【文章內(nèi)容簡介】 應(yīng)檢測限限樣品具有的平均濃度，確定為檢測系統(tǒng)或方法可定量報(bào)告分析物的最低濃度或其他量值的限值。：廣義上是一個(gè)物質(zhì)對分析物的的濃度或催化活力測定中任何一步驟的影響作用。：依據(jù)所有參考值的分布特征以及臨床使用要求，選擇合適的統(tǒng)計(jì)方法進(jìn)行歸納分析后，確定參考值范圍的一部分為參考區(qū)間。5 工作程序。當(dāng)客戶所指定的檢測方法不適合或已過期時(shí)應(yīng)通知客戶并說明理由。，實(shí)驗(yàn)室應(yīng)優(yōu)先選擇標(biāo)準(zhǔn)檢測方法。若無標(biāo)準(zhǔn)檢測方法，實(shí)驗(yàn)室應(yīng)首先使用在已出版的公認(rèn)/權(quán)威教科書中、經(jīng)同行評議的書刊或雜志中，或國際、國家或地區(qū)的法規(guī)中所明確的程序（方法）。如果應(yīng)用的是內(nèi)部的規(guī)程，則應(yīng)確認(rèn)其符合相應(yīng)的用途并形成文件。，并現(xiàn)行受控。 實(shí)驗(yàn)室采用非標(biāo)準(zhǔn)方法時(shí)，應(yīng)對所采用的方法采取以下的措施之一或其組合進(jìn)行證實(shí)和確認(rèn)：a）使用參考標(biāo)準(zhǔn)或標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)進(jìn)行校準(zhǔn)；b) 與其他方法所得的結(jié)果進(jìn)行比較；c) 實(shí)驗(yàn)室之間的對比；d）對影響結(jié)果的因素作系統(tǒng)評審；e）根據(jù)對方法的理論和實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)作科學(xué)理解，對所得結(jié)果不確定度進(jìn)行評定。，它的基體組成應(yīng)盡可能相似于實(shí)際檢測的病人標(biāo)本；樣品中的分析物含量應(yīng)在該該的醫(yī)學(xué)決定水平處，或者在有臨床意義的水平。有可能的話，做2個(gè)水平的精密度實(shí)驗(yàn)，可以使用的樣品包括控制品（必須和實(shí)驗(yàn)中進(jìn)行每天質(zhì)量質(zhì)量控制用控制品是兩個(gè)不同的樣品）。校準(zhǔn)品、已經(jīng)檢測過的患者標(biāo)本，或具有血清基質(zhì)的定值材料。，則選取的樣品分析物含量應(yīng)盡量與公司對檢測系統(tǒng)性能評估時(shí)采用的含量一致，便于比較。，要嚴(yán)格控制每次復(fù)溶凍干品時(shí)使用的復(fù)溶液的質(zhì)量、開瓶要小心謹(jǐn)慎、加液準(zhǔn)確、控制使凍干浸潤并復(fù)溶的時(shí)間，注意混勻的操作手法等。實(shí)驗(yàn)時(shí)按照廠商操作規(guī)程要求做好校準(zhǔn)，常規(guī)進(jìn)行室內(nèi)質(zhì)量控制。每次實(shí)驗(yàn)時(shí)，只使用在控的數(shù)據(jù)為核實(shí)實(shí)驗(yàn)原始資料。出現(xiàn)失控時(shí)，必須重做核實(shí)實(shí)驗(yàn)。，每天做2個(gè)濃度水平。批內(nèi)是將評價(jià)樣品隨機(jī)插入病人標(biāo)本中被檢測，一批內(nèi)連做20次；天間是每天做一次評價(jià)樣品，累積20次結(jié)果。，計(jì)算均值、標(biāo)準(zhǔn)差和變異系數(shù)。從CLIA88允許誤差表中查閱評價(jià)的該項(xiàng)目允許誤差范圍。1/4CLIA88允許誤差范圍為批內(nèi)不精密度判斷限，1/3CLIA88允許誤差范圍為天間不精密度判斷限。也可根據(jù)生物學(xué)變異確定的不精密度作為天間不精密度判斷限（I＜）。小于或等于判斷限的，檢測系統(tǒng)的不精密度屬可接受；大于判斷限，表示不精密度不符合要求。