【文章內容簡介】 應檢測限限樣品具有的平均濃度，確定為檢測系統(tǒng)或方法可定量報告分析物的最低濃度或其他量值的限值。：廣義上是一個物質對分析物的的濃度或催化活力測定中任何一步驟的影響作用。：依據所有參考值的分布特征以及臨床使用要求，選擇合適的統(tǒng)計方法進行歸納分析后，確定參考值范圍的一部分為參考區(qū)間。5 工作程序。當客戶所指定的檢測方法不適合或已過期時應通知客戶并說明理由。，實驗室應優(yōu)先選擇標準檢測方法。若無標準檢測方法，實驗室應首先使用在已出版的公認/權威教科書中、經同行評議的書刊或雜志中，或國際、國家或地區(qū)的法規(guī)中所明確的程序（方法）。如果應用的是內部的規(guī)程，則應確認其符合相應的用途并形成文件。，并現行受控。 實驗室采用非標準方法時，應對所采用的方法采取以下的措施之一或其組合進行證實和確認：a）使用參考標準或標準物質進行校準；b) 與其他方法所得的結果進行比較；c) 實驗室之間的對比；d）對影響結果的因素作系統(tǒng)評審；e）根據對方法的理論和實踐經驗作科學理解，對所得結果不確定度進行評定。，它的基體組成應盡可能相似于實際檢測的病人標本；樣品中的分析物含量應在該該的醫(yī)學決定水平處，或者在有臨床意義的水平。有可能的話，做2個水平的精密度實驗，可以使用的樣品包括控制品（必須和實驗中進行每天質量質量控制用控制品是兩個不同的樣品）。校準品、已經檢測過的患者標本，或具有血清基質的定值材料。，則選取的樣品分析物含量應盡量與公司對檢測系統(tǒng)性能評估時采用的含量一致，便于比較。，要嚴格控制每次復溶凍干品時使用的復溶液的質量、開瓶要小心謹慎、加液準確、控制使凍干浸潤并復溶的時間，注意混勻的操作手法等。實驗時按照廠商操作規(guī)程要求做好校準，常規(guī)進行室內質量控制。每次實驗時，只使用在控的數據為核實實驗原始資料。出現失控時，必須重做核實實驗。，每天做2個濃度水平。批內是將評價樣品隨機插入病人標本中被檢測，一批內連做20次；天間是每天做一次評價樣品，累積20次結果。，計算均值、標準差和變異系數。從CLIA88允許誤差表中查閱評價的該項目允許誤差范圍。1/4CLIA88允許誤差范圍為批內不精密度判斷限，1/3CLIA88允許誤差范圍為天間不精密度判斷限。也可根據生物學變異確定的不精密度作為天間不精密度判斷限（I＜）。小于或等于判斷限的，檢測系統(tǒng)的不精密度屬可接受；大于判斷限，表示不精密度不符合要求。，千萬不可用一個項目組成的檢測系統(tǒng)被評價資料，認可分析系統(tǒng)所有項目檢測系統(tǒng)的性能。實驗室準備用一個新的檢測系統(tǒng)或測定方法（或新的試劑盒、新儀器）進行病人標本測定前，應與原有的檢測系統(tǒng)或公認的參考方法一起檢測一批病人標本，從測定結果的差異了解新檢測系統(tǒng)或方法引入后的偏倚。如果偏倚在允許的誤差范圍內，說明新檢測系統(tǒng)或方法替代原有檢測系統(tǒng)或方法不會對臨床引起明顯偏倚。準確度核實實驗操作要點和要求參照《實驗室間及實驗室內部比對程序》。，也要與真實標本具有相同的基體狀態(tài)。，濃度范圍遍及整個預期可報告范圍。最高濃度的樣品應達到可報告范圍的上限。各實驗樣品內分析物濃度呈等比例關系，不要呈倍比關系。（如血清），將外觀澄清的混合樣品離心，一分為二。在一份混合樣品中加入高濃度分析物貯存液。加入體積不得超過混合樣品體積的1/10，但又可使樣品中分析物濃度達到高限，充分混勻后為高值（H）樣品。