【文章內(nèi)容簡介】 見的不良反應(yīng)包括運(yùn)動障礙、惡心、腹瀉、尿液變色。 谷氨酸受體拮抗劑 越來越多的證據(jù)表明 ， 多巴胺減少引起的帕金森癥狀和治療引起的運(yùn)動并發(fā)癥與在紋狀體棘狀神經(jīng)元中表達(dá)的谷氨酸受體功能的改變有關(guān) [19]。選擇性拮抗 NMDA 受體的藥物不但能減少運(yùn)動并發(fā)癥 ,還能改善帕金森癥狀。常用有金剛烷胺 (amantadine)、美金剛(memantine)和 MK801。但它們是一些具有微弱拮抗作用的非特異性 NMDA 受體拮抗劑 ，臨床應(yīng)用效果不佳 ， 且不良反應(yīng)多。研究開發(fā)具有特異性拮抗 AMDA 受體的藥物是以后的方向。 抗膽堿制劑 該類藥物能對抗失衡后過多的乙酰酰膽堿的作用 ， 也抑制突觸間隙中多巴胺的再攝取 ， 糾正乙酰膽堿和多巴胺的不平衡。適用于早期輕癥的患者 ， 對震顫有效 ， 但對運(yùn)動遲緩和肌強(qiáng)直沒有明顯的療效 ， 一般用于輔助左旋多巴的治療。常用藥物有苯海索 (benzhexol ,安坦 )、苯扎托品 (benzatropine)和右芐替米 [14]， 此類藥物療效不及金剛烷胺 ， 且不良反應(yīng)明顯。 腺苷 A2A 拮抗劑 腺苷 A2A 受體在大鼠、小鼠、猴和人的紋狀體中有豐富的表達(dá)。它們與多巴胺 D2 受體同位于紋狀體內(nèi)蒼白球刺狀輸出神經(jīng)元上 ， 兩種受體有相互拮抗的作用。因此 ， 腺苷 A2A拮抗 劑可產(chǎn)生與多巴胺 D2受體相似的作用 ， 認(rèn)為可以用于帕金森病的治療。 在早期 ， 用黃嘌呤衍生物治療帕金森病的試驗(yàn)失敗了 ， 但后來的研究表明 ， 使用更低劑量的該類藥物可以改善帕金森病。最近一項(xiàng)流行病研究顯示 ， 非選擇性的咖啡因可以降低帕金森病的危險(xiǎn) Shiozaki 等 [20]在幾種帕金森病小鼠模型中發(fā)現(xiàn) KW26002 是目前知道作用最強(qiáng)的選擇性腺苷 A2A 拮抗劑 ， 可以改善由利舍平或 MPTP 引起的強(qiáng)直性僵直和運(yùn)動功能減退。 Kanda 等 [21]在 MPTP 處理中發(fā)現(xiàn)聯(lián)合使用 KW26002 與左旋多巴或選擇性 D1， PD2多巴胺激動劑可以提高抗帕金森作用 ,但不會增加異動癥。同時(shí)其他一些對另一種選擇性腺苷 A2A 拮抗 劑 SCH58261 的研究 ， 也顯示長期給藥可以加強(qiáng)左旋多巴作用 ， 而不會有異動癥。腺苷 A2A 拮抗劑可以減少帕金森病治療中左旋多巴的用量 ， 有可能成為一種新型的有效的抗帕金森病藥物。 神經(jīng)營養(yǎng)因子 (neurotrophic factors ,NTFs) NTFs 是一類含量極少 ， 對神經(jīng)系統(tǒng)生命可溶性多肽。對中樞多巴胺能神經(jīng)元有選擇 6 性保護(hù)作用 ， 能促進(jìn) 黑質(zhì)多巴胺能神經(jīng)元的生存與再生。目前療效比較肯定的神經(jīng)營養(yǎng)因子有腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子 (BDNF)、膠質(zhì)細(xì)胞神經(jīng)營養(yǎng)因子 (GDNF)和 NT 4P5。 