蛋白質(zhì)工程制藥(編輯修改稿)
2025-01-16 07:57 本頁面
【文章內(nèi)容簡介】 延長治療組小鼠的存活時間對健康小鼠超劑量使用時，沒有毒副作用的產(chǎn)生三個基本條件蛋白質(zhì) 分子設(shè)計的分類蛋白質(zhì)從頭設(shè)計蛋白質(zhì)分子設(shè)計策略順式思維理性化設(shè)計 —— 合理化設(shè)計基于各種功能篩選平臺的非理性逆向改造策略 —— 非理性的體外進化兩種策略的結(jié)合蛋白質(zhì)分子設(shè)計的策略蛋白質(zhì)分子設(shè)計三個基本條件蛋白質(zhì) 分子設(shè)計的分類蛋白質(zhì)從頭設(shè)計蛋白質(zhì)分子設(shè)計策略 順式思維理性化設(shè)計 ——合理化設(shè)計基于現(xiàn)有知識信息：蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)與功能；因此，受到已有認識水平的制約。蛋白質(zhì)從頭設(shè)計蛋白質(zhì)分子設(shè)計的策略蛋白質(zhì)分子設(shè)計三個基本條件蛋白質(zhì) 分子設(shè)計的分類蛋白質(zhì)從頭設(shè)計蛋白質(zhì)分子設(shè)計策略 基于各種功能篩選平臺的非理性逆向改造策略 ——非理性的體外進化1）構(gòu)建包含眾多突變蛋白的文庫： 隨機突變、 DNA改組等2）篩選文庫： 從功能入手進行篩選所需要的蛋白3）進行蛋白質(zhì)基本結(jié)構(gòu)、序列信息的分析蛋白質(zhì)分子設(shè)計的策略蛋白質(zhì)分子設(shè)計三個基本條件蛋白質(zhì) 分子設(shè)計的分類蛋白質(zhì)從頭設(shè)計蛋白質(zhì)分子設(shè)計策略兩種策略的結(jié)合非理性的體外進化： 彌補合理性化設(shè)計應用中的局限性，并且迅速得到大量有功能的目標分子，通過分析積累所需的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)與功能相關(guān)信息合理化設(shè)計： 對非理性篩選出的候選分子進行合理化的分子修正，使之進一步符合實際需求蛋白質(zhì)分子設(shè)計的策略蛋白質(zhì)分子設(shè)計三個基本條件蛋白質(zhì) 分子設(shè)計的分類蛋白質(zhì)從頭設(shè)計蛋白質(zhì)分子設(shè)計策略S2 蛋白質(zhì)工程的基本技術(shù)n 定點突變技術(shù) n 隨機突變技術(shù)寡核苷酸引物介導 的定點突變 PCR介導的定點突變盒式突變易錯 PCR DNA改組技術(shù)易錯 PCRn 連續(xù)易錯 PCR（ sequential error prone PCR）：經(jīng)以上一次 PCR突變的基因很難獲得滿意的結(jié)果，于是將前一輪 PCR擴增得到的有用突變基因作為下一輪 PCR的模板，每次獲得的突變累積起來，產(chǎn)生重要的有益突變?？蛇z傳的變化只發(fā)生在單一分子內(nèi)部，屬于 無性進化 （ asexual evolution）n 易錯 PCR（ errorprone PCR）：利用缺乏修復功能的 Taq酶，并設(shè)置容易引起出錯的 PCR反應條件，在擴增目的基因的同時引入堿基錯配，導致目的基因隨機突變 —— 完全隨機化易錯 PCRn 優(yōu)點： 簡便易行167。 不足： 突變文庫規(guī)模有限，有益突變少，后續(xù)篩選工作費力、耗時，只適用于較小的基因片段（ 800bp）DNA改組技術(shù)n DNA改組 （ DNA shuffling） ，又叫有性 PCR（ sexualPCR） 等，將單一基因 隨機片段
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