【文章內(nèi)容簡(jiǎn)介】 光度變化率（（ A/min），結(jié)果應(yīng)符合產(chǎn)品技術(shù)要求性能指標(biāo)的要求。 評(píng)價(jià)依次包括：與國(guó)家參考物（和 /或國(guó)際參考物）的偏差分析、回收試驗(yàn)、方法學(xué)比對(duì)等方法，申請(qǐng)人可根據(jù)實(shí)際情況選擇合理方法進(jìn)行研究。 與國(guó)家參考物（和 /或國(guó)際參考物）的偏差分析用有證參考物質(zhì)（ CRM）或其他公認(rèn)的參考物質(zhì)或由參考方法定值的高、低 2 個(gè)濃度的人源樣品，對(duì)試劑盒進(jìn)行測(cè)試，重復(fù)測(cè)定 3次，取測(cè)試結(jié)果均值（ M），根據(jù)公式（ 1）計(jì)算相對(duì)偏差。如果 3 次結(jié)果都符合規(guī)定，即判為合格； 如果大于等于 2次的結(jié)果不符合，即判為不合格； 如果有 1 次結(jié)果不符合規(guī)定，則應(yīng)重新連續(xù)測(cè)試 20 次，分別計(jì) 算相對(duì)偏差，如果大于等于 19 次測(cè)試的結(jié)果符合規(guī)定，即判為合格。 ?????????（ 1）式中： B— 相對(duì)偏差； M— 測(cè)試結(jié)果均值； T— 有證參考物質(zhì)標(biāo)示值，或各濃度人源樣品定值。 回收試驗(yàn)在人源樣品中加入一定體積標(biāo)準(zhǔn)或校準(zhǔn)品或純品溶液，每個(gè)濃度重復(fù)測(cè)定 3次，計(jì)算回收率。 回收試驗(yàn)注意事項(xiàng)： 加入的標(biāo)準(zhǔn)或校準(zhǔn)品或純品溶液體積與人源樣品體積比應(yīng)不大于 1:19或其體積比不會(huì)產(chǎn)生基質(zhì)的變化。 加入標(biāo)準(zhǔn)溶液或校準(zhǔn)品溶液或純品溶液 后，樣品總濃度應(yīng)在試劑盒測(cè)定線(xiàn)性范圍內(nèi)。 。 /國(guó)際普遍認(rèn)為質(zhì)量較好的已上市同類(lèi)試劑作為參比試劑，與擬申報(bào)試劑同時(shí)檢測(cè)一批臨床樣品（至少 40 例樣本），從測(cè)定結(jié)果間的差異了解擬申報(bào)試劑與參比方法間的偏倚。如偏倚很小或在允許的誤差范圍內(nèi)，說(shuō)明兩檢測(cè)系統(tǒng)對(duì)病人標(biāo)本測(cè)定結(jié)果基本相符，對(duì)同一份臨床樣本的醫(yī)學(xué)解釋?zhuān)瑪M申報(bào)試劑與參比方法相比不會(huì)產(chǎn)生差異結(jié)果。 在實(shí)施方法學(xué)比對(duì)前，應(yīng)分別對(duì)擬申報(bào)試劑和參比試劑進(jìn)行初步評(píng)估，只有在確認(rèn)兩者都分別符合各自相關(guān)的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)后方可進(jìn)行比對(duì)試驗(yàn)。方法學(xué)比對(duì)時(shí)應(yīng)注意質(zhì)量控制、樣本類(lèi)型、濃度分布范圍并對(duì)結(jié)果進(jìn)行合理的統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。 方法學(xué)比對(duì)注意事項(xiàng)： 樣本貯存時(shí)間及條件由被測(cè)組分的穩(wěn)定性而定，盡可能避免使用貯存的樣品； ，并且此樣本對(duì)于被測(cè)組成的影響應(yīng)明確，盡量不使用含有干擾此方法的組分或條件； ； ，應(yīng)避免使用。 