20xx年醫(yī)學(xué)專題—流式細(xì)胞儀的原理(編輯修改稿)
2024-11-11 18:42 本頁面
【文章內(nèi)容簡介】 用熒光標(biāo)記的單克隆抗體染色，做多色分析 熒光信號(hào)(x236。nh224。o)的強(qiáng)弱，反映了細(xì)胞抗原的表達(dá)含量,第二十一頁，共五十頁。,第二十二頁，共五十頁。,熒 光 補(bǔ) 償,第二十三頁，共五十頁。,5 Color Single Laser (488nm) FITC/PE/ECD/PC5/PC7,第二十四頁，共五十頁。,四、細(xì) 胞 分 選 原 理,通過流式細(xì)胞儀進(jìn)行細(xì)胞分選主要是在對(duì)具有(j249。yǒu)某種特征的細(xì)胞需進(jìn)一步培養(yǎng)和研究時(shí)進(jìn)行的。,第二十五頁，共五十頁。,細(xì) 胞 分 選 示 意 圖,第二十六頁，共五十頁。,第二十七頁，共五十頁。,五、數(shù) 據(jù) 的 顯 示 與 分 析,參數(shù)：FS,SS,FL 數(shù)據(jù)顯示方式 （單參數(shù)直方圖 、雙參數(shù)散點(diǎn)圖 、二維等高圖 、假三維等高圖 、三參數(shù)散點(diǎn)圖 ） 設(shè)門分析(fēnxī)技術(shù),第二十八頁，共五十頁。,（一）參 數(shù) 說 明,FS：反映顆粒的大小(d224。xiǎo) SS：反映顆粒的內(nèi)部結(jié)構(gòu)復(fù)雜程度 FL：反映顆粒被染上的熒光數(shù)量多少以及熒光種類,第二十九頁，共五十頁。,（二）數(shù) 據(jù) 顯 示 方 式,直分析(fēnxī)方圖,單參數(shù)(cānsh249。)直方圖 雙參數(shù)直方圖:點(diǎn)圖 二維等高圖 假三維等高圖 三參數(shù)直方圖 多參數(shù)分析,第三十頁，共五十頁。,1.單 參 數(shù) 直 方 圖,由一維參數(shù)(散射光或熒光)與顆粒計(jì)數(shù)(COUNT)構(gòu)成(g242。uch233。ng)，反映同樣散射光或熒光強(qiáng)度的顆粒數(shù)量的多少。,第三十一頁，共五十頁。,單 參 數(shù) 直 方 圖,第三十二頁，共五十頁。,2.雙 參 數(shù) 直 方 圖,雙參數(shù)直方圖：縱軸和橫軸分別代表被測量細(xì)胞的兩個(gè)測量參數(shù)，根據(jù)這兩個(gè)參數(shù)就可以確定細(xì)胞在圖上的表達(dá)(biǎod225。)位置。 雙參數(shù)信號(hào)通常采用對(duì)數(shù)信號(hào)，最常用的是點(diǎn)密圖，在圖中，每個(gè)點(diǎn)代表一個(gè)細(xì)胞，點(diǎn)圖利用顆粒密度反映同樣散射光或熒光強(qiáng)度的顆粒數(shù)量的多少。,第三十三頁，共五十頁。,雙 參 數(shù) 直 方 圖 點(diǎn) 圖,第三十四頁，共五十頁。,（三）設(shè) 門 分 析 技 術(shù),1.Gate設(shè)置：指根據(jù)該圖的細(xì)胞群分布選定(xuǎn d236。nɡ)其中想要分析的特定細(xì)胞
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