微生物學(xué)實驗報告(編輯修改稿)
2025-05-01 23:23 本頁面
【文章內(nèi)容簡介】 ）干燥 涂片置于空氣中，使其自然干燥。（3）固定 干燥后將涂片在火焰上緩緩?fù)ㄟ^三次，此為“固定”。目的是使細(xì)菌粘于玻片上，染色和水沖時不易脫落；且細(xì)菌為蛋白質(zhì)，被熱凝固可保持完整形態(tài)。（4）染色 初染→媒染→脫色→復(fù)染① 加結(jié)晶紫染液于標(biāo)本上，使其覆滿標(biāo)本，染1~2分鐘。② 細(xì)水沖洗。③ 加路哥氏碘溶液經(jīng)1分鐘。④ 水洗。⑤ 加95%酒精于玻片上來回流動，傾去酒精。如此重復(fù)2~3次（約30秒鐘）。⑥ 水洗。⑦ 加稀釋復(fù)紅染液，染約1分鐘。⑧ 水洗，用吸水紙吸干。（5）鏡檢 革蘭氏陽性菌在結(jié)晶紫著色后不易被酒精脫色，故仍為深藍(lán)色或紫色；革蘭氏陰性菌在結(jié)晶紫著色后易被酒精脫色，故經(jīng)稀釋復(fù)紅復(fù)染后成紅色。三、實驗記錄革蘭氏染色過程：取玻片一塊，在玻片上滴三小滴水（有一定的距離），分別用接種環(huán)取EC（大腸桿菌）和BS（金黃色葡萄球菌）與兩邊的水滴上，并混勻，灼燒接種環(huán)后再分別取EC和BS于中間的水滴上混勻（即中間水滴是兩種菌的混合物），并在酒精燈下灼燒至干（小心不要將玻片炸裂），用結(jié)晶紫進(jìn)行初染，細(xì)水沖洗后，加路哥氏碘液進(jìn)行媒染，水洗后加酒精脫色2~3次，水沖洗后加稀釋復(fù)紅染液復(fù)染一分鐘，水洗，并用吸水紙吸干。大腸桿菌為革蘭氏陰性菌，染色后呈紫紅色。普葡萄球菌為革蘭氏陽性菌，染色后呈現(xiàn)藍(lán)紫色。以下為實驗觀測圖：四、思考題1．染色法在微生物學(xué)上有何實際意義？染色法可以更方便的觀察細(xì)菌的具體形態(tài)，更方便觀察細(xì)菌，革蘭氏染色法有更重要的意義，可以鑒別細(xì)菌，把眾多的細(xì)菌分為兩大類，革蘭氏陽性菌和革蘭氏陰性菌，在實驗方面，可以通過殺死陽性或陰性菌而得到目的菌。2．比較復(fù)染色法與單染色法的優(yōu)缺點。答：單染色法：優(yōu)點：僅用一種染料著色，所有的細(xì)菌均被染成一種顏色，簡單方便，可用來觀察細(xì)菌的形態(tài)和排列方式。缺點：但無鑒別細(xì)菌的作用。復(fù)染色法：優(yōu)點：用二種或二種以上的染料著色，由于不同種類的細(xì)菌或同種細(xì)菌的不同組成結(jié)構(gòu)對染料有不同的反應(yīng)性而被染成不同的顏色，從而有鑒別細(xì)菌的作用。缺點：使用試劑較多，過程較單染色法更復(fù)雜繁瑣。3．以革蘭氏染色法為例，說明它至少要涉及幾種試劑？各起何作用？答：至少用到4種試劑。結(jié)晶紫溶液進(jìn)行初染，路哥氏碘液進(jìn)行媒染，95%酒精進(jìn)行脫色，稀釋復(fù)紅染液進(jìn)行復(fù)染。4．要確證一個未知細(xì)菌的革蘭氏染色性質(zhì)，你可用什么方法來說明你的結(jié)果是可靠的？答：通過在顯微鏡下的菌體被染的顏色可以判斷，凡能使第一種染料結(jié)晶紫保留藍(lán)色的細(xì)菌為革蘭氏陽性細(xì)菌，凡被灑精脫色后染上對比顏料沙黃或稀釋復(fù)紅而呈紅色的細(xì)菌為革蘭氏陰性細(xì)菌。微生物學(xué)實驗報告實驗二 培養(yǎng)基的的制備滅菌及接種技術(shù)培養(yǎng)基的制備和滅菌一、目的要求掌握基礎(chǔ)培養(yǎng)基應(yīng)具備的條件及其制備方法。二、實驗原理培養(yǎng)基是人工配制的供給細(xì)菌或其它微生物生長繁殖的營養(yǎng)基質(zhì)。微生物的種類雖然繁多，但對基本營養(yǎng)物質(zhì)如碳源、氮源、能源、無機(jī)鹽、生長因子和水分等的要求卻有共同性。這些營養(yǎng)物質(zhì)的作用是：提供合成菌體和代謝產(chǎn)物的原料；提供生命活動必需的能量；調(diào)節(jié)代謝環(huán)境。作為培養(yǎng)基必須具備下列條件：①含有適當(dāng)?shù)乃趾鸵欢ㄅ浔鹊倪m宜的營養(yǎng)物質(zhì)。②具有合適的酸堿度（pH值）。③有適當(dāng)?shù)奈锢頎顟B(tài)：液體培養(yǎng)基、固體培養(yǎng)基和半固體培養(yǎng)基。④培養(yǎng)基必須經(jīng)滅菌成為無菌狀態(tài)后方能使用。利用培養(yǎng)基對細(xì)菌等
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