微生物的生長與控制(編輯修改稿)
2025-02-14 01:30 本頁面
【文章內(nèi)容簡介】 測體積法； 稱干重法 （二）間接法 比濁法 生理指標(biāo)法 原理是在一定范圍內(nèi)，菌懸液中的細胞濃度與混濁度成正比，即與光密度成正比，菌數(shù)越多，光密度越大。因此，借助于分光光度計，在一定波長下測定菌懸液的光密度，就可反應(yīng)出菌液的濃度。 特點：快速、簡便；但易受干擾。 比濁法 菌液濃度 吸光值 （ OD值） 測含氮量法 蛋白質(zhì)總量 =含氮量 細胞總量 =蛋白質(zhì)總量 /（ 50%~80%（或65%）） =蛋白總量 測含碳量以及測磷、 DNA、 RNA、 ATP、DAP（二氨基庚二酸）、幾丁質(zhì)等。 產(chǎn)酸、產(chǎn)氣、耗氧、粘度和產(chǎn)熱等。 二、計繁殖數(shù) 直接計數(shù)法 間接計數(shù)法 直接計數(shù)法：指用計數(shù)板在光學(xué)顯微鏡下直接觀察細胞并進行計數(shù)的方法。 原理：將 1cm2 400小格，從中選取 80或 100小格，計數(shù)其中的細胞數(shù)目，換算成單位體積中的細胞數(shù)。 適用范圍：個體較大細胞或顆粒，如血球、酵母菌等。不適用于細菌等個體較小的細胞，因為（ 1）細菌細胞太小，不易沉降；（ 2）在油鏡下看不清網(wǎng)格線，超出油鏡工作距離。 特點：快速，準(zhǔn)確，對酵母菌可同時測定出芽率，或在菌懸液中加入少量美藍可以區(qū)分死活細胞。 血球計數(shù)板法 應(yīng)用：可同時計數(shù)不同微生物的菌數(shù)，適 于土壤、牛奶中細菌計數(shù)。 方法：用鏡臺測微尺計算出視野面積；取 1cm2面積上，計數(shù)后代 入公式： 每 ml原菌液含菌數(shù) =視野中平均菌數(shù) 涂布面積 /視野面積 100 稀釋倍數(shù) 間接計數(shù)法 （ 1）平板菌落計數(shù)法 （ 2）膜過濾法 （ 1）平板菌落計數(shù)法 平板菌落計數(shù)法最 常用的活菌計數(shù)法。將適當(dāng)稀釋的菌液傾注平板或涂布在平板表面，經(jīng)保溫培養(yǎng)后，以平板上出現(xiàn)的菌落數(shù)乘以稀釋度就可以計算出原菌液的含菌量。直徑 9 cm 的培養(yǎng)皿平板上出現(xiàn)菌落數(shù)一般以 50~ 500 為宜。按照國家標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定的樣品菌落總數(shù)測定的計數(shù)原則，以平板菌落數(shù)在 30 ~ 300 之間為報告依據(jù)。9 ml 9 ml 9 ml 9 ml1 ml 1 ml 1 ml1 ml 1 m l 1 m l 1 m l 2 2 2平板菌落計數(shù)法： 澆注平板或涂布平板 平板菌落計數(shù)法 ★ 技術(shù)要求：樣品充分混勻，操作熟練快速（ 15~20min完成操作），嚴(yán)格無菌操作； ★注意事項：每一支吸管只能用于一個稀釋度，樣品混勻處理，傾注平板時的培養(yǎng)基溫度； ★適用范圍：中溫、好氧和兼性厭氧、能在營養(yǎng)瓊脂上生長的微生物， ★誤差：多次稀釋造成的誤差是主要來源，其次還有由于樣品內(nèi)菌體分布不均勻、以及不當(dāng)操作 ★ A standard plate count (viable count) reflects the number of viable microbes and assumes that each bacterium grows into a single colony。 plate counts are reported as number of colonyforming units (CFU) per ml (CFU/ml) or per g (CFU/g) of sample. （ 2） 薄膜過濾計數(shù)法 常用該法測定含菌量較少的空氣和水中的微生物數(shù)目。 將定量的樣品通過薄膜（硝化纖維素薄膜、醋酸纖維薄膜）過濾，菌體被阻留在濾膜上，取下濾膜進行培養(yǎng)，然后計算菌落數(shù)，可求出樣品中所含菌數(shù)。 膜過濾法 第二節(jié)、微生物的生長規(guī)律 一、純培養(yǎng)技術(shù) 純培養(yǎng)的定義： 純培養(yǎng) (Pure culture)：微生物學(xué)中將在實驗室條件下從一個細胞或一種細胞群繁殖得到的后代稱為純培養(yǎng) 獲得純培養(yǎng)的技術(shù)
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