【正文】 ，主要是通過紋狀體 Gpi/黑質(zhì)神經(jīng)元上的D1受體和紋狀體 Gpe 神經(jīng)元上的 D2受體來實現(xiàn)，但是這些神經(jīng)元并不絕對特異性地表達這些多巴胺能受體 [23]。相反，當多巴胺神經(jīng)支配和多巴胺受體阻滯時，在 紋狀體 Gpi/黑質(zhì)神經(jīng)元編碼前加速素的基因表達下降 [11]，這也反映了紋狀體Gpi/黑質(zhì)通路的活動下降和神經(jīng)性多巴胺傳出到這些神經(jīng)元的缺失?？傊?，缺乏 DA 情況下，阻滯A2A 受體可以糾正紋狀體基因表達的改變，并通過增加紋狀體 Gpe 神經(jīng)元的內(nèi)源性抑制作用，從而部分代償由于 D2受體介導對這些神經(jīng)元控制的缺乏。在此我們提出一種新穎的一系列功能化的 triazolo[4,5d]嘧啶衍生物，顯示出對抗 A2A受體的功能。這種化合物目前在接受進一步的臨床評價。另外 ， 如果太高了 ， 可造成可憐的大腦滲透。因此管理治療最終會成為適得其反 ， 這要求穩(wěn)步增加劑量來留住的功效。這些研究最先進的是 KW 60021[24]，導出一個黃嘌呤 19拮抗劑 ， 最近完成的臨床試驗，能緩解帕金森病相關(guān)癥狀，然而 ， 這種化合物無法滿足更大的要求，有報道進一步凸現(xiàn)出一些問題，這樣臨床效用的化合物 ， 包括代謝問題及光化學穩(wěn)定性以及在固體形態(tài)中的表現(xiàn)形式 [20]。 11 第 2 章 實驗部分 實驗試劑與儀器 表 主要實驗 試劑 main experimental reagent 主要原料 純度 生產(chǎn)廠家 12 石油醚 分析純 上海萊盈化工有限公司 乙酸乙酯 分析純 上海萊盈化工有限公司 二氯甲烷 分析純 上海萊盈化工有限公司 四氫呋喃 分析純 藥明康德新藥開發(fā)有限公司 甲基叔丁基酯 分析純 上海萊盈化工有限公司 二碳酸二叔丁酯 分析純 上海試劑有限公司 對苯二甲基酰胺 分析純 藥明康德新藥開發(fā)有限公司 甲醇 分析純 上海萊盈化工有限公司 1,3二溴基丙烷 分析純 北京偶合科技有限公司 三乙胺 分析純 江蘇永華精細化工有限公司 檸檬酸 分析純 江蘇 市江天化工技術(shù)有限公司 乙腈 分析純 上海試劑有限公司 碳酸鉀 分析純 國藥集團化學試劑有限公司 硫酸二甲酯 分析純 北京偶合科技有限公司 二氯二氰基苯醌 分析純 北京偶合科技有限公司 硼氫化鈉 分析純 藥明康德新藥開發(fā)有限公 司 二氧六環(huán) 分析純 國藥集團化學試劑有限公司 氯化鈉 分析純 江蘇強盛功能化學有限公司 柱層析硅膠 分析純 上海上邦實業(yè)有限公司 無水硫酸銨 分析純 上海上邦實業(yè)有限公司 氯仿 分析純 藥明康德新藥開發(fā)有限公司 碳酸鈉 分析純 江蘇永華精細化工有限公司 鄰碘苯甲酸 分析純 國藥集團化學試劑有限公司 表 Table main experimental apparatus 儀器或設(shè)備 型號 生產(chǎn)廠家 13 電熱恒溫水浴鍋 DK98II 天津市泰斯特儀器有限公司 電子天平 CP214 奧豪斯儀器（上海）有限公司 旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀 RE201D 上海貝凱生物化工有限公司 核磁共振儀 SPRXI/400MZ 珀金埃爾默儀器 (上海 )有限公司 液相色譜 質(zhì)譜 儀 1100 LC/MSD Trap 美國 Agilent 油浴鍋 HH201 南京予凱儀器設(shè)備有限公司 實驗步驟 第一步反應 N H 2O H( B o c ) 2 OT E AN H B o cO H 1 2 取用三升的三口燒瓶放入攪拌子加入 5甲基 2氨基苯酚 以 1680mlTHF（無水四氫呋喃）溶劑溶解，然后加入 Boc 酸酐 144ml（二碳酸二叔丁酯），最后加入三乙胺 