在另一份混合樣品加入配制分析物貯存液的溶劑，加入量等于前一份樣品中加入的貯存液體積，充分混后為低值（L）樣品。將H和L樣品按5L、4L+1H、3L+2H、2L+3H、1L+4H、5H關系各自配制混合，形成系列評價樣品。，可收集高值樣品，用生理鹽水作系列不同程序稀釋，形成系列評價樣品。，第一次實驗由低到高重復測定3次，第二次實驗由高到低重復測定3次，即每個實驗樣品做6次重復測定。綜合所有結果作統(tǒng)計學處理。，對可報告范圍實驗的低、高限值樣品做多次測定，以均值表示該2個樣品測定結果。依照其他可報告范圍實驗樣品配制稀釋關系，可以計算出各實驗樣品內含分析物的濃度，為這些樣品的預期值。將這些樣品再經檢測系統(tǒng)或測定方法檢測，得到各檢測值。按實驗要求，每個樣品做6次重復測定，得6個實測值，它們和預期值形成6對預期值、實測值。，以X表示各樣品的預期值，以Y表示各樣品的實測值，將所在實驗結果點在圖上。，用直線回歸對數據進行統(tǒng)計，得直線回歸Y=bX+a，a接近于0，則可直接判斷測定方法可報告范圍在實驗已涉及濃度。，a較大，試著舍去某組數據，另作回歸統(tǒng)計，若縮小分析范圍后，回歸式有明顯改善，若b接近于1，a趨于0。此時，縮小的分析范圍是真實的可報告范圍。：理想的空白樣品應具有與檢驗的病人標本相同的基體。常使用檢測系統(tǒng)的系列校準品中的“零標準”作為空白。對某些項目，可使用術后已無某疾病的病人樣品（如前列腺腫瘤術后病人的無PSA血清）為空白樣品。：在證實某方法的靈敏度性能時，對空白樣品加入分析物配制成檢測限樣品。加入的分析物量應是廠商說明的檢測限濃度。在建立檢測限度時，根據需要必要制備多份檢測限樣品（如6份或更多），各檢測限樣品內分析物濃度呈倍比關系或等比例關系。它們的濃度應界于預期檢測限度高低一些的范圍內。：沒有具體規(guī)定，但常推薦做20次，符合臨床檢驗對重復檢測實驗的要求。廠商常推薦10次，目的為減少開支。實驗室也常采納做10次。：如果主要從空白樣品的重復性了解檢測低限，常常就做批內或短期實驗。如果主要從“檢測限”樣品的重復性了解定量的檢測限，推薦作較長時間的實驗，代表天間檢測性能。實際就做10次檢測（10天）。（LLD）：將空白樣品重復20次（不低于10次）作批內測定，計算空白（響應量）均值（L空白）和標準差（S空白）。通常估計95%%的兩種可能性。95%可能性為LLD= L空白+2. S空白；%%可能性為LLD= L空白+3. S空白。如果該方法在測定范圍內測定物質與吸不度間呈線性，則可求出LLD濃度。檢測系統(tǒng)或方法小于或等于檢測低限的分析物量只能報告“無分析物檢出”。（）：對多個近于檢測限濃度的樣品（肯定不是空白樣品）作無間重復檢測20次（不低于10次），計算扣除空白響應量后的樣品檢測響應量的均值（A）、標準差（S檢測限樣品）和變異系數（CV）。按正態(tài)分布規(guī)律，95%的BLD可能性為：BLDLLD+；%的BLD可能性為BLD=LLD+3. S檢測限樣品。例如，%可能性的生物檢測限，由低濃度向高濃度逐個計算差值（A3. S檢測限樣品），直至第一個低濃度樣品的差值（A3. S檢測限樣品）＞3. S檢測限樣品，則該該濃度為該方法檢測該物質的BLD。（FS）：根據多個近于檢測限濃度的樣品作無間重復檢測扣除空白晌應量后的樣品檢測響應量的變異系數（CV），從中選擇具有或最近于20%CV的對應濃度，即為FS。：將陽性干擾物加入臨床標本的混合液（干擾測定樣品）中，與不加的同一混合液（干擾對照樣品）組比較有無偏倚，稱為“配對差異”試驗?