生物大分子分離純ppt課件(編輯修改稿)
2025-05-28 13:16 本頁面
【文章內(nèi)容簡介】 (3)化學(xué)與生物化學(xué)方法： 1) 自溶法： 將新鮮的生物材料存放于一定的 pH和適當(dāng)?shù)臏囟认?，?xì)胞結(jié)構(gòu)在自身所具有的各種水解酶（如蛋白酶和酯酶等）的作用下發(fā)生溶解，使細(xì)胞內(nèi)含物釋放出來。 2) 溶脹法： 細(xì)胞膜為天然的半透膜，在低滲溶液和低濃度的稀鹽溶液中，由于存在滲透壓差，溶劑分子大量進入細(xì)胞，將細(xì)胞膜脹破釋放出細(xì)胞內(nèi)含物。 3) 酶解法： 利用各種水解酶，如溶菌酶、纖維素酶、蝸牛酶和酯酶等，于 37℃ ， pH8，處理 15分鐘，可以專一性地將細(xì)胞壁分解。 4) 有機溶劑處理法： 利用氯仿、甲苯、丙酮等脂溶性溶劑或SDS（十二烷基硫酸鈉）等表面活性劑處理細(xì)胞，可將細(xì)胞膜溶解，從而使細(xì)胞破裂，此法也可以與研磨法聯(lián)合使用。 “提取”是在分離純化之前將經(jīng)過預(yù)處理或破碎的細(xì)胞置于溶劑中，使被分離的生物大分子充分地釋放到溶劑中，并盡可能保持原來的天然狀態(tài)不丟失生物活性的過程。 影響提取的因素主要有： 目的產(chǎn)物在提取的溶劑中溶解度的大?。? 由固相擴散到液相的難易； 溶劑的 pH值和提取時間等。 通常：極性物質(zhì)易溶于極性溶劑，非極性物質(zhì)易溶于非極性溶劑； 堿性物質(zhì)易溶于酸性溶劑，酸性物質(zhì)易溶于堿性溶劑； 溫度升高，溶解度加大； 遠(yuǎn)離等電點的 pH值，溶解度增加。 提取時所選擇的條件應(yīng)有利于目的產(chǎn)物溶解度的增加和保持其生物活性。 生物大分子的提取 ⑴ 水溶液提取： 蛋白質(zhì)和酶的提取一般以水溶液為主。稀鹽溶液和緩沖液對蛋白質(zhì)的穩(wěn)定性好，溶解度大，是提取蛋白質(zhì)和酶最常用的溶劑。 ⑵ 有機溶劑提取： 一些和脂類結(jié)合比較牢固或分子中非極性側(cè)鏈較多的蛋白質(zhì)和酶難溶于水、稀鹽、稀酸、或稀堿中，常用不同比例的有機溶劑提取。 分離純化 ? 剛提取得到的大分子物質(zhì)，往往是粗制品，含有許多雜質(zhì)，必須進一步分離純化。分離提純各種生物大分子，主要根據(jù)各種物質(zhì)的分子大小、溶解度、帶電性、親
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