色譜分析法概論(2)(編輯修改稿)
2025-06-19 02:50 本頁面
【文章內(nèi)容簡介】 ][X][XVXSXK ??吸附系數(shù)與吸附劑的 活性、組分的性質(zhì)和 流動相的性質(zhì)有關(guān)。 35 吸附色譜法 ?固定相 多為吸附劑，如硅膠、氧化鋁。 ?硅膠 表面硅醇基為吸附中心。 ?經(jīng)典液相柱色譜和薄層色譜：一般硅膠 ?高效液相色譜：球型或無定型全多孔硅 膠和堆積硅珠。 ?氣相色譜：高分子多孔微球等 36 吸附色譜法 ?流動相 有機溶劑（硅膠為吸附劑） ?洗脫能力：主要由其極性決定。 ?強極性流動相占據(jù)吸附中心的能力強，洗脫能力強，使 k值小，保留時間短。 ?Snyder溶劑強度 ?o：吸附自由能，表示洗脫能力。 ?o值越大，固定相對溶劑的吸附能力越強，即洗脫能力越強。 37 表 171 一些溶劑在硅膠上的 ?o值 溶劑 溶劑強度 （ ?o） 溶劑 溶劑強度 （ ?o） 正戊烷 甲基特丁基醚 正己烷 醋酸乙酯 氯仿 乙腈 二氯甲烷 異丙醇 乙醚 甲醇 38 吸附色譜法 ? 洗脫順序 ka=KaSa/Vm ? 在色譜柱（ Sa與 Vm一定）時， Ka大的組分保留強，后被洗脫， Ka小的組分在吸附劑上保留弱，先被洗脫。 ? Ka與組分的性質(zhì)（極性、取代基的類型和數(shù)目、構(gòu)型有關(guān)）。 39 以硅膠為吸附劑：極性強的組分吸附力強 。 ①飽和碳氫化合物為非極性化合物，不被吸附。②基本母核相同，引入的取代基極性越強，則分子的極性越強，吸附能力越強；極性基團越多，分子極性越強 (但要考慮其他因素的影響 ) 。 ③不飽和化合物的吸附力強，雙鍵數(shù)越多，吸附力越強。 ④分子中取代基的空間排列 40 三、離子交換色譜法 ? 分離原理 利用被分離組分離子交換能力的 差別而實現(xiàn)分離。 ? 分為陽離子交換色譜法和陰離子交換色譜法。 ? 陽離子交換： ? 陰離子交換： ? 離子交換通式： 交換 再生 + + 3 RNR+ OH Cl RNR+ 3 Cl OH 交換 再生 + +R B A R A B+ + RSO H+ Na+ Na+ + 3 3 H RSO 41 四、空間排阻色譜法 ? 分離原理 根據(jù)被分離組分分子的線團尺寸 進行分離 。 也稱為分子排阻色譜法。 42 43 空間排阻色譜法 ? 根據(jù)空間排阻（ steric exclusion）理論，孔內(nèi)外同等大小的溶質(zhì)分子處于擴散平衡狀態(tài)： ? 滲透系數(shù) ： Kp =?Xs?/?Xm? （ 0＜ Kp＜ 1 ） 由溶質(zhì)分子的線團尺寸和凝膠孔隙的大小所決定。在一定分子線團尺寸范圍內(nèi)， Kp與分子量相關(guān)，即組分按分子量的大小分離。 X m X s44 空間排阻色譜法 ? 固定相 多孔凝膠：軟質(zhì)、半軟質(zhì)和硬質(zhì) ? 主要性能參數(shù) 平均孔徑 排斥極限（ Kp=0）：不能滲透進入凝膠的任何孔隙最低分子量 分子量范圍：排斥極限（ Kp=0）與全滲透點（ Kp=1）之間的分子量范圍圍。選擇凝膠時應使試樣的分子量落入此范圍。 45 空間排阻色譜法 ? 流動相 ? 要求：能溶解試樣、潤濕凝膠，粘度要低 ? 水溶 性試樣選擇水溶液為流動相 (稱為 凝膠過濾色譜 gel filtration chromatography； GFC)； ? 非水溶性試樣選擇四氫呋喃、氯仿、甲苯和二甲基甲酰胺等有機溶劑為流動相 (凝膠滲透色譜 gel permeation chromatography； GPC)。 46 空間排阻色譜法 ?保留體積與滲透系數(shù)的關(guān)系 )1(msPmR VVKVV ??sp0R VKVV ??Vm≈ V0 分子線團尺寸（分子量）大的組分， 其滲透系數(shù)小，保留體積也小， 因而先被洗脫出柱 。 47 小結(jié) ? 色譜過程方程式 ： ? 分配系數(shù)大的組分保留時間長（保留體積大），晚流出色譜柱。 ? K在分配色譜、吸附色譜、離子交換色譜和凝膠色譜中，分別為狹義分配系數(shù) K、吸附系數(shù)Ka、選擇性系數(shù) KA/B和滲透系數(shù) Kp， ? Vs分別為色譜柱（或薄層板）內(nèi)固定液體積、吸附劑表面積、離子交換劑總交換容量和凝膠孔內(nèi)總?cè)莘e。 )1(ms0R VVKtt ??s0R KVVV ??48 第四節(jié) 色譜法基本理論 49 21RR21RR )(22/)(1212WWttW
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