【文章內(nèi)容簡介】 注明缺失樣品的原因，重復測試的結(jié)果。對舍棄任何分析數(shù)據(jù)和選擇所報告的數(shù)據(jù)說明理由。 其他相關(guān)信息 項目編號、分析方法編號、分析方法類型、分析方法確證進行簡化的理由、11 以及相應的項目計劃編號、標題等。 （二） 實驗設計與操作 1. 交叉設計 交叉設計是目前應用最多最廣的方法，因為多數(shù)藥物吸收和清除在個體之間均存在很大變異，個體間的變異系數(shù)遠遠大于個體內(nèi)變異系數(shù)，因此生物等效性研究一般要求按自身 交叉對照的方法設計。把受試對象隨機分為幾組，按一定順序處理，一組受試者先服用受試制劑，后服用參比制劑；另一組受試者先服用參比制劑，后服用受試制劑。兩順序間應有足夠長的間隔時間，為清洗期（ Washout Period）。這樣，對每位受試者都連續(xù)接受兩次或更多次的處理，相當于自身對照，可以將制劑因素對藥物吸收的影響與其他因素區(qū)分開來，減少了不同試驗周期和個體間差異對試驗結(jié)果的影響。 根據(jù)試驗制劑數(shù)量不同 一般 采用 22 交叉、 33 交叉 等 設計。如果是兩種制劑比較，雙處理、雙周期，兩序列的交叉設計是較好的選擇。如試 驗包括 3個制劑（受試制劑 2個和參比制劑 1個）時，宜采用 3制劑 3周期二重 33拉丁方試驗設計。各周期間也應有足夠的清洗期。 設定清洗期是為了消除兩制劑的互相干擾，避免上個周期內(nèi)的處理影響到隨后一周期的處理中。清洗期一般不應短于 7個消除半衰期。 但有些藥物或其活性代謝物半衰期很長時則難以按此方法設計實施，在此情況下可能需要考慮按平行組設計進行，但樣本量可能要增加。 而對于某些高變異性藥物（ Highly Variable Drug） ，根據(jù)具體情況， 除 采用增加例數(shù)的辦法 外， 可 采用重復交叉設 計 ,對同一受試者兩次接受同 一制劑時可能存在的個體內(nèi)差異進行測定 。 2. 受試者的選擇 12 受試者入選條件： 受試者的選擇應當盡量使個體間差異減到最小，以便能檢測出制劑間的差異。試驗方案中應明確入選和剔除條件。 一般情況應選擇男性健康受試者。特殊作用的藥品，則應根據(jù)具體情況選擇適當受試者。選擇健康女性受試者應 避免 懷孕 的 可能 性 。如待測藥物存在已知的不良反應，可能帶來安全性擔憂，也可考慮選擇患者作為受試者。 年齡 :一般 18～ 40周歲，同一批受試者年齡不宜相差 10 歲以上。 體重：正常受試者的體重一般不應低于 50kg。按體質(zhì)指數(shù) (Body Mass Index , BMI)＝體重（ kg）／身高 2（ m2）計算，一般應在標準體重范圍內(nèi)。同一批受試者體重（ kg）不宜懸殊過大，因為受試者服用的藥物劑量是相同的。 受試者應經(jīng)過全面體檢，身體健康，無心、肝、腎、消化道、神經(jīng)系統(tǒng)、精神異常及代謝異常等病史；體格檢查示血壓、心率、心電圖、呼吸狀況、肝、腎功能和血象無異常，避免藥物體內(nèi)過程受到疾病干擾。根據(jù)藥物類別和安全性情況，還應在試驗前、試驗期間、試驗后進行特殊項目檢查，如降糖藥應檢查血糖水平。 為避免其他藥物干擾，試驗前兩周內(nèi)及試驗期間禁服任何其 他 藥物。實驗期間禁煙、酒及含咖啡因的 飲料，或某些可能影響代謝的果汁 等 ，以免干擾藥物體內(nèi)代謝。受試者 應 無煙、酒嗜好。如有吸煙史，在討論結(jié)果時應考慮可能的影響。 如已知藥物存在遺傳多態(tài)性導致代謝差異，應考慮 受試者 由于慢代謝可能出現(xiàn)的安全性 等 問題。 受試者例數(shù) 受試者例數(shù)應當符合統(tǒng)計學要求，對于目前的統(tǒng)計方法 ,1824 例可滿足大13 多數(shù)藥物對樣本量的要求，但對某些變異性大的藥物可能需要適當增加例數(shù)。 