福建農(nóng)林大學(xué)生物工程研究法課程實(shí)驗(yàn)方案(編輯修改稿)
2025-05-31 13:43 本頁面
【文章內(nèi)容簡介】 (二) 酵母產(chǎn)酒精糊化：將600ml水加到糖化鍋中，按照料水比1：4的比例稱量玉米粉150g，調(diào)節(jié)pH值為56，加入氯化鈣(％)，加入液化酶(1220U/g淀粉)，在劇烈攪拌下，先加熱至72℃，保溫15min，再加熱至90℃，并維持30min，以達(dá)到所需的液化程度(DE值：1518％)，碘反應(yīng)呈棕紅色。液化結(jié)束后，再升溫至120℃，保持58min，滅酶，壓濾去渣，降溫就可以進(jìn)行糖化了。糖化：液化結(jié)束后，同時(shí)迅速降溫至60℃。%/g淀粉的比例加入糖化酶，攪拌均勻，放入水浴鍋中，60℃保溫若干小時(shí)后（10h左右），當(dāng)用無水酒精檢驗(yàn)無糊精存在時(shí)。用碘液測定糖化液是否還含有淀粉，若未完全則繼續(xù)糖化直至完全為止。注意開始時(shí)液面位置并隨時(shí)補(bǔ)足蒸發(fā)掉的水分。糖化結(jié)束后，同時(shí)，將料液加熱至加熱90℃，保溫30分鐘．然后將料液溫度降至6070℃，開始過濾。發(fā)酵前還原糖測定：取一些糖化好的糖化液，測定其還原糖的含量(用DNS法測定)。 取6支試管，按下表1順序加入各種試劑。表1 不同濃度葡萄糖的光密度試管編號(hào)123456蒸餾水3500ug/ml葡萄糖01； 2沸水浴加熱5min； 3立即用流水冷卻； 3定容至25mL；550nm處測定OD值最后以葡萄糖含量（mg/mL）為橫坐標(biāo)，光吸收值為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。 糖化液還原糖測定(1)取5ml糖化液進(jìn)行過濾，約稀釋10100倍。(2)取甲乙兩支10ml的試管，甲試管加入1ml稀釋的糖化液。混勻后沸水浴加熱5min，立即冷卻定容到5ml。(3)混勻分別于550nm處比色，用乙試管調(diào)零，測3次，記錄光密度值。(4)然后在標(biāo)準(zhǔn)曲線上查得相應(yīng)的還原糖含量Gmg。(5)根據(jù)以下公式計(jì)算樣品中還原糖的含量：還原糖含量(mg/ml)=Ga（a稀釋倍數(shù)，G還原糖量(mg)）發(fā)酵：將糖化好的糖化液分裝于三角瓶中，每瓶接種約15ml已培養(yǎng)24h的酵母菌，塞上膠塞（在加入的時(shí)候一定要注意防止雜菌的侵入，嚴(yán)格使用酒精火保護(hù)罐口，并保持罐內(nèi)正壓）。用干布將三角瓶各部分擦干凈，稱量初始發(fā)酵液的重量，將發(fā)酵液放于30℃的培養(yǎng)箱中發(fā)酵，并于以后每天稱量一次，直至重量減至恒重為止。并用DNS法測定發(fā)酵后的還原糖含量。(三) 酒精發(fā)酵液各項(xiàng)指標(biāo)測定酒精度測定：1）蒸餾：裝好
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