批內(nèi)精密度批內(nèi)精密度評(píng)估應(yīng)至少選擇高、低兩個(gè)濃度水平的樣本（或質(zhì)控品）進(jìn)行，兩個(gè)濃度都應(yīng)在試劑盒的測(cè)量范圍內(nèi)且有一定的臨床意義，通常選用該檢測(cè)指標(biāo)的正常參考值附近和異常值樣本，建議采用人源樣品或與人源樣品基質(zhì)接近的樣本進(jìn)行試驗(yàn)。批內(nèi)精密度（變異系數(shù) CV）應(yīng)不大于 %，批內(nèi)瓶間差（干粉或凍干試劑適用）應(yīng)不大于 %。 批間精密度用同一質(zhì)控品分別測(cè)試 3 個(gè)不同批號(hào)的試劑，每個(gè)批號(hào)測(cè)定 3 次，分別計(jì)算每批 3 次測(cè)定 的均值。相對(duì)極差應(yīng)不大于%。 相似，但不可采用含有對(duì)測(cè)定方法具有明確干擾作用物質(zhì)的樣本。理想的樣本為分析物濃度接近預(yù)期測(cè)定上限的混合人血清（或其他人源樣品），且應(yīng)充分考慮多倍稀釋對(duì)樣本基質(zhì)的影響。 建立一種定量測(cè)定方法的線(xiàn)性范圍時(shí)，需在預(yù)期測(cè)定范圍內(nèi)選擇7— 11 個(gè)濃度水平。例如，將預(yù)期測(cè)定范圍加寬至 130%，在此范圍內(nèi)選擇更多的濃度水平，然后依據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果逐漸減少數(shù)據(jù)點(diǎn)直至表現(xiàn)出線(xiàn)性關(guān)系，確定線(xiàn)性范圍。 也可以采用高濃度 樣本稀釋的方法驗(yàn)證線(xiàn)性，將接近線(xiàn)性區(qū)間上限的高值樣本按一定比例稀釋為至少 5 種濃度，其中低值濃度的樣本須接近線(xiàn)性區(qū)間的下限。按試劑盒說(shuō)明書(shū)操作，對(duì)每一濃度的樣本均重復(fù)檢測(cè) 2 次，計(jì)算其平均值，將結(jié)果平均值和稀釋比例用最小二乘法進(jìn)行直線(xiàn)擬合，計(jì)算線(xiàn)性相關(guān)系數(shù) r，應(yīng)不低于 。 ，在試劑盒規(guī)定參數(shù)下所得的單位濃度吸光度變化率（Δ A/min）應(yīng)符合申請(qǐng)人規(guī)定范圍。 ，干擾物濃度的分布需覆蓋人體生理及病理狀態(tài)下 可能出現(xiàn)的物質(zhì)濃度，如膽紅素、甘油三酯、總膽固醇、維生素 C、血紅蛋白等，方法為對(duì)模擬添加樣本分別進(jìn)行驗(yàn)證，說(shuō)明樣本的制備方法及干擾實(shí)驗(yàn)的評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)，確定可接受的干擾物質(zhì)濃度（結(jié)果應(yīng)量化表示，避免使用輕度、嚴(yán)重等模糊表述）。 藥物干擾的研究可根據(jù)需要由申請(qǐng)人選擇是否進(jìn)行或選擇何種藥物及其濃度進(jìn)行。 （如產(chǎn)品中包含）在注冊(cè)單元包括質(zhì)控品和校準(zhǔn)品時(shí)，校準(zhǔn)品應(yīng)當(dāng)提交完整的溯源性文件，包括賦值試驗(yàn)資料和溯源 SOP文件等。應(yīng)參照 GB/T21415— 2021《體外診斷醫(yī)療器械生物樣 品中量的測(cè)量校準(zhǔn)品和控制物質(zhì)賦值的計(jì)量學(xué)溯源性》的要求，提供企業(yè)（工作）校準(zhǔn)品及試劑盒配套校準(zhǔn)品定值及不確定度計(jì)算相關(guān)資料，提供質(zhì)控品賦值及其質(zhì)控范圍確定的相關(guān)資料。同時(shí)，應(yīng)對(duì)校準(zhǔn)品、質(zhì)控品的賦值結(jié)果的瓶?jī)?nèi)均勻性、瓶間均勻性，以及其賦值結(jié)果的準(zhǔn)確度進(jìn)行評(píng)價(jià)。