應(yīng)用高度敏感性 ELISA 法 ， Mogi 等 [22]發(fā)現(xiàn)在帕金森病患者大腦的黑質(zhì)中 BDNF 和NGF 濃度明顯降低 ， 并指出 BDNF 缺乏可能與黑質(zhì)紋狀體多巴胺神經(jīng)元退行性變性的發(fā)病機(jī)制有關(guān)。在早先的體外實(shí)驗(yàn)中測定不同的 NTF 對多巴胺能神經(jīng)元的作用 ， 發(fā)現(xiàn) BDNF，NT3， NT4P5， IGF， aFGF， bFGF， EGF， GDNF 和 TGFβ都能不同程度地支持胚胎多巴胺能神經(jīng)元。在 MPTP 和 62OHDA 損傷的藥物模型中 ， BDNF 和 GDNF 證實(shí)可以促進(jìn)多巴胺能神經(jīng)元生存 ， 在早期嚙齒類動物研究中 ， 低劑量的 BDNF 不能減緩黑質(zhì)多巴胺減少 ，但在后來的更高劑量的研究中發(fā)現(xiàn)確實(shí)能起到改善作用。在 MPTP 損傷的靈長類動物模型研究中 ， 給予 GDNF 后 ， 發(fā)現(xiàn)能對黑質(zhì)產(chǎn)生有效的、長期的作用 ， 保護(hù)多巴胺能神經(jīng)元 ，明顯改善行為癥狀。同時(shí)也有對比數(shù)據(jù)顯示 GDNF 是目前發(fā)現(xiàn)的對多巴胺能神經(jīng)元作用最強(qiáng)的因子之一。 神經(jīng)學(xué)家一直希望有朝一日 NTFs 能為神經(jīng)變性疾病提供有效治療。此外 ， 由于 NTFs本身不能通過血腦屏障 ， 因此 ， 在考慮用神經(jīng)營養(yǎng)因子治療帕金森病或其他 CNS 神經(jīng)退化性疾病的可能性時(shí) ， 必須解決給藥途徑的問題。為此提出多種方案 ， 包括外科手術(shù)移植能分泌神經(jīng)營養(yǎng)因子的細(xì)胞、基因轉(zhuǎn)移、控釋給藥和用小分子化合物來促進(jìn)多巴胺神經(jīng)中BDNF 的合成等。 基因治療 隨著分子克隆與基因重組技術(shù)的發(fā)展 ， 從分子水平開展疾病基因治療主要有 3 種途徑 :轉(zhuǎn)基因治療、反義 RNA 和反基因技術(shù)。轉(zhuǎn)基因技術(shù)是目前開展最為廣泛和深入的基因治療方法。針對帕金森病的治療基因包括 3 類 ， 一是表達(dá)多巴胺合成的酶基因 ， 二是神經(jīng)營養(yǎng)因子基因 ， 三是 BCL22 基 因。 BCL22 蛋白家族可抑制帕金森病病理過程中的細(xì)胞凋亡。酶基因包括酪氨酸羥化酶 (TH)基因、芳香 2L2 氨基酸脫羧酶 (AADC)基因和 GTP 環(huán)水解酶( GCH )基因 ， 神經(jīng)營養(yǎng)因子基因有 GDNF 基因、 BDNF 基因和神經(jīng)營養(yǎng)素 (NT 4P5)基因。帕金森病被認(rèn)為是中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病基因治療的最佳模型 ， 但目前尚處于實(shí)驗(yàn)性治療階段 ， 還需要在動物模型上進(jìn)行臨床前研究 ， 以確定其有效性和安全性。 腺苷 A2A 受體 拮抗 劑治療帕金森病的實(shí)驗(yàn)研究近況 國內(nèi)外研究現(xiàn)狀 目前，治療帕金森?。?PD）最有效和最常用的藥 物是左旋多巴（ Ldopa），通常與外周芳香氨基酸脫羧酶抑制劑合用如卡比多巴和芐絲肼。