十六蛋白質工程和基因工程的簡介(編輯修改稿)
2025-02-10 20:56 本頁面
【文章內容簡介】 reaction, PCR） DNA測序的基本戰(zhàn)略 設法產生帶標記的不同長度的成套 DNA片段 ， 各帶有標記的片段起點相同 、 終點不同 ， 使待測的 DNA鏈中的相應每個核苷酸處都有斷裂或終止 。 通過 PAGE電泳 ， 能夠將相差一個核苷酸的 DNA片段分開 ， 放射自顯影后 ， 根據長短排列 ， 根據特定末端堿基的DNA片段就可讀出待測 DNA的堿基序列 。 ?酶法 ?化學法 ?測序技術進展 酶法序列分析的原理 酶反應 電泳方向 模板 CCGGTAGCAACT 3180。 5180。 GG 5180。 3180。 引物 dATPdCTPdGTPdTTP +ddATP dATPdCTPdGTPdTTP +ddTTP dATPdCTPdGTPdTTP +ddGTP dATPdCTPdGTPdTTP +ddCTP GGCCA GGCCATCGTTGA GGC GGCC GGCCATC GGCCATCGTTG GGCCATCG GGCCAT GGCCATCGT GGCCATCGTT A C G T AGTTGCTACC 3180。 5180。 TCAACGATGG 5180。 3180。 讀出模板互補序列 讀出模板序列 GGCCATCGTTGA GGCCATCGT GGCCATCGTTG GGCCATCGTT GGCCATCG GGCCATC GGCCA GGCCAT GGCC GGC DNA的Sanger測序法 (酶法 ) 讀出模板互補序列 dNTP 凝膠電泳 較大片段 較小片段 ddGTP ddATP ddCTP ddTTP 反應混合物 Klenow酶 未知序列的單鏈 DNA 讀出待測序列 CTGACTTCGACAAAGAA 5180。 3180。 放射性標記的引物 TGTT A C T G ddG ddG ddG ddG GACTGAAGCTGTT 3180。 5180。 CTGACTTCGACAA 5180。 3180。 DNA的測序儀示意圖 puter analysis 凝膠中 DNA移動方向 樣品槽 激光器 輸入光學系統 成象透鏡 聚焦透鏡 高靈敏度相機 旋光鏡 /棱鏡組件 DNA的化學測序示意圖 反應試劑 G反應：硫酸二甲酯 G+A反應：甲酸 T+C反應：肼 C反應： NaCl+肼 測序技術進展 同位素標記到熒光標記 ,平板電泳到毛細管電泳 多色熒光標記 毛細管電泳 單色熒光標記 平板電泳 同位素標記 平板電泳 A C G T A C G T 測序圖譜 T A TTG CAT TG TC TGCATTG T C T 引物標記法測
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