【文章內(nèi)容簡介】 物等效 性試驗之前進行無數(shù)次的體外溶出度實驗來預(yù)測體內(nèi)生物等效性的結(jié)果，以此來提 高生物等效實驗的成功率。 大多數(shù)口服制劑在給藥后必須經(jīng)過吸收才能進入體循環(huán)，經(jīng)過不斷地吸收藥物 7 在體內(nèi)達(dá)到一定濃度后才能起到治療作用，而口服固體制劑中的活性成分必須要經(jīng) 過溶解才能被吸收，這一溶解的過程在生物藥劑學(xué)中稱作溶出，溶出度是指溶出的 速度和程度。為了在體外模擬這一溶解過程，將藥物從固體制劑在規(guī)定的溶出介質(zhì) 和裝置下溶解，并檢測其每個時間點的溶出度，我們稱之為體外溶出度實驗。體外 溶出度實驗的結(jié)果與所使用的方法有直接關(guān)系 ， 例如溶出介質(zhì)的 pH 值 ， 添加表面活 性劑的種類，用量和裝置的運行速度等等。 前面提到過，藥物在溶解后才能被吸收進入體循環(huán)。而在口服固體制劑中，藥 物在溶解前必須要經(jīng)過崩解，如片劑在體內(nèi)先崩解成細(xì)小的顆粒，顆粒再經(jīng)過崩解 變味微小的粉末，隨后才能被溶解，因此當(dāng)藥品的崩解緩慢，導(dǎo)致藥物無法從制劑 中釋放出來或釋放緩慢，則會造成藥物在體內(nèi)的血藥濃度發(fā)生改變。而對于緩釋控 釋藥品，其設(shè)計理念是應(yīng)在體內(nèi)緩慢釋放，若其制劑在體內(nèi)釋放的速度過快，則會 導(dǎo)致血藥濃度過高，而出現(xiàn)不良反應(yīng)甚至毒性，同時藥效維持的時間也會縮短，達(dá) 不到應(yīng)有的治療效果。因此，使用體外溶出度實驗的方法，雖然不能完全模擬體內(nèi) 行為，但可以在某種程度上避免上述情況的發(fā)生。 通常情況下，在制劑過程中活性成分的粒徑，晶形和制劑中使用的輔料是控制 藥物釋放的主要因素，溶出度 實驗處上述作用外，還可針對這幾種因素的不同，考 察其在制劑中的影響，如晶形的改變，粒徑的范圍和輔料的種類及用量。 而在藥物制劑的穩(wěn)定性考察過程中，溶出度實驗還可用于發(fā)現(xiàn)藥物制劑在儲存 過程中可能會發(fā)生的溶出度變化。 由此而見，體外溶出度試驗主要有兩個作用：一是作為藥品質(zhì)量控制手段，二 是在一定程度上預(yù)測體內(nèi)生物表現(xiàn)。藥物溶出度的不同可以嚴(yán)重影響藥物的生物利 用度，因此溶出度試驗一直被各國藥典列為質(zhì)量控制的重要內(nèi)容，作為評價口服固 體制劑的質(zhì)量及考察劑型、工藝、輔料的合理性的一個客觀指標(biāo)。 根據(jù)目的不同，美國 FDA 把溶出度試驗分為如下三類： A. 單媒介、單點：一般用于固體制劑的合格放行指標(biāo) B. 單媒介、多點 (35) 溶出曲線：一般用于制劑上市后各種重大變更前后的 8 比較 C. 多媒介、多點溶出曲線：一般用于比較兩配方的一致性， 預(yù)測生物等效 性試驗成功率 日本 1998 年的 “藥品品質(zhì)再評價 ”工程就是采用類似于美國 FDA Case C 的溶出 度評價方法。 日本 “藥品品質(zhì)再評價 ”工程 上世紀(jì)八十年代日本醫(yī)藥行業(yè)與我國現(xiàn)狀極為相似，日本厚生省藥品管理部門 為解決這一狀況，在 1998 年展開了 “藥品品質(zhì)再評價 ”工程，目的是令患者在服用不 同廠家仿制藥時，治療效果與原研藥相同。 “藥品品質(zhì)再評價 ”采用對體外溶出度進行深入的研究用以替代體內(nèi)生物利用度 研究，從而提高仿制藥的門檻，迫使仿制藥廠家對產(chǎn)品質(zhì)量進行提升。為此日本藥 審部門成立了專家組，確定了具體的實施方案和待評價的藥品目錄，并將每一個品 種的溶出度檢測要求與結(jié)果匯編成冊，收載在《藥品品質(zhì)情報集》中。在《情報集》 中對活性成分 、 劑型 、 規(guī) 格 、 參照藥品和溶出度實驗參數(shù)及四條不同 pH 介質(zhì)中的溶 出曲線及質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)進行了規(guī)定。