150ml，用油浴鍋保持溫度 50 度反應 16 個小時，在時間到達后，點板測試反應已完全，對反應進行后處理，開始用旋蒸儀旋去 THF，因為里面含有一部分 三乙胺，最后用油泵拉干，樣品成粘稠狀，拉干后用 EA（乙酸乙酯）和水將其溶解，選取三升的分液漏斗用乙酸乙酯和水萃取三次，然后有機相再用飽和鹽水萃取用于除去水分，萃取完成后用無水硫酸鈉干燥，然后再旋干，旋干后稱取質(zhì)量，用二氯甲烷進行拌樣，以產(chǎn)品質(zhì)量的 倍當量加入硅膠（硅膠為 100200 目），旋干，樣品呈淡黃色固體，留樣，然后選取中型柱子，進行裝柱，加入硅膠 1 千克，用石油醚溶解裝入柱子，再加入石油醚打開柱子旋塞讓其流動，使硅膠裝實，待其快要流干時關(guān)閉旋塞，進行加樣，加樣時要使其鋪墊均勻，嚴禁中間有漏縫，最后 均勻加入石英砂 1 千克，開始用石油醚進行沖洗，以除去沒有旋干的殘留的二氯甲烷，然后用石油醚：乙酸乙酯混合沖洗，通過對樣品的點板進行確認發(fā)現(xiàn)產(chǎn)品有兩個點，第一個點為雜質(zhì)點，第二點為產(chǎn)物點然后確認展開劑比例，先以小極性進行沖洗，先選取石油醚：乙酸乙酯 =80:1，加入 約 4050ml，發(fā)現(xiàn)沒有熒光點出現(xiàn)，也就是沒有東西出現(xiàn)，然后加大極性，以 70:1 沖洗依然沒有點出現(xiàn)，繼續(xù)加大極性，以 60:1 沖洗，通過點板發(fā)現(xiàn)有點出現(xiàn)，用展開劑 4： 1 進行爬板與留樣點對比發(fā)現(xiàn)雜質(zhì)點出現(xiàn)，繼續(xù)用 60:1 沖洗，過段時間有些許產(chǎn)物點出現(xiàn)，大概 有一升左右的交叉溶劑，然后純凈的產(chǎn)物出現(xiàn)，于是開始加大極性到 10:1，使產(chǎn)物迅速沖洗下來，最后加大極性到 8:1，并保持此極性沖洗直至沒有 14 產(chǎn)物出現(xiàn)，將收集的產(chǎn)物溶液旋干，測其質(zhì)量 ，取樣送核磁測。 第三步反應 N H B o cO B r OB o cNN a H 3 4 將第二步產(chǎn)物（ 3） ，用無水 DMF（ N,N二甲基甲酰胺）2020ml 溶解，使其降溫至零下 20 度，加入氫化鈉 ，然后升溫至室溫，過夜進行反應，點板反應完全后用旋蒸儀將其旋干，然后用油泵將其旋干，用乙酸乙酯 2020ml 和水（ 1500ml）萃取三次，有機相再用飽和鹽水（ 300ml）潤洗，潤洗完成后用適量無水硫酸鈉干燥，將溶液旋干，稱取質(zhì)量，用 適量的 二氯甲烷溶解，以 倍量硅 膠進行拌樣，旋干，留樣，選取中型柱子，用甲醇洗，再用石油醚沖洗，加入 700g 硅膠將其裝實，將旋干的產(chǎn)品加入柱子中，使其散落均勻無縫隙，最后加入石英砂，對留樣進行點板爬板（用石油醚：乙酸乙酯 =4:1)發(fā)現(xiàn)產(chǎn)物點在中間，上面有一個雜質(zhì)點，下面也有一個雜質(zhì)點，根據(jù)爬板高度選用石油醚：乙酸乙酯 =80:1 沖洗，沖了一段時間雜質(zhì)點出現(xiàn)，隨后又按此比例沖洗直至雜質(zhì)點消失，消失后增加極性至 70:1,發(fā)現(xiàn)沒有產(chǎn)物點出現(xiàn)，再加大極性至 50:1，沖洗一段時間，純凈的產(chǎn)物點出現(xiàn)，繼續(xù)按此比例沖洗直至產(chǎn)物點不再出現(xiàn)，收集具有產(chǎn) 15 物點的 溶液將其旋干，稱其產(chǎn)物質(zhì)量 ，取樣送核磁檢測。 