20xx年醫(yī)學專題—流式細胞術及其科研應用(編輯修改稿)
2025-11-11 18:47 本頁面
【文章內容簡介】 或者細胞培養(yǎng)上清液等）中相應的抗原，再結合(ji233。h233。)PE標記檢測抗體，形成雙抗體夾心結構，通過流式細胞儀進行熒光檢測，便可同時對樣本中的多種可溶性蛋白成分進行定量,+,+,Analyte of interest,Fluorescent detection Ab,capture Bead,capture Ab,Bead,第四十一頁，共一百零五頁。,BD Cytometric Bead Array,1,2,3,,不同強度紅色熒光(y237。ngguāng)的捕獲微球，在FCM FL3檢測,不同的目標(m249。biāo)蛋白,PE 標記的檢測抗體，在FCM FL2檢測。 PE的熒光強度即反映靶蛋白(d224。nb225。i)的含量,,4,5,6,第四十二頁，共一百零五頁。,Human Th1/Th2 Lymphokine CBA,第四十三頁，共一百零五頁。,Human Th1/Th2 Lymphokine CBA,Th1/Th2 panel: IL2, IL4, IL5, IL10, TNF?, IFN? 用 FL3熒光(y237。ngguāng)的強度不同區(qū)別 種不同的微球（beads） Direct sandwich immunoassay FL2 (PE) detector reagent 樣本處理 6 cytokines from a 50 ?L sample Three pipetting steps 3 hour total incubation Quantitative results and complete report generation Software assisted quantitative analysis, with curve fitting algorithm Result reporting included in software,第四十四頁，共一百零五頁。,Human Th1/Th2 Lymphokine CBA,,,,,第四十五頁，共一百零五頁。,Human Th1/Th2 Cytokine CBA Kit,No sample added in Detector antibodies only,第四十六頁，共一百零五頁。,ChemokineI CBA Assay Standard,0 pg/ml,CBA Assay Standard,第四十七頁，共一百零五頁。,10 pg/ml,CBA Assay Standard cont.,ChemokineI CBA Assay Standard,第四十八頁，共一百零五頁。,20 pg/ml,CBA Assay Standard cont.,ChemokineI CBA Assay Standard,第四十九頁，共一百零五頁。,40 pg/ml,CBA Assay Standard cont.,ChemokineI CBA Assay Standard,第五十頁，共一百零五頁。,80 pg/ml,CBA Assay Standard cont.,ChemokineI CBA Assay Standard,第五十一頁，共一百零五頁。,156 pg/ml,CBA Assay Standard cont.,ChemokineI CBA Assay Standard,第五十二頁，共一百零五頁。,312 pg/ml,CBA Assay Standard cont.,ChemokineI CBA Assay Standard,第五十三頁，共一百零五頁。,625 pg/ml,CBA Assay Standard cont.,ChemokineI CBA Assay Standard,第五十四頁，共一百零五頁。,1250 pg/ml,CBA Assay Standard cont.,ChemokineI CBA Assay Standard,第五十五頁，共一百零五頁。,2500 pg/ml,CBA Assay Standard cont.,ChemokineI CBA Assay Standard,第五十六頁，共一百零五頁。,Human Th1/Th2 Lymphokine CBA –標準(biāozhǔn)曲線,5000 pg/ml,2500 pg/ml,1250 pg/ml,625 pg/ml,312 pg/ml,80 pg/ml,20 pg/ml,IL2 IL4 IL5 IL10 TNF? IFN?,IL2 IL4 IL5 IL10 TNF? IFN?,第五十七頁，共一百零五頁。,操作步驟,檢測物與捕獲微球共孵育。 洗滌。 標記熒光探測試劑（FITC或PE標記）。 洗滌。 流式細胞儀上機檢測。 CBA分析軟件(ruǎn ji224。n)批量數據分析。,第五十八頁，共一百零五頁。,CBA 分析(fēnxī)軟件,Home Screen,Toolbar,Calibration entry screen,第五十九頁，共一百零五頁。,與傳統(tǒng)的ELISAs檢測(jiǎn c232。)相比,能夠同時對單一樣本(y224。ngběn)進行多種目的蛋白檢測 較傳統(tǒng)檢測節(jié)省樣本量（50μl） 與ELISAs相比靈敏度高（2.8pg/ml）、重復性好 檢測的線性范圍寬（05000pg/ml） 所有分析只需一組標準曲線 避免酶聯(lián)反應所致人工假象 強大的CBA分析軟件 節(jié)省操作時間、檢測時間和分析時間,第六十頁，共一百零五頁。,Human Allergy Mediator Kit,第六十一頁，共一百零五頁。,使用Prostatespecific antigen（PSA3）及其突變體PSA3A對前列腺癌患者T細胞免疫，通過Human Th1/Th2 Cytokine
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