最近的動物實(shí)驗(yàn)研究表明 A2A 受體 7 拮抗劑可以作為帕金森病的一種替代療法，也可與現(xiàn)在的治療帕金森病方法聯(lián)合應(yīng)用，但是尚未開發(fā)出適用于臨床的有效制劑，因此我們對此領(lǐng)域進(jìn)行研究。 腺苷 A2A 受體是 4種已經(jīng)克隆出來的腺苷受體之一，也是 7個跨膜成分之一，為 G 蛋白偶聯(lián)受體，經(jīng)自放射測定，配體結(jié)合和經(jīng)腺苷受體激動劑刺激 cAMP 等研究發(fā)現(xiàn)它主要位于紋狀體、伏隔核和嗅球。原位雜交顯示這些腦區(qū)域 A2A 受體 mRNA 水平濃度較高并與那里的 D2受體 mRNA 相似并呈現(xiàn)共同表達(dá)的現(xiàn)象， D2受體主要位于間接通路紋狀體 Gpe 神經(jīng)元上。最近發(fā)現(xiàn) [24]，至少神經(jīng)系統(tǒng)其他部位和外周組織中有這種受體的 mRNA 的表達(dá)，但水平都很低。 A2A 受體對紋狀體神經(jīng)元的影響 在嚙齒動物和脊椎動物，紋狀體傳出神經(jīng)元編碼如前腦啡肽和前加速素 mRNA 表達(dá)是由受體 DA 和 Ach所調(diào)節(jié)。消耗 DA 引起前腦啡肽的表達(dá)增高（同時(shí)神經(jīng)元活動增高）以及 P 物質(zhì)的表達(dá)下降（同時(shí)神經(jīng)元活動降低） [23]。在鼠，多巴胺 D2受體選擇性拮抗劑如eticlopride 具有相似的作用，但是前腦啡肽 mRNA 表達(dá)也是增設(shè)的。 Ach 受體功能只有當(dāng)全部抑制了 DA 功能后才能被觀察到 [6]。在先經(jīng) D2受體選擇性拮抗劑治療后，再用 A2A 受體選擇性拮抗劑 KF17837治療（而不是用 A1受體拮抗劑 DPCPX），它能阻止前腦啡肽 mRNA表達(dá)增高。由 DA失神經(jīng)支配引起的前腦啡表達(dá)增高也能被非選擇性腺苷受體拮抗劑咖啡因所阻止 [25]。但是應(yīng)該指出的是， DA 消耗與 DA 受體阻滯引起的紋狀體基因表達(dá)的作用并不完全相同 [23]。然而 DA 消耗引起的前腦啡肽 mRNA 表達(dá)增高需要 A2A 和煙堿型 Ach受體的激活。阻滯 A2A 受體一方面可以阻止前 腦啡肽 mRNA 表達(dá)增高，另一方面又可使紋狀體 Gpe 神經(jīng)元活性下降，而在 PD 中這些神經(jīng)元是過度活化的。 對神經(jīng)元進(jìn)行調(diào)節(jié)的遞質(zhì)之一就是乙酰膽堿（ Ach）它主要由大的非棘型中間神經(jīng)元所釋放。研究顯示，紋狀體 Ach具有維持紋狀體神經(jīng)元的興奮和靜止?fàn)顟B(tài) [1]，因此 Ach受體拮抗劑在 PD 中的療效還可能是他們具有在失穩(wěn)紋狀體傳出神經(jīng)元的異常狀態(tài)的能力。另一觀點(diǎn)認(rèn)為煙堿型受體拮抗劑的治療作用是對 M1受體介導(dǎo)的促進(jìn)紋狀體 Gpe 神經(jīng)元點(diǎn)燃的抑制以及 M4受體介導(dǎo)的紋狀體 Gpi/黑質(zhì)神經(jīng)元點(diǎn)燃的抑制。雖然這些受體類型可以出現(xiàn)在兩 種傳出神經(jīng)元上，但是煙堿型激動劑對 cfos 表達(dá)的影響作用的研究結(jié)果提示 M1受體主要位于紋狀體 Gpe 神經(jīng)元，而 M4受體主要位于紋狀體 Gpi/黑質(zhì)神經(jīng)元上 [16]。 