20xx年醫(yī)學專題—第五篇：流式細胞儀結果分析(編輯修改稿)
2024-11-13 18:02 本頁面
【文章內容簡介】 h249。)直方圖 雙參數(shù)直方圖:點圖 二維等高圖 假三維等高圖 三參數(shù)直方圖 多參數(shù)分析,直分析(fēnxī)方圖,設門分析(fēnxī):REGION和GATE設置,二、數(shù)據(jù)顯示方式,第三十六頁，共七十七頁。,由一維參數(shù)(散射光或熒光(y237。ngguāng))與顆粒計數(shù)(COUNT)構成，反映同樣散射光或熒光強度的顆粒數(shù)量的多少。,（一）單參數(shù)(cānsh249。)直方圖,第三十七頁，共七十七頁。,單參數(shù)(cānsh249。)直方圖,第三十八頁，共七十七頁。,雙參數(shù)直方圖：縱軸和橫軸分別代表被測量細胞的兩個測量參數(shù)，根據(jù)這兩個參數(shù)就可以確定(qu232。d236。ng)細胞在圖上的表達位置。 雙參數(shù)信號通常采用對數(shù)信號，最常用的是點密圖，在圖中，每個點代表一個細胞，點圖利用顆粒密度反映同樣散射光或熒光強度的顆粒數(shù)量的多少。,（二）雙參數(shù)(cānsh249。)直方圖,第三十九頁，共七十七頁。,1.雙參數(shù)(cānsh249。)直方圖點圖,第四十頁，共七十七頁。,雙參數(shù)(cānsh249。)直方圖點圖,第四十一頁，共七十七頁。,2. 二維等高圖,由類似地圖上的等高線組成，其本質也是雙參數(shù)直方圖。 等高圖上每一條連續(xù)曲線上具有相同的細胞相對或絕對數(shù)，即“等高”。 曲線層次(c233。ngc236。)越高(越里面的線) 所代表的細胞數(shù)愈多。 等高線越密集則表示細胞數(shù)變化率越大。,第四十二頁，共七十七頁。,二維等高圖,第四十三頁，共七十七頁。,3. 假三維等高圖,第四十四頁，共七十七頁。,（三）三參數(shù)(cānsh249。)直方圖,第四十五頁，共七十七頁。,多參數(shù)(cānsh249。)分析：當細胞標記了多色熒光，被激發(fā)光激發(fā)后，得到的熒光信號和散射光信號可根據(jù)需要進行組合分析。,（四）流式細胞儀的多參數(shù)(cānsh249。)分析,第四十六頁，共七十七頁。,Gate設置：指在某一張選定參數(shù)的直方圖上，根據(jù)該圖的細胞(x236。bāo)群分布選定其中想要分析的特定細胞(x236。bāo)群，并要求該樣本所有其他參數(shù)組合的直方圖只體現(xiàn)這群細胞(x236。bāo)的分布情況。,根據(jù)門的形狀又分為(fēn w233。i)了線性門、矩形門、圓形門、多邊形門、任意形狀門和十字門。,三、設門分析(fēnxī)技術,第四十七頁，共七十七頁。,A 淋巴細胞 B 單核細胞 C 中性(zhōngx236。ng)粒細胞,A、B、C均為任意(r232。ny236。)門,第四十八頁，共七十七頁。,線性門,第四十九頁，共七十七頁。,Region設置: 區(qū)閾（region, R）與門(gate, G ) 是兩個相關(xiāngguān)的概念，區(qū)閾可與門對應，但是也可以包含于門。,第五十頁，共七十七頁。,D1 CD4+/CD3 D2 CD4+/CD3+ D3 CD4 /CD3 D4 CD4 /CD3+,如十字門分析(fēnxī)時，起就可以由四個區(qū)域構成，即G=D1+D2+D3+D4。,第五十一頁，共七十七頁。,樣本制備 標記染色(rǎns232。) 液相芯片技術 質量控制,第四節(jié) 流式細胞儀免疫分析的技術(j236。sh249。)要求,第五十二頁，共七十七頁。,外周血淋巴細胞樣品的制備 分離單個核細胞(x236。bāo) 培養(yǎng)細胞的樣品制備 蛋白酶消化 機械吹打 使貼壁細胞脫落 洗滌 尼龍網(wǎng)過濾,一、免疫檢測樣品(y224。ngpǐn)制備,第五十三頁，共七十七頁。,新鮮實體組織單細胞懸液的制備(zh236。b232。i) 機械法 酶處理法 化學試劑處理法 表面活性劑處理法 單細胞懸液的保存 深低溫保存法（一年） 乙醇或甲醇保存法（2周） 甲醛或多聚甲醛保存法（2月）,第五十四頁，共七十七頁。,適用條
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