菌種分離篩選ppt課件(編輯修改稿)
2025-05-31 12:07 本頁面
【文章內(nèi)容簡介】 ．用標(biāo)準(zhǔn)方法作對照來評價生態(tài)學(xué)分離方法； 8．根據(jù)待檢材料的生態(tài)參數(shù)需要，修改已知的方法； 9．運(yùn)用特定的富集方法，富集那些可能具有篩選意義的微生物類群。 四、自然界中細(xì)菌的分離 (一 )采樣和采集方法 ? 為了從一特定生態(tài)系統(tǒng)中分離出具有代表性的細(xì)菌菌群 ， 特別是分離那些在唯一微環(huán)境區(qū)域中出現(xiàn)的菌群時 ， 必須十分重視樣本的采集 。 ? 樣本采集時所需的工具通常有無菌刮鏟 、 土樣采集器 、 鑷子 、 解剖刀 、 手套 、 無菌小塑料袋和塑料瓶等 。 采樣的注意事項(xiàng) 采樣時應(yīng)盡可能保持相對無菌； 所采集的樣本必須具有某種代表性； 采好的樣必須完整地標(biāo)上樣本的種類及采集日期 、 地點(diǎn)以及采集地點(diǎn)的地理 、 生態(tài)參數(shù)等； 應(yīng)充分考慮采樣的季節(jié)性和時間因素 ， 因?yàn)檎嬲脑鼐旱某霈F(xiàn)可能是短暫的； ? 采好的樣應(yīng)及時處理，暫不能處理的也應(yīng)貯存于 4℃ 下，但貯存時間不宜過長。這是因?yàn)橐坏┎蓸咏Y(jié)束，試樣中的微生物群體就脫離了原來的生態(tài)環(huán)境，其內(nèi)部生態(tài)環(huán)境就會發(fā)生變化，微生物群體之間就會出現(xiàn)消長 (二 )生態(tài)學(xué)參數(shù)及培養(yǎng)基 的組成原則 加入培養(yǎng)基中的天然提取物種類和用量 、 環(huán)境生物物理學(xué)參數(shù)以及用于平板涂布分離樣本的溶劑都會影響實(shí)驗(yàn)中所要分離的細(xì)菌的數(shù)量和種類 。 就分離培養(yǎng)基的組成而言 ， 部分培養(yǎng)基中含有1050%的天然提取物 。 加入培養(yǎng)基中的天然提取物 ， 部分培養(yǎng)基中則應(yīng)含有多種碳 、 氮源 ， 如幾丁質(zhì) 、 纖維素或果膠 。 所有分離培養(yǎng)基中都應(yīng)含有抗真菌劑 (如放線菌酮和制霉素 )，摻加濃度一般為 50μg／ m1， 以抑制真菌的生長。 瓊脂平板在使用前應(yīng)置于 37℃ 培養(yǎng)箱中孵育 l、2天。 培養(yǎng)基的生物物理學(xué)參數(shù)，如 pH及鹽分也應(yīng)調(diào)節(jié)到與試樣的生態(tài)系統(tǒng)參數(shù)值相近。 二、 分離 ? 目的微生物不純，需 分離 純化。采用簡便迅速，有一定準(zhǔn)確性的檢出方法，提高篩選效率。常用平皿反應(yīng)法： ? 紙片培養(yǎng)顯色法：浸有指示劑濾紙。 ? 透明圈 法：混濁底物被分解后形成 透明圈 。如可溶性淀粉、碳酸鈣等。 變色圈法：直接用顯色劑或指示劑。 生長圈法：利用某些具有特殊營養(yǎng)要求的微生物作為工具菌，要 分離 的微生物能在一般培養(yǎng)條件下生長而合成該營養(yǎng)物而使工具菌能生長，形成生長圈。 抑制圈法：瓊脂塊培養(yǎng)法。 用剛果紅染色法鑒定篩選降解纖維素的菌株 羧甲基纖維素鈉作培養(yǎng)物 抗生素篩選 檢定菌培養(yǎng)，加上發(fā)酵液 五、放線菌的分離培養(yǎng)基的組成原則 ? 大多數(shù)放線菌的分離培養(yǎng)是在貧脊或復(fù)雜底物的瓊脂平板上進(jìn)行的 。 除嗜溫性放線菌外 ， 其他放線菌一般在培養(yǎng) 420天內(nèi)在分離平板上緩慢形成菌落 。 ? 在放線菌分離瓊脂中通常都加入抗真菌劑 制霉菌素或放線菌酮 ， 以抑制真菌的繁殖 。 ? 選擇性地添加抗生素 。 ? 分離瓊脂平板制備好后 ， 一般皆應(yīng)在 37℃ 培養(yǎng)箱中存放 3天 。 放線菌的分離 ? 土樣中放線菌的非選擇性分離：土樣 風(fēng)干 ，磨碎，無菌海綿壓印土樣后壓印平板后培養(yǎng)。 ? 植物體上放線菌的分離：無菌取植物組織， 干燥 以減少細(xì)菌數(shù)量，剪碎植物材料后植入平板表層后培養(yǎng)。也可洗下微生物后振蕩培養(yǎng)
教學(xué)課件相關(guān)推薦
鄂ICP備17016276號-1