【文章內(nèi)容簡(jiǎn)介】 [J]． 中國(guó)現(xiàn)代醫(yī)生，2007，45(14)：28．[23] 楊婧，傅穎嬡．黃芩苷、黃連素體外殺滅陰道毛滴蟲的實(shí)驗(yàn)研究[J]．中國(guó)中醫(yī)藥信息雜志，2006，13(4)：3738．西南大學(xué)本科畢業(yè)論文（設(shè)計(jì)）開題報(bào)告論文題目雙黃連注射液的穩(wěn)定性研究系別專業(yè)動(dòng)物醫(yī)學(xué)系 動(dòng)物醫(yī)學(xué) 年 級(jí)2006級(jí) 開題日期2009年11月學(xué) 號(hào) 222006602033012姓 名 黃 杰指導(dǎo)教師劉娟 羅藝晨1. 本課題研究意義：雙黃連注射液由黃芩、金銀花、連翹經(jīng)科學(xué)方法提取精制而成,是近年來(lái)臨床常用的一種注射用中藥制劑。它的主要成分為黃芩苷、綠原酸、連翹酚、連翹苷、黃酮苷等[1]。在人醫(yī)臨床上有18年以上的臨床使用歷史，具有良好的抗菌、抗病毒、抗炎解熱的功效，治療上呼吸道感染、扁桃體炎、肺炎及病毒性肺炎等疾病療效顯著，總有效率可達(dá)90%以上，治愈率達(dá)81%[2]，具有巨大的經(jīng)濟(jì)效益和社會(huì)效益。在獸醫(yī)的臨床使用中，獸用雙黃連注射液常用來(lái)治療奶牛乳房炎，仔豬黃、白痢，以及因細(xì)菌感染引起的各種炎癥，對(duì)于病毒性疾病也有很好的療效，在畜牧業(yè)生產(chǎn)中也產(chǎn)生了很大的經(jīng)濟(jì)效益。但對(duì)于目前市場(chǎng)上銷售的獸用雙黃連注射液的穩(wěn)定性欠佳。因此，本課題擬采用兩種不同方法制備雙黃連注射液，對(duì)比兩種注射液的理化性質(zhì)，穩(wěn)定性，為指導(dǎo)生產(chǎn)實(shí)踐提供一些依據(jù)。：。、溫度對(duì)雙黃連注射液中黃芩苷含量的影響。 兩種制法的雙黃連注射液中黃芩苷的保存期。、研究方法和研究進(jìn)度： 技術(shù)路線 雙黃連注射液的制備理化性質(zhì)溫度對(duì)其影響光照對(duì)其影響經(jīng)典恒溫加速試驗(yàn)黃芩苷測(cè)定方法的建立數(shù)據(jù)整理、分析 雙黃連注射液處方 金銀花 250g黃芩 250g連翹 500g苯甲醇 10ml吐溫80 2ml加注射用水至 1000ml 參照文獻(xiàn)《中國(guó)中藥成方制劑》[3]規(guī)定工藝制備獸用雙黃連注射液Ⅰ制法：以上黃芩、金銀花和連翹中藥，黃芩酌予碎斷，加水煎煮二次，每次1小時(shí)，分次濾過(guò),合并濾液，濾液用鹽酸(2mol/L)，在80℃保溫30分鐘，靜置24小時(shí)，濾過(guò)，沉淀加8倍量水，攪拌，用40％，并加等量乙醇，攪拌使溶，濾過(guò)，濾液用鹽酸(2mol/L)，60℃保溫30分鐘，靜置12小時(shí)，濾過(guò),加10倍量水，攪拌，用40％，％活性炭，充分?jǐn)嚢?50℃保溫30分鐘，加入1倍量乙醇攪拌均勻，立即濾過(guò)，濾液用鹽酸(2mol/L),60℃保溫30分鐘，靜置12小時(shí)，濾過(guò)，沉淀用少量乙醇洗滌后，于60℃以下干燥。金銀花、連翹加水浸漬30分鐘，煎煮二次，每次1小時(shí)，分次濾過(guò)，合并濾液,(7080℃測(cè))，放冷至40℃，緩緩加乙醇使含醇量達(dá)75％，充分?jǐn)嚢?，靜置12小時(shí)，濾取上清液，回收乙醇至無(wú)醇味，加入34倍量水，,充分?jǐn)嚢璨⒓訜嶂练?靜置48小時(shí)，濾取上清液，(7080℃測(cè)),放冷至40℃，加入乙醇使含醇量達(dá)85％，靜置12小時(shí)，濾取上清液，回收乙醇至無(wú)醇味，備用。取黃芩提取物,加水適量，加熱并用40％，加入金銀花、連翹提取液，加水至1000ml，％活性炭，加入苯甲醇和吐溫80，冷卻，濾過(guò)，加注射用水至1000ml，灌封，滅菌，即得。[4]制備雙黃連注射液Ⅱ制法：黃芩、金銀花和連翹混合，加水六倍量，浸泡30分鐘，煎煮兩次，每次60分鐘，過(guò)濾合并濾液。再濃縮至600ml加95%乙醇，使含醇量達(dá)60%。