酶與細(xì)胞的固定化ppt課件(編輯修改稿)
2025-01-31 15:43 本頁(yè)面
【文章內(nèi)容簡(jiǎn)介】 中等 低 （ 3）各種固定化酶方法的優(yōu)缺點(diǎn)比較 表 酶的各種固定化方法的比較 ? 舉例海藻酸鈣包埋法 稱(chēng)取一定量的海藻酸鈉配成水溶液，經(jīng)殺菌冷卻后，與一定體積的酶液混合均勻，然后用注射器或滴管將冷懸液滴入一定濃度的凝固浴中（常用 CaCl2 溶液），形成球狀固定化酶。 ? 明膠作載體，戊二醛作交聯(lián)劑制備固定化果膠酯酶 15％明膠溶液 100mI加入 1mI酶液。攪拌均勻后，加入 5％濃度的戊二醛 10 mI， 充分?jǐn)嚢瑁毯笾?4℃ 冰箱保存 4 h，取出切成約 3 cm2見(jiàn)方的小方塊，用 ％濃度的戊二醛溶液浸泡 16h， 取出用蒸餾水洗滌數(shù)次。 固定化細(xì)胞 （ 1）概念：固定在載體上并在一定的空間范圍內(nèi)進(jìn)行生命活動(dòng)的細(xì)胞稱(chēng)為固定化細(xì)胞 .該細(xì)胞能進(jìn)行正常的生長(zhǎng)、繁殖和新陳代謝，又稱(chēng)固定化活細(xì)胞或固定化增殖細(xì)胞。 （ 2）細(xì)胞固定化方法：吸附法、包埋法。 1）吸附法：主要通過(guò)載體與細(xì)胞間的靜電引力，即細(xì)胞表面與載體之間范德華作用力、離子鍵和氫鍵作用力，使細(xì)胞固定在載體上。 2）包埋法：在細(xì)胞自身并不與凝膠基體發(fā)生化學(xué)鍵合的情況下將其包埋在半透性聚合物顆粒（或膜）內(nèi)的一種固定化方法。包埋法的最大優(yōu)點(diǎn)是能較好的保持細(xì)胞內(nèi)多酶系統(tǒng)的活力，可象游離細(xì)胞那樣進(jìn)行產(chǎn)物的發(fā)酵生產(chǎn)。 常用載體：瓊脂、海藻酸鈣、角叉菜膠、明膠、聚丙烯酰胺。常用凝膠包埋法。 二、固定化酶和固定化細(xì)胞的性質(zhì)與表征 （一）固定化酶的性質(zhì) 酶的活性 多數(shù)情況下固定化酶的活力常低于天然酶。原因：酶結(jié)構(gòu)變化與空間位阻。 酶的穩(wěn)定性 大多數(shù)固定化酶具有較高的穩(wěn)定性、較長(zhǎng)的操作壽命和保存壽命。 表現(xiàn)： 1）增加酶的耐熱性 2）增大了酶對(duì)變性劑、抑制劑的抵抗能力 3）減輕了蛋白酶的破壞作用 4）增強(qiáng)貯存的穩(wěn)定性和操作的穩(wěn)定性 原因： 。 。 ，提高了酶穩(wěn)定性。 酶的最適溫度 一般與游離酶差不多，但有些會(huì)有較明顯的變化。 酶的最適 pH 帶負(fù)電荷載體（ DEAE纖維素等陰離子聚合物）制備的固定化酶，最適 pH較自然酶偏高；帶正電荷載體（ CM 纖維素等陽(yáng)離子聚合物）制備的固定化酶，最適 pH較自然酶偏低。 采用明膠作載體 ,戊二醛作交聯(lián)劑 制備固定化果膠酯酶（ 焦云鵬， 2022） 固定化 果膠酯酶的熱穩(wěn)定性 固定化 果膠酯酶的 pH穩(wěn)定性 固定化 果膠酯酶作用的最適 pH值 采用明膠作載體 ,戊二醛作交聯(lián)劑 制備固定化果膠酯酶（ 焦云鵬， 2022） 固定化 果膠酯酶作用的最適溫度 酶的動(dòng)力學(xué)特征 固定化酶的表觀米氏常數(shù) Km隨載體的帶電性能變化。二者電荷不同，因靜電作用，固定化酶的表觀 Km值低于溶液的 Km值；電荷相同，由于親和力降低，固定化酶的表觀 Km值顯著增加。 酶的作用專(zhuān)一性 （二）固定化酶的評(píng)價(jià)指標(biāo) 酶活力 （ 1）酶活定義（ IU)： 在特定條件下，每一分鐘催化一個(gè)微摩爾底物轉(zhuǎn)化
教學(xué)課件相關(guān)推薦
鄂ICP備17016276號(hào)-1