一個臨床試驗的例數(shù)多少是由三個基本因素決定的：（ 1）顯著性水平：即α值的大小，通常取 5%；（ 2）把握度：即 1β值的大小， 一般定為不小于 80%，其中 β是犯第 Ⅱ 類錯誤的概率，也就是把實際有效誤判為無效的概率；（ 3）變異性（ CV%）和差別（ θ）：兩藥等效性檢驗中檢測指標的變異性和差別越大所需例數(shù)越多。在試驗前并不知道 θ和 CV%，只能根據(jù)已有的參比制劑的上述參數(shù)來估算或進行預試驗。另外，當一個生物利用度試驗完成后，可以根據(jù) θ、 CV%和把握度等參數(shù)來求 N值，并與試驗所選擇例數(shù)進行對比，檢驗試驗所采用例數(shù)是否合適。 受 試者分組 必須采用隨機方法分組，各組間應具有可比性。 3. 受試制劑和參比制劑 (Test Product and Reference Product ,T and R ) 參比制劑的質(zhì)量直接影響生物等效性試驗結(jié)果的可靠性，一般應選 擇國內(nèi)已經(jīng)批準上市相同劑型藥物中的原創(chuàng)藥。在無法獲得原創(chuàng)藥時， 可 考慮 選用上市主導產(chǎn)品作為參比制劑，但須提供相關(guān)質(zhì)量證明（如含量、溶出度等檢查結(jié)果）及選擇理由。若為完成特定研究目的，可選用相同藥物的其它藥劑學性質(zhì)相近的上市劑型作為參比制劑，這類參比制劑亦應該是已上市的且質(zhì)量合格的產(chǎn)品。 參比制劑和受試制劑含量差別不能超過 5%。 對于受試制劑，應為符合臨床應用質(zhì)量 標準的 中試 /生產(chǎn)規(guī)模的 產(chǎn)品。應提供該制劑的體外溶出度、穩(wěn)定性、含量或效價測定、批間一致性報告等，供試驗單位參考。個別藥物尚需提供多晶型及光學異構(gòu)體的資料。 參比制劑和受試制劑均應注明研制單位、批號、規(guī)格、保存條件、有效期。 試驗結(jié)束后受試制劑和參比制劑應保留足夠長時間直到產(chǎn)品批準上市以備14 查。 4. 給藥劑量 進行藥物制劑生物利用度和生物等效性研究時，給藥劑量一般應與臨床單次用藥劑量一致， 不得超過臨床推薦 的單次最大劑量 或已經(jīng)證明的安全劑量 。受試制劑和參比制劑一般應服用相等劑量，需要使用不相等劑量時，應說明理由并提供所用劑量范圍內(nèi)的線性藥代動力學特征依據(jù)，結(jié)果可以劑量校正方式計算生物利用度。 一般情況下普通制劑僅進行單劑量給藥研究即可 ,但在某些情況下可能需要考慮進行多次給藥研究，如：（ 1）受試藥 單次服用后原形藥或活性代謝物濃度很低，難以用相應分析方法精密測定血藥濃度時；（ 2）受試藥的生物利用度有較大個體差異；（ 3）藥物吸收程度相差不大，但吸收速度有較大差異；（ 4）緩控釋制劑。進行多次給藥研究應按臨床推薦的給藥方案給藥，至少連續(xù) 3次測定谷濃度確定血藥濃度達穩(wěn)態(tài)后選擇一個給藥間隔取樣進行測定，并據(jù)此計算生物利用度。 5. 取樣 取樣點的設計對保證試驗結(jié)果可靠性及藥代動力學參數(shù)計算的合理性，均有十分重要的意義。通常應有預試驗或參考國內(nèi)外的藥代文獻，為合理設計采樣點提供依據(jù)。應用血藥濃度測定法時，一般應兼顧到吸收相、平衡相 （峰濃度） 和消除相。在 藥物 濃度 — 時間曲線各時相及預計達峰時間前后應有足夠采樣點，使?jié)舛?— 時間 曲線能 全面反應藥物在體內(nèi)處置的全過程。服藥前應先取空白血樣。 一般 在吸收 相部分 取 23 個點 ， 峰濃度附近 至少需要 3 個點，消除相取 35個點 。 盡量避免第一個點即為 Cmax，預試驗將有助于避免這個問題。采樣持續(xù)到受試 藥原形或其活性 代謝 物 3～ 5 個半衰期時，或至血藥濃度為15 Cmax的 1／ 10～ 1／ 20,AUC0t/AUC0∞通常應當大于 80%。