微生物實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)一顯微鏡的使用及微生物形態(tài)觀察-資料下載頁(yè)
2025-01-08 12:34本頁(yè)面
【正文】 ） 六套培養(yǎng)皿一組 , 用報(bào)紙包裝。 （ 2） 取四支吸量管，在其吸端塞少許棉花后用長(zhǎng)報(bào)紙條包扎。 （ 3） 干熱滅菌 :上述玻璃器皿在 160176。 C烘箱內(nèi) 2小時(shí)。 在 3支試管中各裝入 9ml自來(lái)水，塞上硅膠塞 , 同下述培養(yǎng)基一起用高壓蒸汽滅菌。 53 3. 培養(yǎng)基的制備 ⑴ 稱(chēng)量： 牛肉膏 蛋白胨 NaCl 瓊脂 自來(lái)水 3g 150ml ⑵ 溶化： 用燒杯在電爐上將上述各物依次溶解，注意補(bǔ)充水 。 ⑶ 調(diào) pH值： 溶液稍冷后用 pH試紙、 10% NaOH或 10%HCl 調(diào)整溶液 的 pH在 。 ⑷ 分裝： 試管 4支各裝其高度 1/5的溶液，其余溶液裝錐形瓶。 ⑸ 加塞包扎 ： 錐形瓶加棉塞并用牛皮紙包扎。 ⑹ 濕熱滅菌 ： （高壓蒸汽滅菌） (103kPa)、 121℃ 滅菌 20min。 ⑺ 擱置斜面： 試管培養(yǎng)基冷至 50℃ 時(shí)斜擱使斜面長(zhǎng)度不 ` 超過(guò)試管一半 。 61 （二）微生物的分離、培養(yǎng)及形態(tài)觀察 1. 平板劃線分離法 (1) 倒平板 : 將融化并冷至 50℃ 的細(xì)菌培養(yǎng)基倒約15~20ml于無(wú)菌培養(yǎng)皿中，立即放在桌上輕輕轉(zhuǎn)動(dòng)使之均勻。冷后成平板。（ 3個(gè)） (2) 劃線： 在火焰旁，左手拿平板，右手拿接種環(huán)，取一環(huán)菌液（原污水）在平板上劃線。常用的方法有如下三種： 劃線完畢后 蓋上皿蓋，倒置 于 37℃ 恒溫箱中 培養(yǎng) 48小時(shí)后觀 察結(jié)果。 62 (1) 取樣 … (2) 稀釋水樣 以無(wú)菌操作按十倍稀釋法用無(wú)菌吸量管和無(wú)菌水將 103倍的水樣稀釋至 10 10 106倍。 (3) 平板制作 將三套無(wú)菌培養(yǎng)皿編號(hào)，將上述三種濃度的水樣各吸 于相應(yīng)的培養(yǎng)皿中。加熱融化培養(yǎng)基，待其冷至約 45℃ 時(shí)以無(wú)菌操作傾注 10~15ml 入培 養(yǎng)皿中，馬上將培養(yǎng)皿平 放桌上 輕輕轉(zhuǎn) 動(dòng)使之混合均勻， 冷卻后 成平板。 倒置，于 37℃ 培 養(yǎng) 48小時(shí)后觀察 結(jié)果。 樣品 101 102 103 104 105 106 64 3．菌落形態(tài)特征的觀察 觀察平板上菌落的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、大小、菌落高度、顏色、透明度、氣味及粘滯性等。 4．微生物個(gè)體形態(tài)觀察 在觀察了已培養(yǎng)好的各種微生物菌落形態(tài)以后，用結(jié)晶紫單染色，進(jìn)行顯微鏡的觀察。并繪制形態(tài)圖。 5. 斜面接種技術(shù) 在培養(yǎng)好的平板上選定一個(gè) 典 型的細(xì)菌菌落。將接種環(huán)在火焰上 灼燒滅菌。以無(wú)菌操作法輕輕挑取 少許菌種，迅速將接種環(huán)伸進(jìn)斜面 試管中，在培養(yǎng)基上由底部向頂部 輕輕劃線。試管塞好棉塞，在 37℃ 培養(yǎng) 48小時(shí)后觀察。 三 . 思考題： 1. 為什么干熱滅菌比濕熱滅菌所需要的溫度高、時(shí)間長(zhǎng)？ 2. 培養(yǎng)基配好后，為什么必須立即滅菌？ 3. 分離活性污泥為什么要稀釋水樣 ? 你考慮怎樣來(lái)進(jìn)行生物膜法中生物膜的純種分離和培養(yǎng) ?
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