第十章化學(xué)發(fā)光免疫分析技術(shù)(編輯修改稿)
2024-11-22 11:54 本頁面
【文章內(nèi)容簡介】 電化學(xué)發(fā)光劑，它和電子供體三丙胺（ TPA）在陽電極表面可同時失去一個電子而發(fā)生氧化反應(yīng)。 三聯(lián)吡啶釕 電化學(xué)發(fā)光劑反應(yīng)原理 ㈡ 酶促反應(yīng)發(fā)光劑： 是利用標(biāo)記酶的催化作用，使發(fā)光劑（底 物）發(fā)光，這一類需酶催化后發(fā)光的發(fā)光劑 稱為酶促反應(yīng)發(fā)光劑。 1．魯米諾及其衍生物 2． AMPPD 1．魯米諾 魯米諾發(fā)光原理 魯米諾增強發(fā)光反應(yīng)原理 2． AMPPD 〔 3(2‘螺旋金剛烷 )4甲氧基 4(3“磷酰氧基 )苯 1,2二氧雜環(huán)丁烷 〕〕 1. 碳二亞胺（ EDC）縮合法 二、發(fā)光劑的標(biāo)記技術(shù) 2. 過碘酸鈉氧化法 3．重氮鹽偶聯(lián)法 4. N羥基琥珀酰亞胺活化法 1．發(fā)光劑的選擇 2．被標(biāo)記蛋白質(zhì)的性質(zhì) 3．標(biāo)記方法的選擇 4．原料比 5．標(biāo)記率 6．溫度 7．純化與保存 影響標(biāo)記的因素 第三節(jié) 化學(xué)發(fā)光免疫分析的類型 用吖啶酯直接標(biāo)記抗體 (抗原 )，與待測標(biāo)本中相應(yīng)的抗原 (抗體 )發(fā)生免疫反應(yīng)后，形成固相包被抗體 待測抗原 吖啶酯標(biāo)記抗體復(fù)合物，這時只需加入氧化劑（ H2O2）和NaOH使成堿性環(huán)境，吖啶酯在不需要催化劑的情況下分解、發(fā)光 。 由集光器和光電倍增管接收、記錄單位時間內(nèi)所產(chǎn)生的光子能，這部分光的積分與待測抗原的量成正比，可從標(biāo)準(zhǔn)曲線上計算出待測抗原的含量。 一、直接化學(xué)發(fā)光免疫分析 發(fā)光 磁微粒 被測抗原 + 抗體 + 帶丫啶酯標(biāo)記物抗體 沖洗后 夾心法 （ 1） 加入 H2O2 （ pH10） （ 2） 加入堿 （ pH10） 直接化學(xué)發(fā)光的機理 磁 微粒 模式圖 Y 特點 – 抗原和抗體結(jié) 合與未 結(jié)合部分 的 易 分離 磁微粒 技術(shù) 化學(xué)發(fā)光酶免疫分析 （ chemilumi
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