對于長半衰期藥物，應盡可能取樣持續(xù)到足夠比較 完整的 吸收過程，因為末端消除項對該類制劑吸收過程的評價影響不大。 多次給藥研究中，對于一些已知生物利用度受晝夜節(jié)律影響的藥物， 則應該連續(xù) 24小時取樣。 當受試藥不能用血藥濃度測定方法進行生物利用度檢測時，若該藥原形或活性代謝物主要由尿排泄 （大于給藥劑量的 70%） ，可以考慮尿藥法測定，以尿樣中藥物的累積排泄量來反映藥物攝入量。試驗藥品和試驗方案應當符合生物利用度測定要求。尿樣的收集采用分段收集法 ,其采集頻度、間隔時間應滿足估算受試藥 原形藥或活性代謝物經(jīng)尿的排泄程度。但該方法不能反映藥物吸收速度 ，誤差因素較多，一般不提倡采用。 某些 藥物在體內(nèi)迅速代謝無法測定生物樣品中原形藥物，也可采用測定生物樣品中 主要 代謝物濃度的方法，進行生物利用度和生物等效性試驗。 6. 藥代動力學參數(shù)計算 一般用非房室數(shù)學模型分析方法來估算藥代動力學參數(shù) 。 用房室模型方法估算藥代參數(shù)時，采用不 同的方法或軟件其值可能有較大差異。研究者可根據(jù)具體情況選擇使用， 但所用軟件必須 經(jīng)確證 并應在研究報告中注明所用軟件。在生物等效性研究中，其主要測量參數(shù) Cmax 和 Tmax 均以實測值表示。AUC0→t 以梯形法計算，故受數(shù)據(jù)處理程序影響不大。 7. 研究過程標準化 整個研究過程應當標準化，以使得 除制劑因素外，其他各種因素導致的體內(nèi)藥物釋放吸收差異減少到最小 ，包括 受試者的飲食 、 活動都應 控制。 試驗工作應在 I 期臨床試驗 觀察室 進行。受試者應得到醫(yī)護人員的監(jiān)護。受試期間發(fā)生的任何不良反應，均應及時處理和記錄，必要時停止試驗 。 16 （三） 數(shù)據(jù)處理及統(tǒng)計分析 1. 數(shù)據(jù)表達 BA 和 BE 研究必須提供所有受試者各個時間點 受試制劑 和參比 制劑 的藥物濃度測定數(shù)據(jù)、每一時間點的平均濃度（ Mean）及其標準差（ SD）和相對標準差（ RSD），提供每個受試者的 濃度 — 時間 曲線（ CT曲線） 和平均 CT曲線 以及 CT曲線各個時間點的標準差。 不能隨意剔除任何數(shù)據(jù)。 脫落者的數(shù)據(jù)一般不可用其他數(shù)據(jù)替代。 2. 藥代動力學參數(shù) 單次給藥的 BA 和 BE 研究，提供所有受試者服用 受試制劑 和參比 制劑 的 AUC0→t ， AUC0→∞ 、 Cmax、 Tmax、 t1/ CL、 Vd、 F等參數(shù)及其平均值和標準差。 Cmax和 Tmax均以實測值表示。 AUC0→t 以梯形法計算； AUC0→∞ 按公式計算： AUC0→∞ ＝ AUC0→t ＋ Ct/λz（ t 為最后一次可實測血藥濃度的采樣時間； Ct為末次可測定樣本藥物濃度； λz系對數(shù)濃度 時間曲線末端直線部份求得的末端消除速率常數(shù)，可用對數(shù)濃度 時間曲線末端直線部分的斜率求得； t1/2 用公式t1/2＝ ／ λz計算。 以各個受試者受試制劑（ T）和參比制劑（ R）的 AUC0→t 按下式分別計算其相對生物利用度（ F）值： 當受試制劑和參比制劑劑量 相同時： F＝ AUCT／ AUCR100％ 受試制劑和參比制劑劑量不同時，若受試藥物具備線性藥代動力學特征，可按下式以劑量予以校正： F＝【 AUCTD R／ AUCRD T】 100％（ AUCT、 AUCR分別為 T和 R的 AUC； DR、 DT分別為 T和 R的劑量） . 對于多次給藥的 BA 和 BE研究，提供 受試制劑 和參比 制劑 的三次谷濃度17 數(shù)據(jù)（ Cmin）， 達 穩(wěn)態(tài) 后 的 AUCss Cssmax、 Cssmin 、 T ssma