固定化酶的制備和應用(編輯修改稿)
2024-12-15 06:31 本頁面
【文章內容簡介】 ( 1) 乳糖酶溶解時為了保持酶的活性，需使用磷酸緩沖液。 ( 2) 緩沖液反復沖洗一方面針對形成凝膠后表面還有一些酶沒有包埋在凝膠內部的微孔中被沖洗掉，另一方面維持酶的活性。 ( 3) Ar c 和 B is 都是神經(jīng)性毒劑，操作過程中注意不要沾到皮膚上和吸入體內，一旦沾到皮膚上要立即用水沖洗。 ( 4) 聚合反應和試劑的質量有很大的關系，如果在教材規(guī)定的時間內還沒有聚合完成，可以適當延長聚合時間。 第 8課時 學習探究區(qū) 本課欄目開關 知識 儲備區(qū) 學習 探究區(qū) 自我 檢測區(qū) 活學活用 1 ．下列關于固定化乳糖酶的制備的說法，不正確的是 ( ) A ．在乳糖酶的溶解中加入磷酸緩沖液是維持 pH 相對穩(wěn)定，保證乳糖酶的活性 B ．聚合過程中應將混有各種物質的磷酸緩沖液迅速倒入乳糖酶的溶解液中，緩慢攪拌混勻 C ．聚合過程中各種物質就放在 40 ℃ 進行聚合反應30 m i n D ．漂洗過程中用磷酸緩沖液洗滌 4 ～ 6 次，將其表面沒有固定的酶沖洗掉， 0 ～ 4 ℃ 保存?zhèn)溆? 第 8課時 學習探究區(qū) 本課欄目開關 知識 儲備區(qū) 學習 探究區(qū) 自我 檢測區(qū) 解析 對于固定化乳糖酶的制備過程中始終都應該是用緩沖液來維持 pH 的相對穩(wěn)定，從而保證酶不會變性失活，而對于聚合反應完成后形成凝膠應該在溫度為 4 ℃ ，而不是 40 ℃ 。 答案 C 第 8課時 學習探究區(qū) 本課欄目開關 知識 儲備區(qū) 學習 探究區(qū) 自我 檢測區(qū) 探究點二 固定化酶的應用 固定化酶在工業(yè)生產和醫(yī)學等方面有著重要的用途，下面我們就利用固定化酶來檢測牛奶中乳糖的分解。 1 ． 實驗原理 乳糖酶可以將牛奶中的乳糖分解為 ____________ _____ ，還原糖可和 ______ 試劑反應生成 ______ 色化合物，根據(jù)化合物顏色的深淺變化，可以了解乳糖酶的作用活性。 2 ． 方法步驟 ( 1) 鮮牛奶的處理：取新鮮牛奶 k g 放入 1 000 m L 干凈燒杯中， _________ ℃ 巴氏滅菌。將滅菌后的牛奶冷卻至__________ ℃ ， ______ 后平均分為兩部分，一部分放入A 燒杯，另一部分放到 B 燒杯內作對照。 過濾 半乳糖和葡萄糖 斐林 磚紅 85～ 90 45～ 50 第 8課時 學習探究區(qū) 本課欄目開關 知識 儲備區(qū) 學習 探究區(qū) 自我 檢測區(qū) ( 2) 加酶分解：向 A 燒杯內加入適量的 __________ _ 制劑，_________ ℃ 條件下保溫 45 m i n ，保溫過程中要用預先滅過菌的玻璃棒每隔一段時間輕輕攪拌。 ( 3) 檢測乳糖的分解：保溫到時后，將牛奶 ______ 。用移液管分別取 A 燒杯和 B 燒杯內的牛奶濾液各 2 m L ，放到兩支試管中，用移液管取 ______ 試劑各 2 m L 分別放入被檢試管中，然后把試管放入裝有 _______ 的燒杯中，搖動試管，觀察試管中溶液顏色的變化。 ( 4) 固定化酶的回收：實驗完成后，用 ________ 反復洗滌固定化酶，再用體積分數(shù)為 % 的 ________ 洗滌，然后于 ________ ℃ 下保存。 0～ 4 固
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