A2A受體刺激紋狀體突觸體釋放 Ach是以蛋白激酶 A 和 C 介導(dǎo)的方式。在活體內(nèi) [9]和紋狀體腦切片上 [21]（那里主要是 D2受體介導(dǎo)的抑制 Ach 釋放）也觀察到了相似的作用，這種作用能完全被 CGS21680所阻滯。 8 Ach受體拮抗劑在 PD中僅有輕微的治療作用，主要因?yàn)?A2A 受體能刺激 Ach的釋放，因此 A2A 受體拮抗劑通過減少 Ach的影響能對這種疾病起輔助 的治療。在 A2A 受體介導(dǎo)的運(yùn)動行為下，控制膽堿能遞質(zhì)的完整作用可以通過膽堿能拮抗 A2A 受體激動劑在某些行為學(xué)測試中的作用得到驗(yàn)證，在單側(cè)黑質(zhì)紋狀體受損害的鼠中， A2A 受體激動劑能對抗 DA激動劑阿樸嗎啡誘發(fā)的旋轉(zhuǎn)行為，這種作用能被阿托品所消除。 至少有兩種神經(jīng)遞質(zhì)（ GABA 和 Ach）控制著紋狀體中型棘型傳出神經(jīng)元，這些神經(jīng)遞質(zhì)的釋放是受 A2A 受體的調(diào)節(jié)。這種活化的受體從紋狀體釋放，抑制 GABA 的釋放 [23]，降低 GABA 介導(dǎo)的對這些神經(jīng)元的抑制，有利于平衡 D2受體的抑制性影響和谷氨酸和 Ach的興奮性影響。因此 ，通過增加（ GABA 介導(dǎo)）抑制性傳入（從返回側(cè)枝）使得 A2A 受體具有降低中型棘型傳出神經(jīng)元活性的作用。這可以部分地代償這些神經(jīng)元 D2受體介導(dǎo)的抑制作用的缺失和 D1受體介導(dǎo)的 GABA 釋放的缺失。由此可見， A2A 受體拮抗劑的作用是通過增加控制紋狀體 Gpe 神經(jīng)元的內(nèi)源性負(fù)反饋，從而代償 DA 介導(dǎo)對這些細(xì)胞的調(diào)節(jié)的缺乏。其結(jié)果是全面地減少傳出神經(jīng)元的活動，這也在前腦啡肽 mRNA 表達(dá)的下降和膽堿能中間神經(jīng)元 GABA 介導(dǎo)的抑制性增高上得到了反映。另外，在紋狀體 Gpe 神經(jīng)元點(diǎn)燃時(shí)可能也有一些作用，而神經(jīng)元失活時(shí)其作用則相當(dāng) 小。 多巴胺對直接和間接通路都具有調(diào)節(jié)作用，主要是通過紋狀體 Gpi/黑質(zhì)神經(jīng)元上的D1受體和紋狀體 Gpe 神經(jīng)元上的 D2受體來實(shí)現(xiàn)，但是這些神經(jīng)元并不絕對特異性地表達(dá)這些多巴胺能受體 [23]。在沒有多巴胺的情況下，從皮質(zhì)紋狀體神經(jīng)末梢上的 D2和 D1受體介導(dǎo)谷氨酸釋放的功能就失去了作用，這就會導(dǎo)致谷氨酸刺激紋狀體神經(jīng)元活動的增強(qiáng)[16]。這可能是多巴胺神經(jīng)支配后紋狀體 Gpe 通路活動增強(qiáng)的原因 [11]。這一通路活動增強(qiáng)還伴隨有這些神經(jīng)元編碼前腦非肽的基因表達(dá)增強(qiáng) [2]。相反，當(dāng)多巴胺神經(jīng)支配和多巴胺受體阻滯時(shí)，在 紋狀體 Gpi/黑質(zhì)神經(jīng)元編碼前加速素的基因表達(dá)下降 [11]，這也反映了紋狀體Gpi/黑質(zhì)通路的活動下降和神經(jīng)性多巴胺傳出到這些神經(jīng)元的缺失。