第六步反應：將甲基氧化成醛 ONOD D QONM e O H , H 2 O 6 7 16 取兩升單口燒瓶，將第五步產(chǎn)物（ 6） 放入瓶 中，加入攪柈子，加入 DDQ（二氯二氰基苯醌） ，隨后加入甲醇 700ml，加入水 44ml，利用氮氣保護，開始反應，反應 5min 左右，點板確認反應已完全，將反應液旋干，用二氯甲烷溶解，然后過濾，收集濾液，用二氯甲烷（ 1500ml）和水（ 1000ml）萃取三次，將有機相用無水硫酸鈉干燥，旋干，稱取樣品質(zhì)量，加入 倍量硅膠，拌樣，留樣，選取小型柱子，裝硅膠，上樣，加石英砂，開始過柱，通過對樣品留樣點爬板觀察，發(fā)現(xiàn)硅膠板有三個點，第一個點為雜質(zhì)點，中間點為產(chǎn)物點，下面有一個雜質(zhì)點，選取石油醚：乙酸乙酯 =30:1 進行沖洗，有雜質(zhì)點出現(xiàn)，一直沖洗直至雜質(zhì)點消失，雜質(zhì)點消失后加大極性至石油醚：乙酸乙酯 =20:1沖洗，沒有產(chǎn)物點出現(xiàn)，繼續(xù)加大極性至 10:1，產(chǎn)物點出現(xiàn)，繼續(xù)按此比例沖洗直至產(chǎn)物點消失，收集純凈產(chǎn)物點溶液將其旋干，稱取質(zhì)量為 ，取樣送核磁檢測。 LCMS 檢測：取產(chǎn)品 5mg 左右于樣品瓶中，用甲醇溶解，采用 1080AB2min 和060AB2min檢測方法進行檢測。這次實驗探索路線失敗。優(yōu)點是官能團兼容性好，產(chǎn)率高，反應條件溫和，但 IBX 在放大生產(chǎn)時有安全隱患。從以上的觀察 ,我們可以得出結(jié)論 :兩者都是不合適的 DDQ 與溶劑對芳香胺氧化阻礙了。第二步反應產(chǎn)率比較低，可能由于油浴溫度不穩(wěn)定，反應時間沒有達到最佳，在過柱純化過程中有些許殘留和交叉。 LCMS 圖譜分析 21 圖 產(chǎn)物（ 5）的 液相色譜 質(zhì)譜 圖 Figure LCMS figure 0f the product (5) 此圖譜為第四步產(chǎn)物（ 5）的譜圖，可以看出產(chǎn)物的純度為 %。 25 圖 產(chǎn)物（ 3）的 核磁 圖 Figure NMR figure 0f the product (3) 對產(chǎn)物的核磁圖分析共有 22 個氫原子，與所要化合物的化學分子式相同，是期望產(chǎn)物。 29 圖 產(chǎn)物（ 7）的 核磁 圖 Figure NMR figure 0f the product (7) 對產(chǎn)物的核磁圖分析共有 13 個氫原子，與所要化合物的化學分子式相同，是期望產(chǎn)物。 33 參考文獻 [1] Jankovic , Joseph. Levodopa strengths and weaknesses[J] . Neurology , 2020 , 58 (Suppl 4) :S19. [2] 索愛琴 ,張杰文 . 帕金森病 (PD)治療進展 (1) [J].河南實用神經(jīng)疾病雜志 , 2020 ,3 (6) :83. [3] 蔡曉杰 ,李淑華等 .帕金森病的認知障礙及康復治療 [J].現(xiàn)代康復 ,2020,4(2):182183 [4] Jenner P , Olanow CW. Oxidative stress and the pathogenesis of Parkinson′s disease [J] . Neurology , 1996 , 47 : 161. [5] Jenner P. Pharmacology of dopamine agonists in the treatment of Parkinson′s disease[J] . Neurology , 2020 , 58 (4 , Supp. 1) : S1. [6] 王躍豐 , 屠樹滋 , 王秋娟 . 帕金森病治療藥物的研究進展 [J] .中國藥學雜志 ,1997 , 6 (6) : 417. [7] Contin M, Riva R , Albani F , et al . Pharmacokiic optimization of dopamine receptor agonist