【正文】
三分之二來自放線菌所生產,而放線菌普遍存於土壤當中,土壤中的養(yǎng)分通常很貧瘠,所以本實驗所使用的篩選培養(yǎng)基一不含養(yǎng)分的水瓊脂培養(yǎng)基 (water agar),另一培養(yǎng)基為十分之一的營養(yǎng)培養(yǎng)基,可以用來篩選土壤中的一般細菌。土壤中也存在許多真菌,為了避免真菌的生長,培養(yǎng)基中添加了抗生素 環(huán)己胺( cycloheximide, 抑制真核細胞蛋白質合成),避免真菌的生長。 ?材料:土壤樣本、無生理食鹽菌水、酒精燈、 L型玻棒、水瓊脂培養(yǎng)基 (water agar)、 1/10營養(yǎng)培養(yǎng)基,菌株若干株。 ?實驗步驟: 秤土壤 1 g放入 9 ml生理食鹽水中,震盪混合,做 10倍連續(xù)稀釋成 101, 102, 103, 104, 105(此部分由老師實驗前先準備)。 將培養(yǎng)基標示好座號、組別、種類。 以微量吸管取 100 ml稀釋菌液加於培養(yǎng)基的中央。 將玻棒浸入 95%酒精中,將沾附酒精的玻棒稍用火燒並放置酒精燈下方使其『冷卻』(酒精燈與 95%酒精要離遠一點,不要讓火滴到酒精中)。 用冷卻的玻棒把菌液均勻塗佈於平板表面上,塗佈的時候只需將培養(yǎng)基稍微打開,邊推邊轉動培養(yǎng)基,盡量塗均勻及避免污染。 塗佈到菌液乾掉為止(這樣才可倒置培養(yǎng))。有時會不容易推乾,可置於無菌操作臺吹乾,培養(yǎng)於室溫中 3~4天。 觀察不同培養(yǎng)基所長出的菌落型態(tài)。 題目:真菌的接種、培養(yǎng)與觀察 ?目的:了解絲狀真菌的接種方法、菌落型態(tài)特徵與顯微鏡下的外觀與型態(tài) ?原理:真菌在在自然界中常以腐生存在,可分解許多有機物獲得能量來源,也有些真菌是寄生或互利共生。真菌中的單細胞族群有酵母菌、白色念珠菌等,其他多數(shù)為多細胞,例如黴菌和蕈類。 ?材料:沙保羅培養(yǎng)基 (Sabouraud‘ s medium),橘子、牙籤、顯微鏡、載玻片、蓋玻片 ?實驗步驟: 將橘子培養(yǎng)至發(fā)黴狀態(tài)(柳丁可能不太容易)(將橘子弄得有點滲出汁液,靜置幾天即可,發(fā)黴後可用塑膠袋包覆)。 將培養(yǎng)基試管標示好座號、組別,燒紅接種環(huán)、冷卻,以接種環(huán)挖一點發(fā)黴的菌絲。 以四區(qū)畫線法將黴菌塗於培養(yǎng)基上。置於室溫培養(yǎng)一週。 以無菌牙籤在菌落周圍將瓊膠切割,以牙籤挑起切割菌塊(請勿抖動),將將菌塊翻轉(有菌絲的面朝下),貼附於新培養(yǎng)基的正中央。 置於室溫培養(yǎng)一週。 以牙籤輕刮一些菌落正中間的分生孢子,塗於載玻片正中間,加入 15 ml 染劑(乳酸酚棉藍Lactophenol cotton blue),以蓋玻片覆蓋,置於顯微鏡下,以 40X物鏡觀察。 菌絲的觀察則需以牙籤輕刮菌落最外圍的新生菌絲,步驟與上述相同 。 謝謝觀看 /歡迎下載 BY FAITH I MEAN A VISION OF GOOD ONE CHERISHES AND THE ENTHUSIASM THAT PUSHES ONE TO SEEK ITS FULFILLMENT REGARDLESS OF OBSTACLES. BY FAITH I BY FAITH