，千萬不可用一個(gè)項(xiàng)目組成的檢測系統(tǒng)被評價(jià)資料，認(rèn)可分析系統(tǒng)所有項(xiàng)目檢測系統(tǒng)的性能。實(shí)驗(yàn)室準(zhǔn)備用一個(gè)新的檢測系統(tǒng)或測定方法（或新的試劑盒、新儀器）進(jìn)行病人標(biāo)本測定前，應(yīng)與原有的檢測系統(tǒng)或公認(rèn)的參考方法一起檢測一批病人標(biāo)本，從測定結(jié)果的差異了解新檢測系統(tǒng)或方法引入后的偏倚。如果偏倚在允許的誤差范圍內(nèi)，說明新檢測系統(tǒng)或方法替代原有檢測系統(tǒng)或方法不會對臨床引起明顯偏倚。準(zhǔn)確度核實(shí)實(shí)驗(yàn)操作要點(diǎn)和要求參照《實(shí)驗(yàn)室間及實(shí)驗(yàn)室內(nèi)部比對程序》。，也要與真實(shí)標(biāo)本具有相同的基體狀態(tài)。，濃度范圍遍及整個(gè)預(yù)期可報(bào)告范圍。最高濃度的樣品應(yīng)達(dá)到可報(bào)告范圍的上限。各實(shí)驗(yàn)樣品內(nèi)分析物濃度呈等比例關(guān)系，不要呈倍比關(guān)系。（如血清），將外觀澄清的混合樣品離心，一分為二。在一份混合樣品中加入高濃度分析物貯存液。加入體積不得超過混合樣品體積的1/10，但又可使樣品中分析物濃度達(dá)到高限，充分混勻后為高值（H）樣品。在另一份混合樣品加入配制分析物貯存液的溶劑，加入量等于前一份樣品中加入的貯存液體積，充分混后為低值（L）樣品。將H和L樣品按5L、4L+1H、3L+2H、2L+3H、1L+4H、5H關(guān)系各自配制混合，形成系列評價(jià)樣品。，可收集高值樣品，用生理鹽水作系列不同程序稀釋，形成系列評價(jià)樣品。，第一次實(shí)驗(yàn)由低到高重復(fù)測定3次，第二次實(shí)驗(yàn)由高到低重復(fù)測定3次，即每個(gè)實(shí)驗(yàn)樣品做6次重復(fù)測定。綜合所有結(jié)果作統(tǒng)計(jì)學(xué)處理。，對可報(bào)告范圍實(shí)驗(yàn)的低、高限值樣品做多次測定，以均值表示該2個(gè)樣品測定結(jié)果。依照其他可報(bào)告范圍實(shí)驗(yàn)樣品配制稀釋關(guān)系，可以計(jì)算出各實(shí)驗(yàn)樣品內(nèi)含分析物的濃度，為這些樣品的預(yù)期值。將這些樣品再經(jīng)檢測系統(tǒng)或測定方法檢測，得到各檢測值。按實(shí)驗(yàn)要求，每個(gè)樣品做6次重復(fù)測定，得6個(gè)實(shí)測值，它們和預(yù)期值形成6對預(yù)期值、實(shí)測值。，以X表示各樣品的預(yù)期值，以Y表示各樣品的實(shí)測值，將所在實(shí)驗(yàn)結(jié)果點(diǎn)在圖上。，用直線回歸對數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，得直線回歸Y=bX+a，a接近于0，則可直接判斷測定方法可報(bào)告范圍在實(shí)驗(yàn)已涉及濃度。，a較大，試著舍去某組數(shù)據(jù)，另作回歸統(tǒng)計(jì)，若縮小分析范圍后，回歸式有明顯改善，若b接近于1，a趨于0。此時(shí)，縮小的分析范圍是真實(shí)的可報(bào)告范圍。：理想的空白樣品應(yīng)具有與檢驗(yàn)的病人標(biāo)本相同的基體。常使用檢測系統(tǒng)的系列校準(zhǔn)品中的“零標(biāo)準(zhǔn)”作為空白。對某些項(xiàng)目，可使用術(shù)后已無某疾病的病人樣品（如前列腺腫瘤術(shù)后病人的無PSA血清）為空白樣品。：在證實(shí)某方法的靈敏度性能時(shí)，對空白樣品加入分析物配制成檢測限樣品。加入的分析物量應(yīng)是廠商說明的檢測限濃度。在建立檢測限度時(shí)，根據(jù)需要必要制備多份檢測限樣品（如6份或更多），各檢測限樣品內(nèi)分析物濃度呈倍比關(guān)系或等比例關(guān)系。它們的濃度應(yīng)界于預(yù)期檢測限度高低一些的范圍內(nèi)。