生物大分子分離純ppt課件-在線瀏覽
2025-06-18 13:16本頁面
【正文】 門的細(xì)胞破碎方法。 2) 組織搗碎器 ：這是一種較劇烈的破碎細(xì)胞的方法，通?？上扔眉矣檬称芳庸C(jī)將組織打碎，然后再用10000r/min～ 20220r/min的內(nèi)刀式組織搗碎機(jī) (即高速分散器 )將組織的細(xì)胞打碎。 2) 超聲波處理法： 此法是借助超聲波的振動(dòng)力破碎細(xì)胞壁和細(xì)胞器。 3) 壓榨法：這是一種溫和的、徹底破碎細(xì)胞的方法。 4) 冷熱交替法 ： 從細(xì)菌或病毒中提取蛋白質(zhì)和核酸時(shí)可用此法。 (3)化學(xué)與生物化學(xué)方法： 1) 自溶法： 將新鮮的生物材料存放于一定的 pH和適當(dāng)?shù)臏囟认拢?xì)胞結(jié)構(gòu)在自身所具有的各種水解酶（如蛋白酶和酯酶等）的作用下發(fā)生溶解，使細(xì)胞內(nèi)含物釋放出來。 3) 酶解法： 利用各種水解酶，如溶菌酶、纖維素酶、蝸牛酶和酯酶等，于 37℃ ， pH8，處理 15分鐘，可以專一性地將細(xì)胞壁分解。 “提取”是在分離純化之前將經(jīng)過預(yù)處理或破碎的細(xì)胞置于溶劑中，使被分離的生物大分子充分地釋放到溶劑中，并盡可能保持原來的天然狀態(tài)不丟失生物活性的過程。 通常：極性物質(zhì)易溶于極性溶劑，非極性物質(zhì)易溶于非極性溶劑； 堿性物質(zhì)易溶于酸性溶劑，酸性物質(zhì)易溶于堿性溶劑； 溫度升高，溶解度加大； 遠(yuǎn)離等電點(diǎn)的 pH值，溶解度增加。 生物大分子的提取 ⑴ 水溶液提?。?蛋白質(zhì)和酶的提取一般以水溶液為主。 ⑵ 有機(jī)溶劑提?。?一些和脂類結(jié)合比較牢固或分子中非極性側(cè)鏈較多的蛋白質(zhì)和酶難溶于水、稀鹽、稀酸、或稀堿中，常用不同比例的有機(jī)溶劑提取。分離提純各種生物大分子，主要根據(jù)各種物質(zhì)的分子大小、溶解度、帶電性、親和力大小等差異，選用有機(jī)溶劑沉淀，等電點(diǎn)沉淀，鹽析，層析，電泳，超離心，吸附，結(jié)晶等方法 分離純化 剛提取得到的大分子物質(zhì)，往往是粗制品，含有許多雜質(zhì)，必須進(jìn)一步分離純化。 離子交換層析法 電泳法 電荷性質(zhì)的差異 分子大小形狀差異 凝膠過濾法 超濾法 透析法
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