靜置冷藏24小時(shí)后濾過(guò)，用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀回收乙醇，然后再加乙醇，使含醇量達(dá)80%，冷藏放置2448小時(shí)后過(guò)濾，濾液調(diào)至pH=8，再過(guò)濾，接下來(lái)回收乙醇，%，加苯甲醇和吐溫80，過(guò)濾，加蒸餾水至1g/ml，再加NaCl，調(diào)至等滲，過(guò)濾加注射用水至1000ml，灌封，滅菌，即得。參照文獻(xiàn) [5] ，，在250350nm波長(zhǎng)處測(cè)其紫外吸收，黃芩苷在278nm波長(zhǎng)處有最大吸收，故選擇278nm為測(cè)定波長(zhǎng)。取黃芩苷對(duì)照品，105mg/ml， 104mg/ml，103mg/ml，103mg/ml，102mg/ml，102mg/ml濃度的溶液，在278nm波長(zhǎng)處測(cè)定它們的吸收度[5]。以濃度為橫坐標(biāo)(X)，吸收度為縱坐標(biāo)(Y)進(jìn)行線性回歸。精密量取本品2ml置100ml容量瓶中，加乙醇稀釋至刻度搖勻，精密量取1ml置25ml容量瓶中， mol/L鹽酸溶液稀釋至刻度,搖勻即得[6]。上述配制好的樣品溶液， mol/L鹽酸為空白液，測(cè)定其吸收度，并根據(jù)線性回歸方程計(jì)算出黃芩苷的含量。 加樣回收率測(cè)定，，，然后按標(biāo)準(zhǔn)曲線項(xiàng)下進(jìn)行黃芩苷含量測(cè)定。 理化性質(zhì)鑒定，加蒸餾水1ml，加5%三氯化鐵試液2滴，顯藍(lán)綠色。，滴于濾紙上加1滴蒸餾水紫外燈下，呈藍(lán)色熒光，氨氣熏時(shí)呈黃綠色熒光[8]。 光加速試驗(yàn)分別取兩種灌封好的雙黃連注射液。①各8支5ml安瓿在25℃避光保存；②各8支5ml安瓿25℃不避光保存；將上述兩種樣品分別作記號(hào)后，分別在0d，3d，7d，10d時(shí)取兩支，混勻后測(cè)定pH值，顏色，澄明度和黃芩苷的含量的變化。 溫度影響試驗(yàn)分別取灌封雙黃連注射液。①各8支5ml安瓿在室溫保存；②各8支5ml安瓿4℃保存；將上述兩種樣品分別作記號(hào)后，分別在0d,7d,15d,30d時(shí)取兩支，混勻后測(cè)pH值，顏色，澄明度和黃芩苷的含量的變化。 經(jīng)典恒溫加速試驗(yàn),分別置于60℃，70℃，80℃，90℃避光恒溫水浴槽中加熱0，1，3，5，7，9h,取出立即冷卻,終止反應(yīng)，記錄雙黃連注射液的pH值，顏色澄明度和黃芩苷含量的變化[4]。，求出不同溫度下的回歸方程,由回歸方程的斜率計(jì)算各溫度下的分解速率常數(shù)(K)，進(jìn)而求得lgK，以lgK對(duì)1/T(T為絕對(duì)溫度)進(jìn)行線性回歸，求出室溫25℃時(shí)的分解速率常數(shù)K，再計(jì)算出藥物中黃芩苷的保存期[5]。參考文獻(xiàn)：[1] 郭彩娥，李衛(wèi)紅，熊南燕等．雙黃連注射液和頭孢曲松鈉聯(lián)用抗菌效果的研究[J]．現(xiàn)代中西醫(yī)結(jié)合雜志， 2009，18(10) ：1103．[2] 張連祥，馬瑞霞．雙黃連注射液治療矽肺合并肺部感染30例療效觀察[J]．職業(yè)醫(yī)學(xué)，1993，20(5)：283284．[3] 中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)中藥成方制劑[S]．第十一冊(cè)，1996，38．[4] 崔福德． 藥劑學(xué)[M]．北京：人民衛(wèi)生出版社，2008，234．[5] 武煊． 獸用雙黃連注射液及其HPLC指紋圖譜的研究[D]．重慶：西南大學(xué)，2006，5556．[6] 張雅杰． 紫外分光光度法測(cè)定雙黃連注射液中間體黃芩苷含量[J]．黑龍江醫(yī)藥科學(xué)，2006，29 (5)：54．[7] 黃啟華．紫外分光光度法測(cè)定雙黃連注射液中黃芩苷的含量[J]．中成藥，2000，12(22)：836837．[8] 韓太云，侯國(guó)平，張佐等．雙黃連注射液的制備和質(zhì)量控制方法的研究[J]．哈爾濱醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)，1984，2：79．：2009年8月2009年9月： 查閱文獻(xiàn)資料，寫出綜述，擬定選題。