【正文】 還好發(fā)現(xiàn)問題以后及時作出了調(diào)整，這讓我們在后面的實驗中做的很順利。要鎮(zhèn)靜的想辦法去補(bǔ)救，就好比實驗中遇到的一些酒精燈燃燒時灑了啊，加熱時樣品因沸騰而溢出啊。 實驗步驟： 涂片 —— →干燥 —— →草酸銨結(jié)晶紫染色（ 60s） —— →水洗 —— →碘液媒染（ 60s） —— → 95％酒精脫色（ 30s） —— →水洗 —— →番紅（ 2min） —— →水洗 —— →干燥 —— →鏡檢 實驗結(jié)果： 由 于染色不是特別的充分，所以觀察的結(jié)果不是很清晰。 5 管法結(jié)果如表 92 所示 ,15 管法結(jié)果如表 93 所示。 將接種管置于 36 士 1℃培養(yǎng) 24 士 2h。在靜水中取樣時，先用右手揭去塞子，瓶口朝下浸入水下約 30cm 處，然后將瓶子反轉(zhuǎn)過來，待水注滿后，取出塞好瓶口。 經(jīng)最后證實為大腸菌群陽性的試管比例乘以（ 3）中計數(shù)的平板菌落數(shù)，再乘以稀釋倍數(shù)，即為每 g（ mL）樣品中大腸菌群數(shù)。小心旋轉(zhuǎn)平皿，將培養(yǎng)基與樣液充分混勻，待瓊脂凝固后，再加 3～ 4mL VRBA 覆蓋平板表層。 4. 大腸菌群最可能數(shù)（ MPN）的報 告 根據(jù)大腸菌群 LST 陽性管數(shù)，檢索 MPN 表（如表 91 所示），報告每 g（ mL）樣品中大腸菌群的 MPN 值。 2h，觀察倒管內(nèi)是否有氣泡產(chǎn)生， 24177。 實驗報告 黃河水利職業(yè)技術(shù)學(xué)院 13 （ 2）液體樣品：以無菌吸管吸取 25mL 樣品置盛有 225mL 磷酸鹽緩沖液或生理鹽水的無菌錐形瓶（瓶內(nèi)預(yù)置適當(dāng)數(shù)量的無菌玻璃珠）中，充分混勻，制成1:10 的樣品勻液。若超過國家標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定可判斷為不合格豆制品或面筋。 1油炸小食品的落菌總數(shù)標(biāo)準(zhǔn)依據(jù)國家強(qiáng)制性標(biāo)準(zhǔn) GB165652021 《油炸小食品衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)》規(guī)定，油炸類炒貨大腸菌群為≤ 30MPN/100g，超過國家標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定可判斷為不合格炒貨制品。 餅干的落菌總數(shù)標(biāo)準(zhǔn)依據(jù)國家強(qiáng)制性標(biāo)準(zhǔn) GB71002021《餅干衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)》規(guī)定，非夾心餅干的菌落總數(shù)不得超過 750cfu/g，夾心餅干菌落總數(shù)不得超過 2021cfu/g；餅干產(chǎn)品的霉菌計數(shù)不得超過 50cfu/g，超過 國家標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定可判斷為不合格餅干。 （ 4）若空白對照上有菌落生長，則此次檢測結(jié)果無效。 示例： 稀釋度 1:100（第一稀釋度） 1:1000（第二稀釋度） 菌落數(shù)（ cfu） 232,244 33,35 122( )232 + 224 33 35 544 = 24727[ 2 ( 2) ] 10 CNnn?? ??? ??? ? ?? 上述數(shù)據(jù)修約后，表示為 25000 或 104。菌落計數(shù)以菌落形成單位（ colonyforming units， cfu）表示。 1℃恒溫水浴箱中保溫）傾注平皿，并轉(zhuǎn)動平皿使其混合均勻。 2．儀器用具：恒溫培養(yǎng)箱（ 36℃）、恒溫水浴鍋、酒精燈、試管架、無菌培養(yǎng)皿、無菌移液管（ 10mL 和 1mL）、無菌不銹鋼勺、酒精燈。由前幾年的“蘇丹紅 紅心鴨蛋”再到這幾年的“三聚氰胺奶粉事件”和“瘦肉精事件”還有“地溝油”等等一系列的事件都不得不讓人們對食品安全 問題高度關(guān)注。 