因此，多巴胺神經(jīng)支配總的作用是引起兩個傳出通路活動的失平衡，這也在編碼神經(jīng)肽的基因表達(dá)中得到了反映。這種失平衡被認(rèn)為是與 PD 中運(yùn)動功能失調(diào)的基礎(chǔ)。 除了上述 A2A 受體的作用外，這種受體還能降低多巴胺 D2受體的親和力以及對抗 D1和 D2受體行為學(xué)、基因表達(dá)和第二信使系統(tǒng) [21]的影響作用?？傊?，缺乏 DA 情況下，阻滯A2A 受體可以糾正紋狀體基因表達(dá)的改變，并通過增加紋狀體 Gpe 神經(jīng)元的內(nèi)源性抑制作用，從而部分代償由于 D2受體介導(dǎo)對這些神經(jīng)元控制的缺乏。因此， DA 缺乏的最終結(jié)果可能由于 A2A 受體的阻滯而有所緩解。 9 A2A 受體拮抗劑 人類 A2A受體對抗已經(jīng)被做為一個出發(fā)點(diǎn)來治療干預(yù)減輕帕金森病的相關(guān)措施。這認(rèn)為是可以會發(fā)生的 ,至少在部分 ,可以增加多巴胺神經(jīng)元的敏感性和紋狀體多巴胺的耗竭水平。在此我們提出一種新穎的一系列功能化的 triazolo[4,5d]嘧啶衍生物，顯示出對抗 A2A受體的功能。優(yōu)化這些化合物，改進(jìn)其效力 ， 選擇性、和動力學(xué)特性而得到一些關(guān)鍵衍生物。通 過這些努力我們已經(jīng)一發(fā)現(xiàn) 60(V2020 / BIIB014)， 顯示出較強(qiáng)的帕金森氏癥的常用模型疾病。此外 ， 該衍生工具的藥效及臨床表現(xiàn)成功完成了第一階段的臨床研究。這種化合物目前在接受進(jìn)一步的臨床評價(jià)。 對癥治療 帕金森 疾病需圍繞更換枯竭的大腦中多巴胺 ， 因此一般通過管理多巴胺前體左旋多巴。左旋多巴在大腦中解放出多巴胺與一個非大腦滲透芳香酶抑制劑 ， 以減少了周圍的副作用發(fā)生率，由于主動脈的多巴胺的缺失。這種待遇不盡理想 ， 藥物遭受飄忽不定的藥物動力學(xué)、導(dǎo)致出現(xiàn)一些相關(guān)的問題 ， 通過對藥物進(jìn)行預(yù)測 ， 我們發(fā)現(xiàn)如果太少藥物被吸收進(jìn)入大腦 ， 不夠一定級別的多巴胺達(dá)成 ， 這導(dǎo)致過早的重現(xiàn)帕金森癥狀 ， 被稱為一個 “關(guān)閉事件 ”。另外 ， 如果太高了 ， 可造成可憐的大腦滲透。 稀堿液處理能誘發(fā)不由自主的肌肉運(yùn)動，有時(shí) ， 在極端的情況下會出現(xiàn)張力 ， 這是令人非常痛苦的 ， 有些則是身體不同的部位發(fā)生肌肉痙攣 ， 使其處于更虛弱的潛在疾病狀態(tài)。既發(fā)生在 68%的帕金森癥患者身上，相當(dāng)大的影響生活的質(zhì)量。再者 ， 因?yàn)榉答佉种?， 管理水平的增加外源性左旋多巴的結(jié)果會降低內(nèi)部形成的化合物 (內(nèi)源性多巴胺 )。因此管理治療最終會成為適得其反 ， 這要求穩(wěn)步增加劑量來留住的功效。 紋狀 體多巴胺 能 不斷變小 ， 可能是因?yàn)樵黾恿?D2受體的親和力 ，最近的證據(jù)表明 ， 腺苷的拮抗劑也許不能純粹為患者減輕帕金森病癥狀 (這種方式類似于發(fā)射機(jī)替代療法 ,如左旋多巴 )， 但也可以帶來神經(jīng)保護(hù) ， 減緩疾病的進(jìn)展。引人注目的實(shí)驗(yàn)證據(jù)表明封鎖