微生物學實驗指導(編輯修改稿)
2025-05-01 23:23 本頁面
【文章內(nèi)容簡介】 個小格）。如菌體位于大方格的雙線上，計數(shù)時則數(shù)上線不數(shù)下線，數(shù)左線不數(shù)右線，以減少誤差。（6）對于出芽的酵母菌，芽體達到母細胞大小一半時，即可作為兩個菌體計算。每個樣品重復計數(shù)2—3次（每次數(shù)值不應相差過大，否則應重新操作），求出每一個小格中細胞平均數(shù)（N），按公式計算出每ml（g）菌懸液所含酵母菌細胞數(shù)量。（7）測數(shù)完畢，取下蓋玻片，用水將血球計數(shù)板沖洗干凈，切勿用硬物洗刷或抹擦，以免損壞網(wǎng)格刻度。洗凈后自行晾干或用吹風機吹干，放入盒內(nèi)保存。六、實驗結(jié)果和思考題結(jié)果（1）繪制所觀察的一種或兩種微生物的形態(tài)，并測量其大小。（2）將菌液濃度的實驗結(jié)果填入下表中：計數(shù)次數(shù)每個大方格菌數(shù)稀 釋倍 數(shù)試管斜面中的總菌數(shù)平均值12345第一次第二次思考題（1）在顯微鏡的使用過程中須注意哪些問題？（2）根據(jù)你的體會，說明用血球計數(shù)板計數(shù)的誤差主要來自哪些方面？應如何盡量減少誤差、力求準確？11實驗二培養(yǎng)基的配置和滅菌實驗二 培養(yǎng)基的配置與滅菌一、實驗目的明確培養(yǎng)基配置的原理掌握配制培養(yǎng)基的一般方法和步驟掌握滅菌鍋的使用方法二、實驗器材藥品：牛肉膏、蛋白胨、NaCl、HCl、NaOH、瓊脂、蒸餾水高壓滅菌鍋、電爐量筒、鋁鍋、三角瓶、天平等三、基本原理對照培養(yǎng)基配制的基本原則：目的明確、比例協(xié)調(diào)、pH適宜、經(jīng)濟節(jié)約。本次需要配制的培養(yǎng)基是為下次從土壤中分離細菌用的，所以選擇配制適合細菌生長的牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基。這是一種應用最廣泛最普遍的細菌基本培養(yǎng)基，牛肉膏提供碳原和能源，蛋白胨主要提供氮源，NaCl提供無機鹽，用HCl和NaOH調(diào)節(jié)pH，還要加入一定量的瓊脂最為凝固劑。瓊脂在大于96186。C時融化，小于40186。C時凝固，通常不被微生物利用。牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基的配方是： 牛肉膏 5g 蛋白胨 10g NaCl 5g 瓊脂 25g 水 1000ml pH ~四、實驗內(nèi)容和步驟（一）配制牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基計算：根據(jù)下次實驗的要求和本組人數(shù)，每小組需要牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基的量為分離所用9平皿、劃線所用每人一平皿、每人一支試管斜面所需培養(yǎng)基的總和，大概350ml。按照配方，計算出每種藥品的需要量。配制溶液：取一定容量的燒杯或搪瓷杯盛入適量蒸餾水，按培養(yǎng)基配方逐一稱取各種成分，依次加入水中溶解。牛肉膏、蛋白胨可加熱促進溶解，待全部溶解后，加水補足所需容量。注意：加熱時要不斷攪拌，避免瓊脂糊底燒焦。調(diào)節(jié)pH：用精密pH試紙測量培養(yǎng)基原始pH值。若偏酸，逐滴加入1mol/L的NaOH溶液，邊加邊攪拌，隨時測pH值。若偏堿，同法用1mol/L的HCl
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