酶切連接與轉化ppt課件(編輯修改稿)
2025-02-01 19:51 本頁面
【文章內(nèi)容簡介】 制性內(nèi)切酶的特點 識別 48 bp 的回文序列 . 常用的酶識別 6 bp 發(fā)生的概率為 46=4096 bp/每次 . (44=256 bp。 48=65536 bp) 1. 高度特異性 2. 商業(yè)化生產(chǎn) 3. 反應需要 Mg2+ 4. 不同的內(nèi)切酶可能產(chǎn)生相同的末端 5’ GAATTC 3’ 3’ CTTAAG 5’ 如 EcoRI 識別序列 : 4. 影響核酸限制性內(nèi)切酶活性的因素 （ 1） DNA 純度 （ 2） DNA甲基化的程度 （ 3）酶切消化反應溫度 （ 4） DNA的分子結構 （ 5）限制性內(nèi)切酶的緩沖液 限制性內(nèi)切酶的星號活性 Ⅱ 類限制酶雖然識別和切割的序列都是有特異性，但是這種特異性受特定條件的限制，即在一定條件下表現(xiàn)出來的特異性。條件的改變，限制酶的特異性就會松動，識別的序列和切割都有一些改變，改變后的活性通常稱的二活性，而將這種因條件的改變會出現(xiàn)第二活性的酶右上角角一個星號表示，因此第二活性又稱星號活性。概括起來，誘導星號的因素有以下幾種： 1,高甘油含量 (5%,v
教學課件相關推薦
鄂ICP備17016276號-1