其中參照藥品的公布，是為了防止在再評價過程中 發(fā)生各個廠家使用不同的藥品作為參照藥品，從而導(dǎo)致標(biāo)準(zhǔn)的混亂。 溶出實驗參數(shù)包括了，實驗裝置、轉(zhuǎn)速、介質(zhì)、表面活性劑用量，目的是模擬 人體胃腸道的環(huán)境。由于人體的胃腸道差異較大，因此選取更加嚴(yán)格的溶出條件， 才能區(qū)分出其中的不同。如果設(shè)定得寬松，雖能得到與原研藥相同的溶出曲線，卻 無法對兩者進行有效地區(qū)分。而溶出條件設(shè)定的過于嚴(yán)格，將會導(dǎo)致由于環(huán)境或操 作中細(xì)微的差別使溶出曲線的變化過大，失去了其可比較性，從而導(dǎo)致這部分工作 失去了其應(yīng)有的意義，因此，在研究過程中合理的平衡個中要素成為關(guān)鍵。日本藥 監(jiān)部門在意識到上述體外溶出的重要性后，將其用于藥品品質(zhì)再評價過程，極大的 提高了其國內(nèi)仿制藥質(zhì)量。 由于人體內(nèi)各個部位的 pH 值不同，分別使用 ， ， 和水以模 擬體內(nèi)的情況。 9 日 本在進行藥品品質(zhì)再評價過程中，采取了使用四種基本溶出介質(zhì)涵蓋消化道內(nèi)的體 液的方法，分別是： (1) pH = 溶液 (2) pH = 醋酸鹽緩沖液 (3) pH = 磷酸鹽緩沖液 (4) 水 原研藥品生產(chǎn)廠家根據(jù)設(shè)定的溶出參數(shù)對自身產(chǎn)品進行檢測，得上述四條不同 介質(zhì)中的溶出曲線，定為 “標(biāo)準(zhǔn)溶出度實驗條件 ”，并與專家組進行意見溝通后在， 由專家組在網(wǎng)站上予以公布。仿制廠家則根據(jù) “標(biāo)準(zhǔn)溶出度實驗條件 ”檢測其產(chǎn)品在 以上四種溶出介質(zhì)中的溶出曲線，報送專家組。專家組對仿制藥廠家的結(jié)果進行分 析研究后，將其中一個介質(zhì)確定為 “基本溶出介質(zhì) ”。 原研藥生產(chǎn)廠家再根據(jù)專家組確定的 “基本溶出介質(zhì) ”對三批樣品進行檢測，并 將溶出曲線處于中間的批號定為 “標(biāo)準(zhǔn)批號 ”，再在其他三個溶出介質(zhì)中，測定 “標(biāo)準(zhǔn) 批號 ”的溶出曲線并報送至專家組 。 隨后專家組將 “基本溶出介質(zhì) ”擬定為 “標(biāo)準(zhǔn)介質(zhì) ”， 同時公布 “標(biāo)準(zhǔn)介質(zhì) ”中的 “標(biāo)準(zhǔn)溶出曲線 ”。 同時將原研藥廠家生產(chǎn)的 “標(biāo)準(zhǔn)批號 ”的 樣品提供給仿制廠家，要求其在一定期限內(nèi)完成對產(chǎn)品的改進，使其產(chǎn)品在不同介 質(zhì)的溶出曲線與公布的一致。 藥品品質(zhì)再評價工程的成功，極大地提高了日本的藥品質(zhì)量，使廣大民眾受益。 此巨大的工程，牽涉面之廣，耗時之久是難以想象的。因此采用體外溶出度實驗成 10 我國藥品一致性評價工作方案 藥品一致性評價的可行性和必要性 目前我國已上市的藥品有 萬種，而相應(yīng)的藥品批準(zhǔn)文號 萬個之多。其 中絕大多數(shù)為仿制藥?？陀^上講，我國仿制藥水平良莠不齊、與被仿原創(chuàng)藥的不一 致性，有其存在的歷史根源。改革開放后制藥業(yè)也同其他行業(yè)得到了快速發(fā)展，化 學(xué)藥品也基本上是仿制國外已上市藥品，即仿制藥。當(dāng)時對仿制藥的生產(chǎn)和管理認(rèn) 知還相當(dāng)粗淺，對其上市審評的經(jīng)驗更是不足。 1996 年前仿制藥品的審批權(quán)在省級 衛(wèi)生部，固體口服制劑并不要求做生物等效性試驗，相對容易，因此同一品種就同 時批準(zhǔn)和很多家上市 。 