如校準(zhǔn)品或質(zhì)控品的基質(zhì)不同于臨床常用樣本類(lèi)型，還應(yīng)提交校準(zhǔn)物質(zhì)互換性的相關(guān)研究資料。 3 批產(chǎn)品進(jìn)行性能評(píng)估，對(duì)結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。不同適用機(jī)型、不同包裝規(guī)格，應(yīng)分別提交分析性能評(píng)估報(bào)告。如注冊(cè)申請(qǐng)中包含不同的包裝規(guī)格 ，需要對(duì)不同包裝規(guī)格之間的差異進(jìn)行分析或驗(yàn)證。如不同的包裝規(guī)格產(chǎn)品間存在性能差異，需要提交采用每個(gè)包裝規(guī)格產(chǎn)品進(jìn)行的上述項(xiàng)目評(píng)估的試驗(yàn)資料及總結(jié)。如不同包裝規(guī)格之間不存在性能差異，需要提交包裝規(guī)格之間不存在性能差異的詳細(xì)說(shuō)明，具體說(shuō)明不同包裝規(guī)格之間的差別及可能產(chǎn)生的影響。如注冊(cè)申請(qǐng)中包括不同適用機(jī)型，需要提交在不同機(jī)型上進(jìn)行上述項(xiàng)目評(píng)估的試驗(yàn)資料及總結(jié)。 試劑盒的樣本類(lèi)型如包括血清和血漿樣本，則應(yīng)對(duì)二者進(jìn)行相關(guān)性研究以確認(rèn)二者檢測(cè)結(jié)果是否完全一致或存在某種相關(guān)性（如系數(shù)關(guān)系）。對(duì)于血漿樣本，申請(qǐng)人 應(yīng)對(duì)不同的抗凝劑進(jìn)行研究以確認(rèn)最適的抗凝條件以及是否會(huì)干擾檢測(cè)結(jié)果。 性能指標(biāo)的評(píng)價(jià)方法并無(wú)統(tǒng)一的標(biāo)準(zhǔn)可依，可根據(jù)不同的試劑特征進(jìn)行，前提是必須保證研究的科學(xué)合理性。具體研究方法建議參考相關(guān)的國(guó)內(nèi)外有關(guān)體外診斷產(chǎn)品性能評(píng)估的文件進(jìn)行。 （五）參考區(qū)間確定資料應(yīng)提交建立參考區(qū)間所采用樣本來(lái)源及詳細(xì)的試驗(yàn)資料。應(yīng)明確參考人群的篩選標(biāo)準(zhǔn)，研究各組（如性別、年齡等）例數(shù)應(yīng)符合統(tǒng)計(jì)學(xué)要求。 若引用針對(duì)中國(guó)人群參考區(qū)間研究的相關(guān)權(quán)威指南，應(yīng)明確說(shuō)明出處，提交文獻(xiàn)資料并說(shuō)明引用依據(jù)，應(yīng)采用一定數(shù)量 的臨床樣本對(duì)該參考區(qū)間進(jìn)行驗(yàn)證。參考區(qū)間研究結(jié)論應(yīng)與說(shuō)明書(shū)【參考區(qū)間】的相應(yīng)描述保持一致。 （六）穩(wěn)定性研究資料穩(wěn)定性研究資料主要涉及兩部分內(nèi)容，申報(bào)試劑的穩(wěn)定性和適用樣本的穩(wěn)定性研究。 試劑的穩(wěn)定性包括實(shí)時(shí)穩(wěn)定性、運(yùn)輸穩(wěn)定性、開(kāi)瓶（待機(jī)）穩(wěn)定性及凍融次數(shù)限制（如適用）等。對(duì)于實(shí)時(shí)穩(wěn)定性研究，申請(qǐng)人應(yīng)提供不少于 3 個(gè)生產(chǎn)批次在實(shí)際儲(chǔ)存條件下保存至成品有效期后的研究資料，并提供至少 1個(gè)生產(chǎn)批次的開(kāi)瓶穩(wěn)定性和運(yùn)輸穩(wěn)定性研究資料，包括研究目的、材料和方法、研究結(jié)論等。如產(chǎn)品包含校準(zhǔn)品和質(zhì)控品，還應(yīng)提 供相應(yīng)穩(wěn)定性試驗(yàn)研究資料。