；旌弦旱母蓴_物濃度應具臨床決定性水平，根據分析物情況應做幾個臨床決定性水平濃度處的實驗。一般最有效的方法是在較高濃度下對系列可能的干擾物作初步篩選。如果沒有發(fā)現具臨床顯著意義，則該物質不是干擾物，沒有必要進一步做實驗。反之，具臨床顯著意義的，應進一步作評價以確定干擾物濃度與干擾程度間的關系，這類實驗稱為“劑量響應”系列。第一種人為加入方法的局限性有：在臨床標本中的真實干擾物可能不是原來的藥物，而是代謝產物；實驗標本基體并代表典型的有問題的臨床標本；加入的物質與臨床標本中的干擾物不相同，例如，蛋白結合、沉淀，或不均一性（異質性）；可能實驗水平選擇得太高或太低以至不真實。：從被選擇的病原體標本組中尋找不準確的結果。選擇原則：(a) 疾?。ɡ?，來自心臟病、肝病或腎病病人的標本）；（b）藥物（例如，使用過某種想了解的藥物的病人標本）；（c）其他不正常組分（例如，具不正常膽紅素、脂質、血紅蛋白或蛋白的標本）；該方法需要參考方法，即具低干擾性良好特異性的方法，以確定在比較研究中的“真值”。第二種方法的局限性主要是對實驗變異缺乏控制對照；本方法并不能確定原因與作用的關系，它只能說明偏倚與估計的干擾物的某水平的相對關系；如果標本不新鮮，將會失去某些易變組分（例如，乙酰乙酸）；病人通常用多種藥物，因此，難于證實何種藥物的干擾作用；按疾病和用藥對病人分類，不是不可能，至少對許多實驗而言非常困難；實驗是一種機遇，成功取決于在檢測的病人人群的標本中是否有些干擾存在；很少有公認的參考方法，有的參考方法難以在常規(guī)實驗室中作用，另外，參考方法可能也同樣的被干擾。，建議一起使用以相互補充。第二種方法是唯一可檢出藥物代謝物干擾作用的方法。它也是可肯定在真實標本中有干擾的一種方法當檢驗科用一個新的檢測系統(tǒng)或新的測定方法測定病人標本，如果檢驗科有理由可以相信某一特定參考區(qū)間對參考人群不再適用，則需對生物參考區(qū)間進行評審。參考區(qū)間評價實驗操作要點和要求參照《生物參考區(qū)間評審程序》。6支持性文件LABPF029《實驗室間及實驗室內部比對程序》LABPF023《生物參考區(qū)間評審程序》美國臨床實驗室修正法規(guī)（CLIA88）斯德可爾摩協(xié)議7質量記錄《精密度核實實驗記錄表》《可報告范圍確認實驗記錄表》廣東省中醫(yī)院檢驗科精密度核實實驗結果記錄與評價報告表表格編號：廣東省中醫(yī)院檢驗科精密度核實實驗結果記錄與評價報告表表格編號廣東省中醫(yī)院檢驗科程序文件第九節(jié) 生物參考區(qū)間評審程序文件編號：LABPF023版本:B/0生效日期:200505101目的規(guī)范各檢測項目生物參考區(qū)間的建立2適用范圍實驗室開展的檢測項目3職責。4定義和術語依據臨床對某檢驗項目的使用要求確定選擇原則，以此選擇的檢測參考值的個體。所有參考個體的集合為參考總體。從統(tǒng)計意義上，一定數量的參考個體是對參考總體的一個抽樣。在現今的參考值建立中，都是對參考抽樣組作具體研究，在一定的可信限條件下，成為某項目的參考值和參考區(qū)間。對一個參考個體進行某項目檢測得到的值為該個體的參考者，所有參考抽樣組的各個參考值合起來即為參考值范圍。依據所有參考值的分布特性能及臨床使用要求，選擇合適的統(tǒng)計方法進行歸納分析合，確定參考值范圍中的一部分為參考區(qū)間，區(qū)間的兩端為參考區(qū)間的限值，分為低參考限和高參考限。5檢驗科在下列情況下應重新評審生物參考區(qū)間；；。6工作程序。