某公司pcr系列產(chǎn)品操作培訓(xùn)教材(編輯修改稿)
2025-03-22 12:57 本頁面
【文章內(nèi)容簡介】 CR mix與 Taq酶充分混勻 ?加模板時應(yīng)避免吸到沉淀 漂浮的雜質(zhì)常粘附于管壁，中間吸樣較安全 ?切勿在 PCR管上做標(biāo)記，但應(yīng)注意樣本順序 ?上機前應(yīng)離心去除氣泡 ?標(biāo)準(zhǔn)品加樣時應(yīng)盡量避免加樣誤差，影響標(biāo)準(zhǔn)曲線 儀器檢測通道選擇 STD系列產(chǎn)品 ? CT/NG/UU聯(lián)合檢測試劑盒 ? 淋球菌核酸檢測試劑盒 ? 沙眼衣原體核酸檢測試劑盒 ? 解脲脲原體核酸檢測試劑盒 樣本類型 采集方法 ?宮頸脫落細胞 用棉試子擦去宮頸口的分泌物，取宮頸環(huán)狀上皮與柱狀上皮轉(zhuǎn)化處宮頸脫落細胞。 ?泌尿生殖道標(biāo)本 用細小棉拭子伸入尿道約 24厘米，捻動拭子采集上皮細胞，將棉拭子置入無菌玻璃管，密閉送檢（采集標(biāo)本前 2小時禁小便）。 樣本保存 ?樣本采集后，如若不能馬上檢測，應(yīng)將樣本置于冰箱 4℃ 存放，并在一周時間內(nèi)檢測。應(yīng)避免反復(fù)凍融。 ?一周后檢測的標(biāo)本應(yīng)保存在 20 ℃ 。 ?棉拭子樣本應(yīng)在真空管中保存，要操作前再加生理鹽水 /細胞保存液進行洗脫。 DNA提取 取 800ul樣本離心得沉淀 ↓ 加入細胞裂解液 50ul，煮沸 10min ↓ 12023離心 10min即可上機 若肉眼未見沉淀，可增加取樣量，再次離心收集沉淀； 若沉淀雜質(zhì)較多，可用細胞保存液洗滌 12次； 血液多樣本，用蒸餾水洗滌 12次； 粘液多樣本，取樣時盡量去除粘液。 應(yīng)注意防止爆蓋： 金屬浴可壓重物（冰盒、冰袋等） 水浴應(yīng)采用螺旋管蓋的離心管 確保離心管質(zhì)量合格 優(yōu)點 ：簡單、快捷、方便。 缺點 ： HPV DNA純度較差，含有血紅素、蛋白、脂類等 PCR抑制劑。 ? 針對泌尿生殖道樣本 （棉拭子樣本） ，先用細胞保存液 /生理鹽水洗脫，收集沉淀，而后與上述操作一致 PCR試劑配制 ?按樣本數(shù)加入所需溶液的對應(yīng)量，充分混勻再分裝 對照設(shè)置 ?定性試驗 每次試驗都必須設(shè)置陰陽性對照 ?定量試驗 個別醫(yī)院要求定量結(jié)果，需增加標(biāo)準(zhǔn)品 （ 10 10 10 108 copies） 標(biāo)準(zhǔn)品一般可以反復(fù)凍融 34次，超過 5次，則不建議使用 標(biāo)準(zhǔn)品置于 20℃ 中保存 操作注意事項 ?PCR試劑保存配制 ?PCR試劑應(yīng)放于 20℃ 避光保存 ?PCR試劑應(yīng)避免反復(fù)凍融 ?試劑配制時不能佩戴有粉手套 ?PCR mix與 Taq酶充分混勻 ?加模板時應(yīng)避免吸到沉淀 漂浮的雜質(zhì)常粘附于管壁，中間吸樣較安全 ?切勿在 PCR管上做標(biāo)記，但應(yīng)注意樣本順序 ?上機前應(yīng)離心去除氣泡 ?標(biāo)準(zhǔn)品加樣時應(yīng)盡量避免加樣誤差，影響標(biāo)準(zhǔn)曲線 儀器檢測通道選擇 乙肝病毒定量產(chǎn)品 ? 對臨床血清標(biāo)本中的乙型肝炎病毒（ HBV）核酸 DNA
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