試劑的穩(wěn)定性研究應(yīng)注意選取代表性包裝規(guī)格進(jìn)行研究。適用樣本的穩(wěn)定性主要包括室溫保存、冷藏或冷凍條件下的有效期驗(yàn)證，可以在合理溫度范圍內(nèi)選擇溫度點(diǎn)（溫度范圍），每間隔一定的時(shí)間段即對(duì)儲(chǔ)存樣本的穩(wěn)定性進(jìn)行分析驗(yàn)證，從而確認(rèn)不同類(lèi)型樣本的效期穩(wěn)定性。適于冷凍保存的樣本還應(yīng)對(duì)凍融次數(shù)進(jìn)行評(píng)價(jià)。 試劑穩(wěn)定性和樣本穩(wěn)定性?xún)刹糠謨?nèi)容的研究結(jié)果均應(yīng)在說(shuō)明書(shū)【儲(chǔ)存條件及有效期】和【樣本要求】?jī)身?xiàng)中進(jìn)行詳細(xì)說(shuō)明。 （七）臨床評(píng)價(jià)資料根據(jù)《關(guān)于公布新修訂免于進(jìn)行臨床試驗(yàn)醫(yī)療器械目錄的通告 》（國(guó)家藥品監(jiān)督管理局通告 2021 年第 94 號(hào)），總膽汁酸檢測(cè)試劑可免于進(jìn)行臨床試驗(yàn)，申請(qǐng)人可依照《免于進(jìn)行臨床試驗(yàn)的體外診斷試劑臨床評(píng)價(jià)資料基本要求（試行）》開(kāi)展評(píng)價(jià)。申請(qǐng)人如無(wú)法或不適于按照上述要求對(duì)產(chǎn)品進(jìn)行臨床評(píng)價(jià)，則應(yīng)按照《體外診斷試劑臨床試驗(yàn)技術(shù)指導(dǎo)原則》的要求開(kāi)展臨床試驗(yàn)。下面僅對(duì)臨床試驗(yàn)中的基本問(wèn)題進(jìn)行闡述。 /國(guó)際普遍認(rèn)為質(zhì)量較好的已上市同類(lèi)試劑作為參比方法，采用擬申報(bào)產(chǎn)品與之進(jìn)行對(duì)比試驗(yàn)研究，證明擬申報(bào)產(chǎn)品與已上市產(chǎn)品等效。 對(duì)比試驗(yàn)結(jié)果不一致（檢測(cè)值差異 較大）的樣本應(yīng)采用參考方法進(jìn)行驗(yàn)證。 的臨床試驗(yàn)機(jī)構(gòu)開(kāi)展臨床試驗(yàn)。臨床試驗(yàn)機(jī)構(gòu)實(shí)驗(yàn)操作人員應(yīng)有足夠的時(shí)間熟悉檢測(cè)系統(tǒng)的各環(huán)節(jié)（試劑、質(zhì)控及操作程序等），熟悉評(píng)價(jià)方案。在整個(gè)實(shí)驗(yàn)中，待評(píng)試劑和對(duì)照試劑都應(yīng)處于有效的質(zhì)量控制下，最大限度保證試驗(yàn)數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性及可重復(fù)性。 ，必須獲得臨床試驗(yàn)機(jī)構(gòu)倫理委員會(huì)的同意，如該臨床試驗(yàn)對(duì)受試者幾乎沒(méi)有風(fēng)險(xiǎn)，可經(jīng)倫理委員會(huì)審查和批準(zhǔn)后免于受試者的知情同意。 ，研究人員應(yīng)從流行病學(xué)、統(tǒng)計(jì)學(xué)、臨床醫(yī)學(xué)、檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)等多方面考慮，設(shè)計(jì)科學(xué)合理的臨床研究方案。建議臨床前開(kāi)展預(yù)試驗(yàn)工作，最大限度地控制試驗(yàn)誤差。各臨床試驗(yàn)機(jī)構(gòu)的方案設(shè)置應(yīng)保持一致，且保證在整個(gè)臨床試驗(yàn)過(guò)程中遵循預(yù)定的方案實(shí)施，不可隨意改動(dòng)。