：沒有具體規(guī)定，但常推薦做20次，符合臨床檢驗(yàn)對重復(fù)檢測實(shí)驗(yàn)的要求。廠商常推薦10次，目的為減少開支。實(shí)驗(yàn)室也常采納做10次。：如果主要從空白樣品的重復(fù)性了解檢測低限，常常就做批內(nèi)或短期實(shí)驗(yàn)。如果主要從“檢測限”樣品的重復(fù)性了解定量的檢測限，推薦作較長時(shí)間的實(shí)驗(yàn)，代表天間檢測性能。實(shí)際就做10次檢測（10天）。（LLD）：將空白樣品重復(fù)20次（不低于10次）作批內(nèi)測定，計(jì)算空白（響應(yīng)量）均值（L空白）和標(biāo)準(zhǔn)差（S空白）。通常估計(jì)95%%的兩種可能性。95%可能性為LLD= L空白+2. S空白；%%可能性為LLD= L空白+3. S空白。如果該方法在測定范圍內(nèi)測定物質(zhì)與吸不度間呈線性，則可求出LLD濃度。檢測系統(tǒng)或方法小于或等于檢測低限的分析物量只能報(bào)告“無分析物檢出”。（）：對多個(gè)近于檢測限濃度的樣品（肯定不是空白樣品）作無間重復(fù)檢測20次（不低于10次），計(jì)算扣除空白響應(yīng)量后的樣品檢測響應(yīng)量的均值（A）、標(biāo)準(zhǔn)差（S檢測限樣品）和變異系數(shù)（CV）。按正態(tài)分布規(guī)律，95%的BLD可能性為：BLDLLD+；%的BLD可能性為BLD=LLD+3. S檢測限樣品。例如，%可能性的生物檢測限，由低濃度向高濃度逐個(gè)計(jì)算差值（A3. S檢測限樣品），直至第一個(gè)低濃度樣品的差值（A3. S檢測限樣品）＞3. S檢測限樣品，則該該濃度為該方法檢測該物質(zhì)的BLD。（FS）：根據(jù)多個(gè)近于檢測限濃度的樣品作無間重復(fù)檢測扣除空白晌應(yīng)量后的樣品檢測響應(yīng)量的變異系數(shù)（CV），從中選擇具有或最近于20%CV的對應(yīng)濃度，即為FS。：將陽性干擾物加入臨床標(biāo)本的混合液（干擾測定樣品）中，與不加的同一混合液（干擾對照樣品）組比較有無偏倚，稱為“配對差異”試驗(yàn)?；旌弦旱母蓴_物濃度應(yīng)具臨床決定性水平，根據(jù)分析物情況應(yīng)做幾個(gè)臨床決定性水平濃度處的實(shí)驗(yàn)。一般最有效的方法是在較高濃度下對系列可能的干擾物作初步篩選。如果沒有發(fā)現(xiàn)具臨床顯著意義，則該物質(zhì)不是干擾物，沒有必要進(jìn)一步做實(shí)驗(yàn)。反之，具臨床顯著意義的，應(yīng)進(jìn)一步作評價(jià)以確定干擾物濃度與干擾程度間的關(guān)系，這類實(shí)驗(yàn)稱為“劑量響應(yīng)”系列。第一種人為加入方法的局限性有：在臨床標(biāo)本中的真實(shí)干擾物可能不是原來的藥物，而是代謝產(chǎn)物；實(shí)驗(yàn)標(biāo)本基體并代表典型的有問題的臨床標(biāo)本；加入的物質(zhì)與臨床標(biāo)本中的干擾物不相同，例如，蛋白結(jié)合、沉淀，或不均一性（異質(zhì)性）；可能實(shí)驗(yàn)水平選擇得太高或太低以至不真實(shí)。：從被選擇的病原體標(biāo)本組中尋找不準(zhǔn)確的結(jié)果。選擇原則：(a) 疾?。ɡ?，來自心臟病、肝病或腎病病人的標(biāo)本）；（b）藥物（例如，使用過某種想了解的藥物的病人標(biāo)本）；（c）其他不正常組分（例如，具不正常膽紅素、脂質(zhì)、血紅蛋白或蛋白的標(biāo)本）；該方法需要參考方法，即具低干擾性良好特異性的方法，以確定在比較研究中的“真值”。第二種方法的局限性主要是對實(shí)驗(yàn)變異缺乏控制對照；本方法并不能確定原因與作用的關(guān)系，它只能說明偏倚與估計(jì)的干擾物的某水平的相對關(guān)系；如果標(biāo)本不新鮮，將會失去某些易變組分（例如，乙酰乙酸）；病人通常用多種藥物，因此，難于證實(shí)何種藥物的干擾作用；按疾病和用藥對病人分類，不是不可能，至少對許多實(shí)驗(yàn)而言非常困難；實(shí)驗(yàn)是一種機(jī)遇，成功取決于在檢測的病人人群的標(biāo)本中是否有些干擾存在；很少有公認(rèn)的參考方法，有的參考方法難以在常規(guī)實(shí)驗(yàn)室中作用，另外，參考方法可能也同樣的被干擾。