微生物學(xué)實驗指導(dǎo)-wenkub
2023-04-19 23:23:40 本頁面
【正文】 菌基本培養(yǎng)基，牛肉膏提供碳原和能源，蛋白胨主要提供氮源，NaCl提供無機鹽，用HCl和NaOH調(diào)節(jié)pH，還要加入一定量的瓊脂最為凝固劑。洗凈后自行晾干或用吹風(fēng)機吹干，放入盒內(nèi)保存。如菌體位于大方格的雙線上，計數(shù)時則數(shù)上線不數(shù)下線，數(shù)左線不數(shù)右線，以減少誤差。（4）靜置片刻，將血球計數(shù)板置載物臺上夾穩(wěn)，先在低倍鏡下找到計數(shù)區(qū)后，再轉(zhuǎn)換高倍鏡觀察并計數(shù)。（2）取潔凈的血球計數(shù)板一塊，在計數(shù)區(qū)上蓋上一塊蓋玻片。蓋上蓋玻片后，每個小方格的體積為1/4000mm3。結(jié)果計算： 長μm＝平均格數(shù)校正值寬μm＝平均格數(shù)校正值大小表示： 寬μm長μm五、微生物細胞數(shù)量的測定原理和方法圖14 血球計數(shù)板血球計數(shù)板是一塊特制的厚型載玻片，載玻片上有4條槽而構(gòu)成3個平臺。例如目鏡測微尺5小格正好與物鏡測微尺5小格重疊，已知物鏡測微尺每小格為l0μm，則目鏡測微尺上每小格長度為=510μm/5＝10μm用同法分別校正在高倍鏡下和油鏡下目鏡測微尺每小格所代表的長度。校正時，將物鏡測微尺放在載物臺上，由于物鏡測微尺與細胞標本是處于同一位置，都要經(jīng)過物鏡和目鏡的兩次放大成象進入視野，即物鏡測微尺隨著顯微鏡總放大倍數(shù)的放大而放大，因此從物鏡測微尺上得到的讀數(shù)就是細胞的真實大小，所以用物鏡測微尺的已知長度在一定放大倍數(shù)下校正目鏡測微尺，即可求出目鏡測微尺每格所代表的長度，然后移去物鏡測微尺，換上待測標本片，用校正好的目鏡測微尺在同樣放大倍數(shù)下測量微生物大小。目鏡測微尺（圖11）是一塊圓形玻片，在玻片中央把5mm長度刻成50等分，或把10mm長度刻成100等分。操作在目鏡保持不變的情況下，使用不同放大倍數(shù)的物鏡所能達到的分辨率及放大率都是不同的。實驗一光學(xué)顯微鏡的使用及微生物形態(tài)的觀察、大小的測定和計數(shù) 實驗一 光學(xué)顯微鏡的使用及微生物形態(tài)的觀察、大小的測定和計數(shù)一、實驗?zāi)康恼莆展鈱W(xué)顯微鏡的結(jié)構(gòu)、原理，學(xué)習(xí)顯微鏡的操作方法和保養(yǎng)觀察細菌、真菌、原生動物的標本裝片，學(xué)會繪制生物圖掌握使用測微尺測量微生物大小的方法了解血球計數(shù)板的結(jié)構(gòu)，掌握使用和計算方法二、實驗器材顯微鏡微生物標本裝片目、物鏡測微尺血球計數(shù)板酵母菌液或霉菌孢子液載波片、蓋波片、燒杯、滴管、擦鏡紙、香柏油、二甲苯等三、顯微鏡的構(gòu)造、原理及使用方法 構(gòu)造現(xiàn)代普通光學(xué)顯微鏡利用目鏡和物鏡兩組透鏡系統(tǒng)來放大成像，故又常被稱為復(fù)式顯微鏡，由機械裝置和光學(xué)系統(tǒng)兩大部分組成。一般情況下，特別是初學(xué)者，進行顯微觀察時應(yīng)遵循從低倍鏡到高倍鏡再到油鏡的觀察程序，因為低倍數(shù)物鏡視野相對大，易發(fā)現(xiàn)目標及確定檢查的位置。測量時，將其放在接目鏡中的隔板上(此處正好與物鏡放大的中間像重疊)來測量經(jīng)顯微鏡放大后的細胞物象。目鏡測微尺的校正把目鏡的上透鏡旋下，將目鏡測微尺的刻度朝下輕輕地裝入目鏡的隔板上，把物鏡測微尺置于載物臺上，刻度朝上。由于不同顯微鏡及附件的放大倍數(shù)不同，因此校正目鏡測微尺必須針對特定的顯微鏡和附件（特定的物鏡、目鏡、鏡筒長度）進行，而且只能在特定的
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