儀器分析第四章高效液相色譜分析法(編輯修改稿)
2025-06-18 10:53 本頁面
【文章內(nèi)容簡介】 相極性 流動相極性 組分極性越小，保留時間越長；適用非極性化合物的分離。 生物與化學工程學院 儀器分析 第二節(jié) 主要分離類型 （二）、化學鍵合固定相色譜 固定相非常穩(wěn)定 ， 在使用中不易流失 。 由于可將各種極性的官能團鍵合到載體表面 ， 因此它適用于種類繁多樣品的分離 。 特點 將各種不同基團通過化學反應鍵合到硅膠（ 擔體 ） 表面的游離羥基上 。 生物與化學工程學院 儀器分析 第二節(jié) 主要分離類型 1. 鍵合固定相制備 ODS(C18)鍵合相 硅膠 十八烷基氯硅烷 非極性 硅烷化反應 使用 pH范圍： 28 生物與化學工程學院 儀器分析 第二節(jié) 主要分離類型 2. 鍵合固定相類型 類型 反相柱 正相柱 氨丙基 氰乙基、醚和醇等 極性基團 不同碳原子數(shù)的 烷烴（ C8和 C18）、 苯基等疏水基團 生物與化學工程學院 儀器分析 第二節(jié) 主要分離類型 保留時間： 例：以 ODS鍵合色譜柱、甲醇 水為流動相分離以下兩種苯甲酸，試判斷出峰次序。 C O O HO HO HC O O HO HO HH O沒食子酸 3,4二羥基苯甲酸 固定相 : 非極性 。 流動相 : 極性 組分極性 : 3,4二羥基苯甲酸 沒食子酸 生物與化學工程學院 儀器分析 第二節(jié) 主要分離類型 三、離子交換色譜 固定相 ：陰離子交換樹脂或陽離子交換樹脂。 陽離子 ： － SO3H(強 ) － CO2H(弱 ) 陰離子： － N+R3(強 ) － NH2 (弱 ) 擔體 苯乙烯 二乙烯苯共聚物微球 鍵合基團 鍵合 生物與化學工程學院 儀器分析 第二節(jié) 主要分離類型 流動相 ： 陽離子交換樹脂固定相 ， 采用酸性水溶液； 陰離子交換樹脂固定相 ， 采用堿性水溶液 。 基本原理： 試樣組分在固定相上發(fā)生的反復離子交換反應 ， 依據(jù)組分與離子交換劑之間親和力的不同而分離 。 生物與化學工程學院 儀器分析 第二節(jié) 主要分離類型 陽離子交換： R— SO3H + M+ = R— SO3 M + H+ 陰離子交換： R— NR4OH + X = R— NR4 X + OH 一般形式： R— A + B = R— B + A ? ? ? ?? ? ? ?BcARcAcBRcKAB??? 試樣組分與交換基團間的作用力的大小決定色譜的保留行為 。 生物與化學工程學院 儀器分析 第二節(jié) 主要分離類型 陽離子交換： R— SO3H + M+ = R— SO3 M + H+ 陰離子交換： R— NR4OH + X = R— NR4 X + OH 組分與離子交換劑之間作用力的大小與 離子半徑 、電荷 、 存在形式 等有關(guān) 。 作用大 ， 保留時間長 。 應用： 離子及可離解的化合物， 氨基酸、核酸、蛋白質(zhì)等。 生物與化學工程學院 儀器分析 第二節(jié) 主要分離類型 四、離子對色譜 離子對色譜 : 用正向或反向色譜柱分離離子和中性化合物混合物的方法 。 離子對： 兩個相反電荷的離子相互作用形成一個中
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