，建議一起使用以相互補(bǔ)充。第二種方法是唯一可檢出藥物代謝物干擾作用的方法。它也是可肯定在真實(shí)標(biāo)本中有干擾的一種方法當(dāng)檢驗(yàn)科用一個(gè)新的檢測系統(tǒng)或新的測定方法測定病人標(biāo)本，如果檢驗(yàn)科有理由可以相信某一特定參考區(qū)間對參考人群不再適用，則需對生物參考區(qū)間進(jìn)行評審。參考區(qū)間評價(jià)實(shí)驗(yàn)操作要點(diǎn)和要求參照《生物參考區(qū)間評審程序》。6支持性文件LABPF029《實(shí)驗(yàn)室間及實(shí)驗(yàn)室內(nèi)部比對程序》LABPF023《生物參考區(qū)間評審程序》美國臨床實(shí)驗(yàn)室修正法規(guī)（CLIA88）斯德可爾摩協(xié)議7質(zhì)量記錄《精密度核實(shí)實(shí)驗(yàn)記錄表》《可報(bào)告范圍確認(rèn)實(shí)驗(yàn)記錄表》廣東省中醫(yī)院檢驗(yàn)科精密度核實(shí)實(shí)驗(yàn)結(jié)果記錄與評價(jià)報(bào)告表表格編號：廣東省中醫(yī)院檢驗(yàn)科精密度核實(shí)實(shí)驗(yàn)結(jié)果記錄與評價(jià)報(bào)告表表格編號廣東省中醫(yī)院檢驗(yàn)科程序文件第九節(jié) 生物參考區(qū)間評審程序文件編號：LABPF023版本:B/0生效日期:200505101目的規(guī)范各檢測項(xiàng)目生物參考區(qū)間的建立2適用范圍實(shí)驗(yàn)室開展的檢測項(xiàng)目3職責(zé)。4定義和術(shù)語依據(jù)臨床對某檢驗(yàn)項(xiàng)目的使用要求確定選擇原則，以此選擇的檢測參考值的個(gè)體。所有參考個(gè)體的集合為參考總體。從統(tǒng)計(jì)意義上，一定數(shù)量的參考個(gè)體是對參考總體的一個(gè)抽樣。在現(xiàn)今的參考值建立中，都是對參考抽樣組作具體研究，在一定的可信限條件下，成為某項(xiàng)目的參考值和參考區(qū)間。對一個(gè)參考個(gè)體進(jìn)行某項(xiàng)目檢測得到的值為該個(gè)體的參考者，所有參考抽樣組的各個(gè)參考值合起來即為參考值范圍。依據(jù)所有參考值的分布特性能及臨床使用要求，選擇合適的統(tǒng)計(jì)方法進(jìn)行歸納分析合，確定參考值范圍中的一部分為參考區(qū)間，區(qū)間的兩端為參考區(qū)間的限值，分為低參考限和高參考限。5檢驗(yàn)科在下列情況下應(yīng)重新評審生物參考區(qū)間；；。6工作程序。；還可直接引用試劑供應(yīng)商提供的對應(yīng)的生物參考區(qū)間；也可自行建立生物參考區(qū)間。，總結(jié)對該項(xiàng)目檢測結(jié)果產(chǎn)生的生物變異和分析干擾的因素，供選擇參考個(gè)體時(shí)用。（或排除非參考個(gè)體的原則），編寫與之對應(yīng)的調(diào)查表。，挑選候選的參考個(gè)體。，剔去不符要求的候選對象。，詳細(xì)告訴各個(gè)受檢參考個(gè)體，做好準(zhǔn)備。，做好分析前的標(biāo)本預(yù)處理。，用事先指定的分析方法對標(biāo)本檢測，獲得參考值結(jié)果。若有，按事先約定原則剔去不符合要求的數(shù)據(jù)后，再補(bǔ)上必需的數(shù)據(jù)。，了解數(shù)據(jù)分布的特性。選擇合適統(tǒng)計(jì)方法，估計(jì)參考限和參考區(qū)間，包括將數(shù)據(jù)分成幾組、分別求參考區(qū)間等。，不要集中于青年人，對兒童和老年人也應(yīng)分別予以考慮。，應(yīng)考慮是否有分組的必要。