；還可直接引用試劑供應商提供的對應的生物參考區(qū)間；也可自行建立生物參考區(qū)間。，總結對該項目檢測結果產生的生物變異和分析干擾的因素，供選擇參考個體時用。（或排除非參考個體的原則），編寫與之對應的調查表。，挑選候選的參考個體。，剔去不符要求的候選對象。，詳細告訴各個受檢參考個體，做好準備。，做好分析前的標本預處理。，用事先指定的分析方法對標本檢測，獲得參考值結果。若有，按事先約定原則剔去不符合要求的數據后，再補上必需的數據。，了解數據分布的特性。選擇合適統(tǒng)計方法，估計參考限和參考區(qū)間，包括將數據分成幾組、分別求參考區(qū)間等。，不要集中于青年人，對兒童和老年人也應分別予以考慮。，應考慮是否有分組的必要。最常見的是分年齡組和性別組；另外，還可列出可能分組的因素。：①做好受檢參考個體采樣前的準備工作，定出采樣前對受檢者的具體要求。并應對受檢參考個體事前做認真解釋，要求予以配合。②標本采集、處理、運送和保存的要求是：應有手冊規(guī)定標本采集、處理、運送和保存的要求，內容應明確、可操作。除此之外，還應考慮標本采集時的環(huán)境條件，標本采集者（特別是靜脈采血）技術熟練要求和服務態(tài)度等。③分析樣品的檢驗方法應有方法學可靠性評價，測定過程有完整質量控制措施。如果使用不同的儀器或方法，測定同一個分析物，應對儀器方法學問結果是否具可比較性做出評價；否則不同儀器或方法應各自有其參考區(qū)間。，建議至少取120個參考值數據，若還需分組統(tǒng)計，則每個分組應有120個數據。，建議將疑似離群點和其相鄰點的差值D和數據全距R相除，D/R若小于等于1/3考慮為離群點。若有2個或以上疑似離群點，可將最小的疑似離群點作如上處理若都大于1/3，則所有疑似點都剔去；若都小于1/3，則保留所有數據。，應即將其他數據補上。，了解數據的分布特性。若數據呈高斯正態(tài)分布，或者數據經轉換后亦呈高斯分布，可按x %數據分布范圍，或者 %分布范圍等確定參考限和參考區(qū)間。若數據不呈高斯正態(tài)分布，則可用非參數法處理。%%位數的參考限，以此確定95%參考區(qū)間。參考值數據是否需要分組，主要根據臨床意義，并且需作Z檢驗，確定分組后的均值間差異有無統(tǒng)計學意義。將原120個參考值數據按分組要求分成2組（如男和女，或兩個年齡組），最好是2組的數據個數較接近。計算Z值：Z=（ ）/（ ），式中 和 為2組的各自均值，S1和S2為組的各自標準差，n1和n2為2組的各自個數。Z判斷限值：Z*=3(N/120) =3（n1/n2/240） 。另外，有無較大的S，如S2o 較大S，即S2/（S2S1）是否大于3，若計算Z超過Z*，則都可考慮分組。絕大部分實驗室均參照試劑說明書、教材、或其它權威資料作為自己的參考區(qū)間。實驗室對選用的參考區(qū)間進行確認方法為：選取20位健康者，他們的結果均在參考區(qū)間內；選取20位患者，他們的疾病肯定使某項目的檢測結果在參考區(qū)間外，對他們的標本檢測結果若真的在參考區(qū)間外，則說明實驗室使用的參考區(qū)間有效。7支持性文件LABPF021《檢驗方法選擇和評審程序》美國臨床實驗室修正法規(guī)（CLIA88）8質量記錄LABPF02301《廣東省中醫(yī)院檢驗科生物參考區(qū)間評審記錄表》廣東省中醫(yī)院檢驗科程序文件第十一節(jié) 檢驗結果量值溯源管理程序文件編號：LABPF025版本:B/0生效日期:200505101目的建立和實施檢驗結果的量值溯源程序，使病人標