色譜分析中國(guó)藥科大學(xué)超高效液相色譜(uplc)(編輯修改稿)
2025-02-02 23:19 本頁(yè)面
【文章內(nèi)容簡(jiǎn)介】 析速度而不降低分離度 。因?yàn)轭w粒度減小后，柱長(zhǎng)可以按比例縮短而保持柱效不變 (見式 3)，而且 Van Deemter 理論表明最佳流速與粒度成反比 (見式 4)。柱長(zhǎng)縮短會(huì)加快分離速度，而顆粒度越小，最佳流速也越大，進(jìn)而可以通過(guò)提高流速來(lái)進(jìn)一步加快分離速度。 Ldp∝N…… （ 3） 由于 新一代 UPLC 系統(tǒng)用 181。m 顆粒，柱長(zhǎng)可以比用 5 181。m 顆粒時(shí)縮短 3 倍而保持柱效不變，而且使分離在高 3 倍的流速下進(jìn)行，結(jié)果 使分離過(guò)程快了 9 倍 而分離度保持不變。 超高靈 敏度 過(guò)去幾年中，提高靈敏度的工作集中在檢測(cè)器上 ，包括光學(xué)檢測(cè)器和質(zhì)譜檢測(cè)器。這種趨勢(shì)主要是受要求檢測(cè)化合物的濃度越來(lái)越低（如高效藥物）的驅(qū)動(dòng)。 然而采用超高性能色譜系統(tǒng)就能獲得靈敏度的顯著提高。 在 UPLC 中始終可得到較高的靈敏度。 UPLC 使用小顆粒技術(shù)可以得到更高的柱效（因而改善了分離度）、更窄的色譜峰寬 (見式 5），即更高的靈敏度。 1W∝ 2N 因?yàn)樯V峰變得更窄，峰高也就更高了 (見式 6)；同樣，當(dāng) UPLC 用于快速分析、用較短色譜柱而使柱效不變時(shí)，色譜峰高會(huì)相應(yīng)增 加 (見式 7)。因此，使用UPLC 技術(shù)，不僅可以在保持與 HPLC 相同分離度時(shí)提高峰高，而且在改善分離度的同時(shí)亦可提高峰高即靈敏度。 1 最佳流速 ∝ —— …… ..(4) dp 1 峰高∝ —— …..(6) W 1 峰高 ∝ —— ……(7) L …… .(5) 5 圖 5: HPLC 到 UPLC：靈敏度的改善無(wú)需折衷 UPLC 為最佳的質(zhì)譜入口 UPLC 與質(zhì)譜聯(lián)用，可以實(shí)質(zhì)性地改善質(zhì)譜檢測(cè)結(jié)果的質(zhì)量。 UPLC 的特殊性能使質(zhì)譜檢測(cè)器的性能首次得以充分體現(xiàn)。 由于低流速下色譜峰擴(kuò)散不大，增加了峰濃度，有利于提
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