2022 年由地方標(biāo)準(zhǔn)升級為國家標(biāo)準(zhǔn)后 ， 也僅僅是仿標(biāo)準(zhǔn)， 沒 有認(rèn)識到藥劑學(xué)和體內(nèi)生物反應(yīng)的相關(guān)性。盡管 2022 年 SFDA 修訂了《藥品注冊管 理辦法 》 ，要求提供生物等效性證據(jù)，所批準(zhǔn)仿制藥水準(zhǔn)有所提高 ， 但由于生物等 效性試驗是基于任何已批藥品為參照，而沒有指定特定參照藥，因而使某些品種雖 然也進行了生物等效性試驗，但存在乙仿甲，丙仿乙，如此類推越仿越差的現(xiàn)象。 此外，即使仿標(biāo)準(zhǔn)，其管理和控制上也存在其他問題，致使藥品含量不均勻，雜質(zhì) 失控，穩(wěn)定性無保證等嚴(yán)重質(zhì)量問題。因而使我國市場上口服固體制劑的療效差異 極大，使醫(yī)生師和患者失去了信心。 為了進一步落實《十二五規(guī)劃》中提高仿制藥質(zhì)量的任務(wù)，并充分考慮我國醫(yī) 藥工業(yè)發(fā)展現(xiàn)狀及公眾用藥需求， SFDA 對藥品一致性評價已經(jīng)給出了詳盡計劃表。 如何評價仿制藥一致性的方法學(xué)問題，便是政府、業(yè)界和有關(guān)人士們關(guān)注的焦點。 藥品質(zhì)量一致性評價的主要目的是評價物質(zhì)基礎(chǔ)和臨床療效的一致。物質(zhì)基礎(chǔ) 的一致是指制劑產(chǎn)品是否符合既定的質(zhì)量 標(biāo)準(zhǔn)，臨床療效的一致是指制劑產(chǎn)品在體 內(nèi)是否能達(dá)到預(yù)期的治療作用。但由于一致性評價的對象為已上市藥品，此類藥品 數(shù)量巨大，若使用上述方法進行評價，所消耗的人力物力財力及時間極其巨大，是 社會各界都難以承受的。例如我國化學(xué)藥品批準(zhǔn)文號 萬個，其中絕大多數(shù)為仿 制藥，若全部選擇生物等效實驗來評估其質(zhì)量，則需要耗資數(shù)百億人民幣，需要受 試者數(shù)百萬人次，同時需要增加大量的臨床機構(gòu)及其從屬人員和檢測設(shè)備等等，如 11 為優(yōu)先考慮的評價方法，與此同時對于某些體內(nèi)外相關(guān)性較差的藥物，無法用體外 溶出度實驗進行評價 ， 允許企業(yè)根據(jù)自身情況進行臨床研究以證明其體內(nèi)生物等效。 如此，既可以避免上述困難，也可將體外試驗用于今后的監(jiān)管，確保產(chǎn)品質(zhì)量長期 的一致性。 藥品一致性評價的工作流程 根據(jù)計劃，仿制藥一致性評價將按照如下步驟進行： (1) 確定擬評價品種 首先，將待評價藥品按輕重緩急和難異程度分批分期，藥品一致性評價專項辦 公室確定每年需要進行評價的品種和負(fù)責(zé)對各品進行評價方 法研究工作的藥品 檢驗機構(gòu)。 (2) 確定參照藥品及相關(guān)檢測分析方法 專項辦公室組織藥品檢驗機構(gòu)及參照藥品生產(chǎn)企業(yè)，根據(jù)相關(guān)要求，擬定各品 種質(zhì)量一致性評價方法和標(biāo)準(zhǔn)，然后按照相關(guān)藥品生產(chǎn)企業(yè)的意見對其進行完 善，藥品檢驗機構(gòu)再對參照藥品進行質(zhì)量復(fù)核。最后國家局對各品種參照藥品 及評價方法和標(biāo)準(zhǔn)進行審核，符合要求的予以公布。 (3) 藥品生產(chǎn)企業(yè)開展質(zhì)量一致性評價研究 相關(guān)藥企按照國家局公布的評價方法和標(biāo)準(zhǔn)，以參照藥品為對照藥品，對自身 產(chǎn)品進行一致性評估。完成后將相關(guān)研究資料及樣品提交到所在省局。 (4) 仿制藥質(zhì)量一致性評價資料的受理和現(xiàn)場檢查 省局收到藥企的研究資料后進行現(xiàn)場檢查，并抽取連續(xù)生產(chǎn)的 3 批樣品，送至 藥檢機構(gòu)進行復(fù)核，藥檢機構(gòu)將復(fù)核結(jié)果報相關(guān)省局，由省局將研究資料及檢 驗報告提交專項辦公室。 (5) 審查仿制藥質(zhì)量一致性評價資料 專項辦公室收到一致性評價研究資料后，組織專家委員會對資料進行審查。符 合要求的，報國家局批準(zhǔn)，并由國家局對外公布相關(guān)信息。不符合要求的，通 12 知藥品生產(chǎn)企業(yè)。 藥企也可根據(jù)需要，自行開展對尚未部署品種進行研究工作，在完成評價方法 和標(biāo)準(zhǔn)的起草后，報專項辦公室。由專項辦公室組織藥檢所及專家對藥品評價 方法和標(biāo)準(zhǔn)進行復(fù)核確認(rèn)后，對外公布，啟動相關(guān)品種的一致性評價。 評價方法 對于口服固體制劑，主要借鑒日本采取的方法，即將受試制劑與參照藥品在多 種不溶出同介質(zhì)中的溶出曲線進行比較，以此評價兩者是否一致。由于注射劑不存 在藥物吸收的問題，因此主要關(guān)注安全性指標(biāo)。對于其他進行，將結(jié)合劑型特點， 設(shè)定合理的評價方法和標(biāo)準(zhǔn)。 13 14 第三章 藥品研發(fā)中溶出度方法的開發(fā) 化學(xué)藥物的生物學(xué)分類 美國 FDA 根據(jù)生物學(xué)（ BCS）分類系統(tǒng)是根據(jù)藥物的（水）溶解性和滲透性， 將藥物劃分成以下四類： 第一類藥物：高溶解性 高滲透性 第二類藥物：低溶解性 高滲透性 第三類藥物：高溶解性 低滲透性 第四類藥物：低溶解性 低滲透性 高溶解性藥物是指最高劑量規(guī)格的制劑能在 pH 值 ~ 的 250ml 或更少體積 的水溶液中溶解的藥物。 高滲透性藥物是指絕對生物利用度超過 85%的藥物。當(dāng)根據(jù)質(zhì)量平衡測定方法 或者與靜脈對照劑量相比，藥物的人體吸收程度為 85%或更高時，被認(rèn)為具有高滲 透性。 對于生物學(xué)分類為一類的藥物，由于其高溶解度和高滲透性，藥品在服用后迅 速溶解并被吸收，因此被普遍認(rèn)為在體內(nèi)不受溶解速率和吸收速率影響，因此該類 藥物極易通過生物等效性試驗，制劑過程難度較低。 二類藥物，由于其低溶解度和高滲透性，血藥濃度受制于制劑在體內(nèi)的釋放溶 解，被普遍認(rèn)為該類藥物在體內(nèi)不受吸收速率的影響，溶出速度是影響生物等效的 關(guān)鍵。因此，用此類藥物的溶出度曲線，預(yù)測體內(nèi)效果，有一定的 相關(guān)性。而制劑 過程中難點在于如何提高該藥物的溶出速度。 三類藥物，由于其高溶解度和低滲透性，被普遍認(rèn)為該類藥物在體內(nèi)的吸收不 受溶出速度的影響 ， 即制劑在體內(nèi)迅速溶解 ， 但胃腸道對其藥物的吸收速度緩慢， 其 血藥濃度不受制于溶出速率。因此，該類藥物使用溶出度曲線來預(yù)測體內(nèi)效果成功 率不高。制劑過程中的難點在于輔料的選擇，以提高藥物的體內(nèi)吸收速率。 15 四類藥物，由于其低溶解度和低滲透性的特點，一般不建議用于固體口服制劑。 但市場上也有固體口服制劑為生物學(xué)四類的，此類藥物的特點是在體 內(nèi)變異較大， 生物等效性試驗中需要更多的受試者，以提供具有統(tǒng)計意義的數(shù)據(jù)。 緩釋產(chǎn)品溶出度方法的開發(fā) 在美國 FDA 發(fā)布的《質(zhì)量源于設(shè)計理念應(yīng)用于 ANDA 申報：以一個緩控釋制 劑產(chǎn)品為例》中，研究人員首先對一個緩釋產(chǎn)品進行了 12 例健康受試者中比較原型 制劑和參照藥品的隨機、單劑量、雙向交叉的生物等效研究，通過其特征，將原型 制劑用于開發(fā)預(yù)測性溶出方法。 研究人員針對原型制劑和參照藥，進行了溶出度曲線研究，開發(fā)一個預(yù)測性的 溶出方法，系統(tǒng)性地評估溶出介質(zhì) pH（溶出介質(zhì)包括水、 鹽酸溶液、 磷 酸緩沖液和 磷酸緩沖液 ） 、 轉(zhuǎn) 速 （ 25 轉(zhuǎn)和 50 轉(zhuǎn) ） ， 或每分鐘沉浮 數(shù) （ 5 和 10） ， 16 以及溶出介質(zhì)體積（分別用 900mL、 500mL 和