2009年10月2009年11月：進(jìn)行開題答辯，修訂試驗(yàn)方案。2009年11月2009年12月：準(zhǔn)備實(shí)驗(yàn)材料并進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn)。2010年1月2010年3月： 完成各種因素對(duì)雙黃連注射液中黃芩苷含量影響的測(cè)定。2010年4月2010年6月： 分析處理數(shù)據(jù)，完成畢業(yè)論文的撰寫及答辯。： 指導(dǎo)教師（簽名）： 年 月 日： 系（蓋章） 年 月 日說(shuō)明：開題報(bào)告應(yīng)在教師指導(dǎo)下由學(xué)生獨(dú)立撰寫。在畢業(yè)論文（畢業(yè)設(shè)計(jì)）開始二周內(nèi)完成，交指導(dǎo)教師審閱，并接受學(xué)校和系檢查。正文雙黃連注射液的穩(wěn)定性研究黃杰西南大學(xué)榮昌校區(qū)動(dòng)物醫(yī)學(xué)系，重慶榮昌 402460摘要: 目的：通過(guò)對(duì)兩種不同方法制備的雙黃連注射液穩(wěn)定性的比較，旨在為雙黃連注射液的臨床應(yīng)用提供科學(xué)依據(jù)。方法：以黃芩苷的含量為指標(biāo)，采用紫外分光光度計(jì)在278nm波長(zhǎng)處測(cè)定雙黃連注射液中黃芩苷的含量，通過(guò)光照、溫度以及經(jīng)典恒溫加速試驗(yàn)對(duì)黃芩苷含量的影響，計(jì)算黃芩苷降解10%的時(shí)間。結(jié)果：雙黃連注射液對(duì)光和溫度均不穩(wěn)定，在自然光和避光條件下10d后，%、%、%%。在室溫和4℃冷藏條件下保存30d后，%、%、%%。結(jié)論：在本次試驗(yàn)條件下，工藝Ⅱ制備雙黃連注射液的穩(wěn)定性較工藝Ⅰ制備的好，且適宜避光冷藏貯存。關(guān)鍵詞：雙黃連注射液；黃芩苷；紫外分光光度法；穩(wěn)定性Studies of Shuang Huang Lian Injection on Stability HUANG JieDepartment of Veterinary Medicine, Southwest University, Rongchang Campus, Chongqing, 402460, ChinaAbstract：Objectives: Comparing the stability of Shuang Huang Lian Injection with two methods and aim to supply scientific proof on the clinical application. Methods: It was tested the content of baicalin for index, which in Shuang Huang Lian Injection was measured by UVVis at 278 nm. Light experiments, temperature experiments and classical heat stability experiments were taken to the content of baicalin and calculated the time that content of baicalin was deposed of the initial 10%. Results: The Shuang Huang Lian Injection was unstable to light and temperature, the relative content of baicalin in Shuang Huang Lian Injection with two methods declined %,%,% and % after 10 days in sun’s rays and darkly as well as declined %,%,% and % after 30 days in room temperature and 4℃ . Conclusions: Under the experimental condition, the stability of Shuang Huang Lian Injection with craft II