維生素與測(cè)定ppt課件-文庫(kù)吧資料
2025-05-18 13:00本頁(yè)面
【正文】 盛有 10g無(wú)水硫酸鈉的小漏斗，漏入球形瓶， 用少量石油醚分?jǐn)?shù)次洗凈分液漏斗和無(wú)水硫酸鈉層內(nèi)的色素，洗滌液并入球形瓶?jī)?nèi)。 （ 3）洗滌 提取液靜置分層，棄去下層水溶液； 反復(fù)用 5%硫酸鈉溶液振搖洗滌，直至下層水溶液清亮為止。 ?重復(fù)提取 2～ 3次，直至提取液無(wú)色為止。 蔬菜與其他植物性食物 ：取可食部用水沖洗三次后，用紗布吸去水滴，切碎，用勻漿器制成勻漿，貯于塑料瓶?jī)?nèi)，冰箱內(nèi)保存?zhèn)溆谩? 測(cè)定方法： 薄層色譜、紙色譜、 HPLC 國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)中采用紙色譜法進(jìn)行測(cè)定（ GB/T 12389— 1990） 1. 測(cè)定原理 以丙酮和石油醚提取食物中的胡蘿卜素及其他植物色素；以石油醚為展開(kāi)劑進(jìn)行紙層析，將胡蘿卜素與與其他色素分離；剪下含胡蘿卜素的區(qū)帶，洗脫后于450nm波長(zhǎng)下定量測(cè)定。 胡蘿卜素易溶于有機(jī)試劑，可用有機(jī)溶劑從食物中提取。如 α、 β、γ胡蘿卜素，其中 β胡蘿卜素效價(jià)最高， 每 mg β胡蘿卜素約相當(dāng)于 167ug維生素 A。 5 計(jì)算 式中： X2—— 某種維生素的含量， mg/100g； C—— 由標(biāo)準(zhǔn)曲線上查到某種維生素含量， μg/mL； V—— 樣品濃縮定容體積， mL； m—— 樣品質(zhì)量， g。 定量：根據(jù)色譜圖求出某種維生素峰面積與內(nèi)標(biāo)物峰面積的比值，以此值在標(biāo)準(zhǔn)曲線上查到其含量。 樣品分析 取樣品濃縮液 20μL，待繪制出色譜圖及色譜參數(shù)后，再進(jìn)行定性和定量。 以維生素峰面積與內(nèi)標(biāo)物峰面積之比為縱坐標(biāo)，維生素濃度為橫坐標(biāo)繪制維生素標(biāo)準(zhǔn)曲線，或計(jì)算直線回歸方程。 31 101001??????SEAX標(biāo)準(zhǔn) 加入標(biāo)準(zhǔn)的量 S,ul 比吸光系數(shù)， Ecm1% 波長(zhǎng)， λ,nm 視黃醇（ VA） 1835 325 γ生育酚 71 294 δ生育酚 298 α生育酚 298 （采用內(nèi)標(biāo)法） 把一定量的維生素 A、 γ－生育酚、 α－生育酚、 δ－生育酚及內(nèi)標(biāo)苯并 [e]芘液混合均勻。 標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備 維生素 A和維生素 E標(biāo)準(zhǔn)濃度的標(biāo)定方法 取維生素 A和各維生素 E標(biāo)準(zhǔn)液若干微升，分別稀釋至 ，并分別按給定波長(zhǎng)測(cè)定各維生素的吸光值。 進(jìn)樣量： 20μL。 紫外檢測(cè)器波長(zhǎng)： 300nm?；靹?。 分析柱： ultrasphere ODS 5μm， 25cm。并記下體積比。上清液供色譜分析。立即加入 ，充分混合，溶解提取物。 洗滌 用約 50mL水洗 分液漏斗中的乙醚層，用 pH試紙檢驗(yàn)直至水層不顯堿性 (最初水洗輕搖，逐次振搖強(qiáng)度可增加 )。如有殘?jiān)?，可將此液通過(guò)有少許脫脂棉的漏斗濾入分液漏斗。 提取 將皂化后的樣品移入分液漏斗中，用 50mL水分2～ 3次洗皂化瓶，洗液并入分液漏斗中。于沸水浴上回流30min使 皂化 完全。加 5mL 10%抗壞血酸 ， 苯并 [e]芘標(biāo)準(zhǔn) 液 ，混勻。 維生素 A標(biāo)準(zhǔn)溶液、維生素 E標(biāo)準(zhǔn)溶液 內(nèi)標(biāo)物溶液： 10μ g苯并 [e]芘 /mL 3 儀器和設(shè)備 高壓液相色譜儀帶紫外分光檢測(cè)器。 最小檢出量分別為 VA： ； α－ E： ； γ－ E： ； δ－ E： 。 4 結(jié)果計(jì)算 1000100??? VmCX（二） HPLC法（ GB/T 12388） 樣品中的維生素 A及維生素 E經(jīng)皂化提取處理后，將其從不可皂化部分提取至有機(jī)溶劑中。 另一比色管中加入 1mL三氯甲烷，其余比色管中分別加入 1mL樣品溶液及 1滴乙酸酐。 以吸光度為縱坐標(biāo)，以維生素 A含量為橫坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線圖。 于 620nm波長(zhǎng)處，以三氯甲烷調(diào)節(jié)吸光度至零點(diǎn)，將其標(biāo)準(zhǔn)比色系列按順序移入光路前，迅速加入 9mL三氯化銻－三氯甲烷溶液。 標(biāo)準(zhǔn)曲線制備 準(zhǔn)確取一定量的維生素 A標(biāo)準(zhǔn)液于 4～ 5個(gè)容量瓶中，以三氯甲烷配制標(biāo)準(zhǔn)系列。裝乙醚的試劑瓶也應(yīng)事先放入冷水浴中 ) ?濃縮： 取澄清提取乙醚液 2～ 5mL，放入比色管中，在70～ 80℃ 水浴上抽氣蒸干。緊壓蓋子，用力振搖 2min，使樣品中維生素 A溶于
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