糖化酶的固定化及其在葡萄糖-生產(chǎn)中的應(yīng)用工藝(編輯修改稿)
2025-09-01 15:20 本頁面
【文章內(nèi)容簡介】 A：乙醇處理：15克濕離子交換劑50ml燒杯加入30ml去離子水，攪拌，倒去水。注入2倍體積無水乙醇，乙醇浸泡過夜（12h），然后用去離子水連續(xù)沖洗以除去乙醇。B：堿處理：2倍體積（50ml）的2mol/lNaOH浸泡并充分攪拌，C：酸處理:用2倍體積的2mol/L HCl溶液處理陰離子交換樹脂。D：重復(fù)B（2） 酶的固定化取4份糖化酶液，每份30ml，分別倒入4個貯液槽中，并各加入預(yù)處理的離子交換劑15g，不斷輕輕攪拌，開始進行酶的固定化。分別在10min、20min、30min、60min后過濾去未固定的酶液，測量每份固定化酶及反應(yīng)后殘留酶液活性。保存固定化后的酶于冰箱以備下一實驗。取7支干凈的具塞刻度試管（可用封口膠代替），編號，按表1加入試劑：表1 葡萄糖標準曲線制作試 劑管 號1234567葡萄糖標準液（mL）0蒸餾水（mL）0葡萄糖含量（mg）03,5二硝基水楊酸（mL）搖勻，置沸水浴中煮沸5min。取出后流水冷卻，加蒸餾水定容至20mL。以1號管作為空白調(diào)零點，在540nm波長下比色測定光密度。以葡萄糖含量為橫坐標，光密度為縱坐標，繪制標準曲線。（2） 酶活力的測定：取6支干凈的試管，編號，按表32進行操作。表32 酶活力測定取樣表操作項目淀粉酶活力測定固定化酶活力測定1%淀粉溶液/ml預(yù)保溫將各試管和淀粉酶溶液置于40℃恒溫水溶液中保溫10min淀粉酶原液/ml保溫（空白管的酶預(yù)先煮沸失活）在40℃恒溫水溶液中準確保溫5min，迅速加入以下DNS3,5二硝基水楊酸/ml0將各試管搖勻，顯色后進行比色測定光密度，記錄測定結(jié)果，操作同標準曲線（煮沸，定容）。， 裝柱模擬葡萄糖的生產(chǎn)將上周保存于冰箱的固定化酶全部裝柱，加足夠量的淀粉溶液進行洗脫操作，每隔5min取樣一次，共取16次。同樣處理后在540nm
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