二、 實驗說明 實驗報告 黃河水利職業(yè)技術(shù)學(xué)院 4 菌落總數(shù)是指食品檢樣經(jīng)過處理，在一定條件下培養(yǎng)后，所得 1g 或 1mL 檢樣中所含細(xì)菌菌落總數(shù)。 （ 4）根據(jù)對樣品污染情況的估計選擇 2～ 3 個適宜稀釋度，分別在制作 10倍遞增稀釋的同時，以吸取該稀釋度的吸管移取 1mL 稀釋液于滅菌平皿中，每個稀釋度做兩個平皿。 3h。 實驗報告 黃河水利職業(yè)技術(shù)學(xué)院 6 （ 3）當(dāng)平板上出現(xiàn)菌落間無明顯界線的鏈狀生長時，則將每條單鏈作為一個菌落計數(shù)。 5．菌落總數(shù)的報告 （ 1）菌落數(shù)小于 100cfu 時，按“四舍五入”原則修約，以整數(shù)報告。 糕點、面包、月餅的落菌總數(shù)標(biāo)準(zhǔn)糕點、面包、依據(jù)國家強(qiáng)制性標(biāo)準(zhǔn) GB 70992021《糕點、面包衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn) 》規(guī)定，月餅產(chǎn)品中菌落總數(shù)不得超過 1500cfu/g，大腸菌群不得超過 30MPN/100g，霉菌計數(shù)不得超過 100cfu/g；蛋糕生產(chǎn)的標(biāo)準(zhǔn)要求：菌落總數(shù)≤ 10000cfu/g，大腸菌群≤ 300MPN/100g，霉菌≤150cfu/g，超過國家標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定可判斷為不合格糕點類產(chǎn)品。若超過國家標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定可判斷為不合格純凈水或礦泉水。 1碳酸飲料的菌落總數(shù)標(biāo)準(zhǔn)依據(jù)國家強(qiáng)制性標(biāo)準(zhǔn) 《碳酸飲料衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)》規(guī)定，碳酸飲料產(chǎn)品的酵母應(yīng)≤ 10cfu/mL，菌落總數(shù)應(yīng)≤100cfu/mL，大腸菌群應(yīng)≤ 6MPN/100mL；超過國家標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定可判斷為不合格碳酸飲料。 三、實驗器材 1．儀器和材料 恒溫培養(yǎng)箱（ 36℃）、恒溫水?。?46℃）、冰箱（ 2～ 5℃）、天平、顯微鏡、溫度計、 500mL 無菌錐形瓶 1 個（內(nèi)裝 225mL 無菌水和適量玻璃珠）、無菌培養(yǎng)皿（ 90mm） 10 套、 1mL 無菌吸管 10 支、 10mL 無菌吸管 10 支、 50mL 試管 10 支、無菌生理鹽水 200mL；火柴、載玻片、接種針、試管架、杜氏管 10 支。從制備樣品勻液至樣品接種完畢，全過程不得超過 15min。 1℃培養(yǎng) 48177。 （ 2）平板計數(shù) 2～ 3個適宜的連續(xù)稀釋度，每個稀釋度接種 2個無菌平皿，每皿 1mL。 (4)證實試驗 從 VRBA 平板上挑取 10 個不同類型的典型和可疑菌落，分別移種于 BGLB 肉湯管內(nèi)， 36177。 取自來水樣時，至少應(yīng)先放水 5min，以沖去龍頭口所帶的微生物，獲得主流管中有代表性的水樣。 對于已經(jīng)處理過的出廠自來水，需經(jīng)常檢驗或每天檢驗一次的，可直接接種5 份 10mL 水樣雙料培養(yǎng)基，每份接種 10mL 水樣。 復(fù)發(fā)酵試驗：將上述鏡檢之菌落同時接種于乳糖蛋白胨發(fā)酵管，置于 36 士1℃培養(yǎng) 18～ 24h，觀察產(chǎn)氣情況，有產(chǎn)酸產(chǎn)氣者即證實有大腸菌群存在。查 MPN 表，發(fā)現(xiàn)我們小組測的樣品中每 100ml 大腸桿菌群最可能數(shù)為 200 個。在我們?yōu)槠谶@兩周的實驗中我們失敗了好多次，也曾想到過放