碼，每一號碼設(shè)置三個(gè)重復(fù)，用無菌吸管按無菌操作要求吸取106稀釋液各1ml放入編號106的3個(gè)平板中，同法吸取105稀釋液各lml放入編號105的3個(gè)平板中，再吸取104稀釋液各lml放入編號104的3個(gè)平板中（由低濃度向高濃度時(shí)，吸管可不必更換）。（6）加壓：關(guān)上排氣閥，斷電。因此要求棉塞的形狀、大小、松緊與容器口盡量適合，過緊則妨礙空氣流通，操作不便；過松則達(dá)不到濾菌的目的。擱置斜面：將滅菌的試管培養(yǎng)基冷卻至50186。注意不要調(diào)過頭，避免回滴，否則會影響培養(yǎng)基內(nèi)各離子的濃度。牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基的配方是： 牛肉膏 5g 蛋白胨 10g NaCl 5g 瓊脂 25g 水 1000ml pH ~四、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容
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