最常見的是分年齡組和性別組；另外，還可列出可能分組的因素。：①做好受檢參考個(gè)體采樣前的準(zhǔn)備工作，定出采樣前對受檢者的具體要求。并應(yīng)對受檢參考個(gè)體事前做認(rèn)真解釋，要求予以配合。②標(biāo)本采集、處理、運(yùn)送和保存的要求是：應(yīng)有手冊規(guī)定標(biāo)本采集、處理、運(yùn)送和保存的要求，內(nèi)容應(yīng)明確、可操作。除此之外，還應(yīng)考慮標(biāo)本采集時(shí)的環(huán)境條件，標(biāo)本采集者（特別是靜脈采血）技術(shù)熟練要求和服務(wù)態(tài)度等。③分析樣品的檢驗(yàn)方法應(yīng)有方法學(xué)可靠性評價(jià)，測定過程有完整質(zhì)量控制措施。如果使用不同的儀器或方法，測定同一個(gè)分析物，應(yīng)對儀器方法學(xué)問結(jié)果是否具可比較性做出評價(jià)；否則不同儀器或方法應(yīng)各自有其參考區(qū)間。，建議至少取120個(gè)參考值數(shù)據(jù)，若還需分組統(tǒng)計(jì)，則每個(gè)分組應(yīng)有120個(gè)數(shù)據(jù)。，建議將疑似離群點(diǎn)和其相鄰點(diǎn)的差值D和數(shù)據(jù)全距R相除，D/R若小于等于1/3考慮為離群點(diǎn)。若有2個(gè)或以上疑似離群點(diǎn)，可將最小的疑似離群點(diǎn)作如上處理若都大于1/3，則所有疑似點(diǎn)都剔去；若都小于1/3，則保留所有數(shù)據(jù)。，應(yīng)即將其他數(shù)據(jù)補(bǔ)上。，了解數(shù)據(jù)的分布特性。若數(shù)據(jù)呈高斯正態(tài)分布，或者數(shù)據(jù)經(jīng)轉(zhuǎn)換后亦呈高斯分布，可按x %數(shù)據(jù)分布范圍，或者 %分布范圍等確定參考限和參考區(qū)間。若數(shù)據(jù)不呈高斯正態(tài)分布，則可用非參數(shù)法處理。%%位數(shù)的參考限，以此確定95%參考區(qū)間。參考值數(shù)據(jù)是否需要分組，主要根據(jù)臨床意義，并且需作Z檢驗(yàn)，確定分組后的均值間差異有無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。將原120個(gè)參考值數(shù)據(jù)按分組要求分成2組（如男和女，或兩個(gè)年齡組），最好是2組的數(shù)據(jù)個(gè)數(shù)較接近。計(jì)算Z值：Z=（ ）/（ ），式中 和 為2組的各自均值，S1和S2為組的各自標(biāo)準(zhǔn)差，n1和n2為2組的各自個(gè)數(shù)。Z判斷限值：Z*=3(N/120) =3（n1/n2/240） 。另外，有無較大的S，如S2o 較大S，即S2/（S2S1）是否大于3，若計(jì)算Z超過Z*，則都可考慮分組。絕大部分實(shí)驗(yàn)室均參照試劑說明書、教材、或其它權(quán)威資料作為自己的參考區(qū)間。實(shí)驗(yàn)室對選用的參考區(qū)間進(jìn)行確認(rèn)方法為：選取20位健康者，他們的結(jié)果均在參考區(qū)間內(nèi)；選取20位患者，他們的疾病肯定使某項(xiàng)目的檢測結(jié)果在參考區(qū)間外，對他們的標(biāo)本檢測結(jié)果若真的在參考區(qū)間外，則說明實(shí)驗(yàn)室使用的參考區(qū)間有效。7支持性文件LABPF021《檢驗(yàn)方法選擇和評審程序》美國臨床實(shí)驗(yàn)室修正法規(guī)（CLIA88）8質(zhì)量記錄LABPF02301《廣東省中醫(yī)院檢驗(yàn)科生物參考區(qū)間評審記錄表》廣東省中醫(yī)院檢驗(yàn)科程序文件第十一節(jié) 檢驗(yàn)結(jié)果量值溯源管理程序文件編號：LABPF025版本:B/0生效日期:200505101目的建立和實(shí)施檢驗(yàn)結(jié)果的量值溯源程序，使病人標(biāo)