整個(gè)試驗(yàn)過(guò)程應(yīng)在臨床試驗(yàn)機(jī)構(gòu)的實(shí)驗(yàn)室內(nèi)并由本實(shí)驗(yàn)室承 擔(dān)本實(shí)驗(yàn)的技術(shù)人員操作完成，申報(bào)單位的技術(shù)人員除進(jìn)行必要的技術(shù)指導(dǎo)外，不得隨意干涉實(shí)驗(yàn)進(jìn)程，尤其是數(shù)據(jù)收集過(guò)程。 試驗(yàn)方案中應(yīng)確定嚴(yán)格的病例納入 /排除標(biāo)準(zhǔn)，任何已經(jīng)入選的病例再被排除出臨床研究都應(yīng)記錄在案并明確說(shuō)明原因。在試驗(yàn)操作過(guò)程中和判定試驗(yàn)結(jié)果時(shí)應(yīng)采用盲法以保證試驗(yàn)結(jié)果的客觀(guān)性。各臨床試驗(yàn)機(jī)構(gòu)選用的參比試劑應(yīng)保持一致，以便進(jìn)行合理的統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。另外，待評(píng)試劑的樣本類(lèi)型應(yīng)不超越參比試劑的樣本類(lèi)型。 臨床試驗(yàn)方案必須獲得臨床試驗(yàn)機(jī)構(gòu)倫理委員會(huì)的同意。 具有特定癥狀 /體征人群作為研究對(duì)象。注冊(cè)申請(qǐng)人在建立病例納入標(biāo)準(zhǔn)時(shí)，應(yīng)考慮到不同人群的差異，盡量覆蓋各類(lèi)適用人群。在進(jìn)行結(jié)果統(tǒng)計(jì)分析時(shí)，建議對(duì)各類(lèi)人群分別進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析。總體樣本數(shù)不少于 200 例，異常值樣本比例應(yīng)不低于試驗(yàn)總量的 30%。樣本中待測(cè)物濃度應(yīng)覆蓋待評(píng)試劑線(xiàn)性范圍，且盡可能均勻分布。 應(yīng)明確樣本存貯條件、可否凍融等要求及避免使用的樣本，血漿應(yīng)明確抗凝劑的要求。實(shí)驗(yàn)中，盡可能使用新鮮樣本，避免貯存。如無(wú)法避免使用貯存樣品時(shí)，注明貯存條件及時(shí)間，在數(shù)據(jù)分析時(shí)應(yīng)考慮其影響。 如果待評(píng)試 劑同時(shí)適用于血清和血漿樣本類(lèi)型，可完成一個(gè)樣本類(lèi)型不少于 200 例的臨床研究，同時(shí)驗(yàn)證其中至少 100 例受試者的自身血清、血漿樣本測(cè)試結(jié)果間的一致性（采用待評(píng)試劑檢測(cè)），其中不同濃度樣本分布情況與總例數(shù)中分布情況應(yīng)一致。也可以分別對(duì)同時(shí)適用的多個(gè)樣本類(lèi)型按照《關(guān)于發(fā)布體外診斷試劑臨床試驗(yàn)技術(shù)指導(dǎo)原則的通告》（國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理總局通告 2021年第 16 號(hào)）中試驗(yàn)樣本量一般要求規(guī)定的 200例進(jìn)行試驗(yàn)，異常值參照上述規(guī)定。 涉及產(chǎn)品檢測(cè)條件優(yōu)化、增加與原樣本類(lèi)型具有可比性的其他樣本類(lèi)型等變更事項(xiàng)，臨床試驗(yàn)采 用變更后產(chǎn)品與變更前產(chǎn)品或者已上市同類(lèi)產(chǎn)品進(jìn)行比對(duì)試驗(yàn)，在至少 2 家（含 2 家）臨床試驗(yàn)機(jī)構(gòu)開(kāi)展臨床試驗(yàn)，總樣本數(shù)不少于 100例，異常值樣本數(shù)不少于 30%。陽(yáng)性判斷值或參考區(qū)間的變化及增加臨床適應(yīng)癥等變更事項(xiàng)，應(yīng)根據(jù)產(chǎn)品具體變更情況，酌情增加臨床試驗(yàn)總樣本數(shù)。 ，結(jié)合臨床試驗(yàn)數(shù)據(jù)的正 /偏態(tài)分布等情況，建議統(tǒng)計(jì)學(xué)負(fù)責(zé)人選擇合理的統(tǒng)計(jì)學(xué)方法進(jìn)行分析，統(tǒng)計(jì)分析應(yīng)可以證明兩種方法的檢測(cè)結(jié)果無(wú)明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。如相關(guān)分析、線(xiàn)性回歸、絕對(duì)偏倚 /偏差及相對(duì)偏倚 /偏差 分析、配對(duì) t 檢驗(yàn)等?？己嗽噭┖蛯?duì)比試劑兩組檢測(cè)結(jié)果的相關(guān)及線(xiàn)性回歸分析，應(yīng)重點(diǎn)觀(guān)察相關(guān)系數(shù)（ r 值）或判定系數(shù)（ R2）、回歸擬合方程（斜率和 y 軸截距）等指標(biāo)。在臨床研究方案中應(yīng)明確統(tǒng)計(jì)的檢驗(yàn)水準(zhǔn)及檢驗(yàn)的假設(shè)，即評(píng)價(jià)考核試劑與對(duì)比試劑是否等效的標(biāo)準(zhǔn)。 如試劑盒同時(shí)適用于血清和血漿樣本，可采用如相關(guān)分析、線(xiàn)性回歸、配對(duì) t 檢驗(yàn)等統(tǒng)計(jì)學(xué)方法來(lái)評(píng)價(jià)血漿和血清樣本測(cè)試結(jié)果間的一致性。 《關(guān)于發(fā)布體外診斷試劑臨床試驗(yàn)技術(shù)指導(dǎo)原則的通告》（國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理總局通告 2021 年第 16號(hào)）的要求，臨床試驗(yàn)報(bào)告應(yīng)該對(duì)試驗(yàn)的整體設(shè)計(jì)及各個(gè)關(guān)鍵點(diǎn)給予清晰、完整的闡述，應(yīng)該對(duì)整個(gè)臨床試驗(yàn)實(shí)施過(guò)程、結(jié)果分析、結(jié)論等進(jìn)行條理分明的描述，并應(yīng)包括必要的基礎(chǔ)數(shù)據(jù)和統(tǒng)計(jì)分析方法。建議在臨床總結(jié)報(bào)告中對(duì)以下內(nèi)容進(jìn)行詳述。 臨床試驗(yàn)總體設(shè)計(jì)及方案描述 臨床試驗(yàn)的整體管理情況、臨床試驗(yàn)機(jī)構(gòu)選擇、臨床主要研究人員簡(jiǎn)介等基本情況介紹。 /排除標(biāo)準(zhǔn)、不同人群的預(yù)期選擇例數(shù)及標(biāo)準(zhǔn)。 ，樣本的收集、處理及保存等。 、統(tǒng)計(jì)軟 件、評(píng)價(jià)統(tǒng)計(jì)結(jié)果的標(biāo)準(zhǔn)。 具體的臨床試驗(yàn)情況 待評(píng)試劑和參比試劑的名稱(chēng)、批號(hào)、有效期及所用機(jī)型等信息。 、人群分布情況進(jìn)行總合。 質(zhì)量控制，試驗(yàn)人員培訓(xùn)、儀器日常維護(hù)、儀器校準(zhǔn)、質(zhì)控品運(yùn)行情況，對(duì)檢測(cè)精密度、質(zhì)控品回收（或測(cè)量值）、抽查結(jié)果評(píng)估。 ，樣本檢測(cè)、數(shù)據(jù)收集、樣本長(zhǎng)期保存等。 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 數(shù)據(jù)預(yù)處理、對(duì)異常值或離群值的處理、研究過(guò)程中是否涉及對(duì)方案的修改。 定量值相關(guān)性和一致性分析用回歸分析驗(yàn)證兩種試劑結(jié)果的相關(guān)性，以 y=a+bx和 r、 R2 的形式給出回歸