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正文內(nèi)容

其它標(biāo)記免疫分析技術(shù)(編輯修改稿)

2025-02-14 18:53 本頁面
 

【文章內(nèi)容簡介】 強(qiáng)度。 人民衛(wèi)生出版社 第九章 其它標(biāo)記免疫分析技術(shù) 三、 斑點(diǎn)金免疫層析試驗(yàn) (一)原理 (二)試驗(yàn)方法 人民衛(wèi)生出版社 第九章 其它標(biāo)記免疫分析技術(shù) (一)原理 斑點(diǎn)免疫層析試驗(yàn) ( dotimmunochromatographic assay, DICA) 簡稱免疫層析試驗(yàn)( ICA),也以硝酸纖維素膜為載體,但利用了微孔膜的毛細(xì)血管作用,滴加在膜一端的液體慢慢向另一端滲移,如同層析。 人民衛(wèi)生出版社 第九章 其它標(biāo)記免疫分析技術(shù) (二)試驗(yàn)方法 免疫層析試驗(yàn)以 單克隆雙抗體夾心法 為例 。 人民衛(wèi)生出版社 第九章 其它標(biāo)記免疫分析技術(shù) 四、 臨床應(yīng)用及評價 免疫膠體金技術(shù)的發(fā)展前景自免疫膠體金層析技術(shù)作為診斷試劑廣泛應(yīng)用到臨床后,由于它的快速簡便、準(zhǔn)確,具有高度特異性和高敏感性,結(jié)果直觀可靠,而且試劑和樣品用量極少,每個樣品只需 1~ 2μl, 無需儀器設(shè)備,簡化了煩瑣的常規(guī)操作過程,同時也減小了因操作引起的誤差,是一種目前發(fā)展最快的復(fù)合型免疫層析技術(shù)。 在臨床醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)廣泛應(yīng)用, 新項(xiàng)目正在不斷發(fā)展中。 人民衛(wèi)生出版社 第九章 其它標(biāo)記免疫分析技術(shù) 小 結(jié) 膠體 金免疫技術(shù)是以膠體金作為標(biāo)記物的免疫標(biāo)記技術(shù),本章主要介紹了斑點(diǎn)金滲濾試驗(yàn)和斑點(diǎn)金免疫層析試驗(yàn)。斑點(diǎn)金免疫滲濾試驗(yàn)是在將硝酸纖維素膜包被了抗原或抗體,將其置于滲濾裝置中,進(jìn)行免疫結(jié)合試驗(yàn),斑點(diǎn)金免疫層析試驗(yàn)是以硝酸纖維素膜為載體將膠體金標(biāo)記技術(shù)和蛋白質(zhì)層析技術(shù)相結(jié)合免疫分析技術(shù)。 金免疫技術(shù)簡便、快捷,應(yīng)用廣泛,適合“床邊檢驗(yàn)”。 返回章目錄 人民衛(wèi)生出版社 第九章 其它標(biāo)記免疫分析技術(shù) 放射免疫技術(shù) 酶免疫技術(shù) 發(fā)光免疫技術(shù) 三大經(jīng)典標(biāo)記技術(shù) 第三節(jié) 發(fā)光免疫分析技術(shù) 人民衛(wèi)生出版社 第九章 其它標(biāo)記免疫分析技術(shù) ? 發(fā)光 :是指分子或原子中的電子吸收能量后,由基態(tài)(較低能級)躍遷到激發(fā)態(tài)(較高能級),然后再返回到基態(tài),并釋放光子的過程。 ? 根據(jù)形成激發(fā)態(tài)分子的能量來源不同可分為 : 光照發(fā)光、生物發(fā)光、化學(xué)發(fā)光 等。 一、概述 人民衛(wèi)生出版社 第九章 其它標(biāo)記免疫分析技術(shù) ? 光照發(fā)光 ( photoluminescence): 發(fā)光劑經(jīng)短波長入射光照射后進(jìn)入激發(fā)態(tài),當(dāng)回復(fù)至基態(tài)時發(fā)出較長波長的可見光。 光照發(fā)光 人民衛(wèi)生出版社 第九章 其它標(biāo)記免疫分析技術(shù) ? 生物發(fā)光 ( bioluminescence) : 是反應(yīng)底物在熒光素酶的催化下利用 ATP產(chǎn)能,生成激發(fā)態(tài)的氧化熒光素,后者在恢復(fù)到基態(tài)時多余的能量以光子形式放出。典型例子為螢火蟲發(fā)光 。 生物發(fā)光 人民衛(wèi)生出版社 第九章 其它標(biāo)記免疫分析技術(shù) ? 化學(xué)發(fā)光 ( chemiluminescence): 在常溫下由化學(xué)反應(yīng)產(chǎn)生的光的發(fā)射。 化學(xué)發(fā)光是一個多步驟的過程,其機(jī)制為某些化合物(發(fā)光劑或發(fā)光底物)可以利用一個化學(xué)反應(yīng)產(chǎn)生的能量使其產(chǎn)物分子或反應(yīng)中間態(tài)分子上升至電子激態(tài)。當(dāng)此產(chǎn)物分子或中間態(tài)分子衰退至基態(tài)時,以發(fā)射光子的形式釋放能量(即發(fā)光)。 化學(xué)發(fā)光 人民衛(wèi)生出版社 第九章 其它標(biāo)記免疫分析技術(shù) 一些化學(xué)反應(yīng)能釋放足夠的能量把參加反應(yīng)的物質(zhì)激發(fā)到能發(fā)射光的電子激發(fā)態(tài)。 反應(yīng)過程可簡單地描述如下: A十 B C* C* C+ hγ 其中 γ 為光子, C*表示 C處于單線激發(fā)態(tài) (一)直接化學(xué)發(fā)光 人民衛(wèi)生出版社 第九章 其它標(biāo)記免疫分析技術(shù) 若激發(fā)能傳遞到另一個未參加化學(xué)反應(yīng)的分子 D上,使 D分子激發(fā)到電子激發(fā)態(tài), D分子從激發(fā)態(tài)回到基態(tài)時發(fā)光。 反應(yīng)過程可表示如下: A十 B C* C*十 D C十 D* D* D十 hγ (二)間接化學(xué)發(fā)光 人民衛(wèi)生出版社 第九章 其它標(biāo)記免疫分析技術(shù) ? 該反應(yīng)必須提供足夠的激發(fā)能 , 并由某一步驟單獨(dú)提供 , 因?yàn)榍耙徊椒磻?yīng)釋放的能量將因振動弛豫消失在溶液中而不能發(fā)光 。 ? 要有有利的反應(yīng)過程 , 使化學(xué)反應(yīng)的能量至少能被一種物質(zhì)所接受并生成激發(fā)態(tài) 。 ? 激發(fā)態(tài)分子必須具有一定的化學(xué)發(fā)光量子效率釋放出
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