微生物學實驗報告(編輯修改稿)
2025-05-01 23:23 本頁面
【文章內(nèi)容簡介】 ）干燥 涂片置于空氣中，使其自然干燥。（3）固定 干燥后將涂片在火焰上緩緩通過三次，此為“固定”。目的是使細菌粘于玻片上，染色和水沖時不易脫落；且細菌為蛋白質(zhì)，被熱凝固可保持完整形態(tài)。（4）染色 初染→媒染→脫色→復染① 加結(jié)晶紫染液于標本上，使其覆滿標本，染1~2分鐘。② 細水沖洗。③ 加路哥氏碘溶液經(jīng)1分鐘。④ 水洗。⑤ 加95%酒精于玻片上來回流動，傾去酒精。如此重復2~3次（約30秒鐘）。⑥ 水洗。⑦ 加稀釋復紅染液，染約1分鐘。⑧ 水洗，用吸水紙吸干。（5）鏡檢 革蘭氏陽性菌在結(jié)晶紫著色后不易被酒精脫色，故仍為深藍色或紫色；革蘭氏陰性菌在結(jié)晶紫著色后易被酒精脫色，故經(jīng)稀釋復紅復染后成紅色。三、實驗記錄革蘭氏染色過程：取玻片一塊，在玻片上滴三小滴水（有一定的距離），分別用接種環(huán)取EC（大腸桿菌）和BS（金黃色葡萄球菌）與兩邊的水滴上，并混勻，灼燒接種環(huán)后再分別取EC和BS于中間的水滴上混勻（即中間水滴是兩種菌的混合物），并在酒精燈下灼燒至干（小心不要將玻片炸裂），用結(jié)晶紫進行初染，細水沖洗后，加路哥氏碘液進行媒染，水洗后加酒精脫色2~3次，水沖洗后加稀釋復紅染液復染一分鐘，水洗，并用吸水紙吸干。大腸桿菌為革蘭氏陰性菌，染色后呈紫紅色。普葡萄球菌為革蘭氏陽性菌，染色后呈現(xiàn)藍紫色。以下為實驗觀測圖：四、思考題1．染色法在微生物學上有何實際意義？染色法可以更方便的觀察細菌的具體形態(tài)，更方便觀察細菌，革蘭氏染色法有更重要的意義，可以鑒別細菌，把眾多的細菌分為兩大類，革蘭氏陽性菌和革蘭氏陰性菌，在實驗方面，可以通過殺死陽性或陰性菌而得到目的菌。2．比較復染色法與單染色法的優(yōu)缺點。答：單染色法：優(yōu)點：僅用一種染料著色，所有的細菌均被染成一種顏色，簡單方便，可用來觀察細菌的形態(tài)和排列方式。缺點：但無鑒別細菌的作用。復染色法：優(yōu)點：用二種或二種以上的染料著色，由于不同種類的細菌或同種細菌的不同組成結(jié)構(gòu)對染料有不同的反應(yīng)性而被染成不同的顏色，從而有鑒別細菌的作用。缺點：使用試劑較多，過程較單染色法更復雜繁瑣。3．以革蘭氏染色法為例，說明它至少要涉及幾種試劑？各起何作用？答：至少用到4種試劑。結(jié)晶紫溶液進行初染，路哥氏碘液進行媒染，95%酒精進行脫色，稀釋復紅染液進行復染。4．要確證一個未知細菌的革蘭氏染色性質(zhì)，你可用什么方法來說明你的結(jié)果是可靠的？答：通過在顯微鏡下的菌體被染的顏色可以判斷，凡能使第一種染料結(jié)晶紫保留藍色的細菌為革蘭氏陽性細菌，凡被灑精脫色后染上對比顏料沙黃或稀釋復紅而呈紅色的細菌為革蘭氏陰性細菌。微生物學實驗報告實驗二 培養(yǎng)基的的制備滅菌及接種技術(shù)培養(yǎng)基的制備和滅菌一、目的要求掌握基礎(chǔ)培養(yǎng)基應(yīng)具備的條件及其制備方法。二、實驗原理培養(yǎng)基是人工配制的供給細菌或其它微生物生長繁殖的營養(yǎng)基質(zhì)。微生物的種類雖然繁多，但對基本營養(yǎng)物質(zhì)如碳源、氮源、能源、無機鹽、生長因子和水分等的要求卻有共同性。這些營養(yǎng)物質(zhì)的作用是：提供合成菌體和代謝產(chǎn)物的原料；提供生命活動必需的能量；調(diào)節(jié)代謝環(huán)境。作為培養(yǎng)基必須具備下列條件：①含有適當?shù)乃趾鸵欢ㄅ浔鹊倪m宜的營養(yǎng)物質(zhì)。②具有合適的酸堿度（pH值）。③有適當?shù)奈锢頎顟B(tài)：液體培養(yǎng)基、固體培養(yǎng)基和半固體培養(yǎng)基。④培養(yǎng)基必須經(jīng)滅菌成為無菌狀態(tài)后方能使用。利用培養(yǎng)基對細菌等
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