第十章蛋白質(zhì)和氨基酸的測(cè)定第一節(jié)概述-文庫(kù)吧資料
2024-10-19 11:38本頁(yè)面
【正文】 CO） 對(duì)紫外光有吸收作用在 280 nm下，吸光度與蛋白質(zhì)濃度成直線關(guān)系，求含量。 本法亦適用于豆類 、 油料 、 米谷等作物種子及肉類等樣品測(cè)定 。 （ 560nm） NH2— CO— NH— CO— NH2 + NH3 NH2— CO— NH2 + NH2— CO— NH2 注：測(cè)蛋白質(zhì)時(shí)叫雙縮脲法，并不另加雙縮脲。 （ 縮二脲反應(yīng) ） 蛋白質(zhì)分子中含有肽鍵 — CO— NH— 與雙縮脲結(jié)構(gòu)相似 。 1. 原理 脲 （ 尿素 ） NH2— CO— NH2 加熱至 150~160℃ 時(shí) ，兩分子縮和成雙縮脲 。 北京福德泰和科技有限公司 產(chǎn)品名稱： 凱氏定氮儀 二、雙縮脲法 傳統(tǒng)的凱氏定氮法應(yīng)用范圍廣 ， 靈敏度高 、 準(zhǔn)確 ， 不要大儀器 ， 但費(fèi)時(shí)間 ， 有環(huán)境污染 。 （ 3）自動(dòng)：自動(dòng)加堿蒸餾，自動(dòng)吸收和滴定，自動(dòng)數(shù)字顯示裝置。 102 102 三、 自動(dòng)凱氏定氮法 原理及適用范圍同前 特點(diǎn)： （ 1）消化裝置用優(yōu)質(zhì)玻璃制成的凱氏消化瓶，紅外線加熱的消化爐。 二、 微量凱氏定氮法 原理及適用范圍同前 與常量法不同點(diǎn)： 加入硼酸量 有 50 ml 10 ml, 滴定用鹽酸濃度由 mol/L mol/L , 可用微量滴定管。 氫氧化銅在 70～ 90℃ 時(shí)發(fā)黑。 ⑧ 蒸餾裝置不能漏氣。 ⑦ — 般消化至呈透明后，繼續(xù)消化 30分鐘即可，但對(duì)于含有特別難以氨化的氮化合物的樣品．如含賴氨酸、組氨酸、色氨酸、酪氨酸或脯氨酸等時(shí)，需適當(dāng)延長(zhǎng)消化時(shí)間。 ⑤ 當(dāng)樣品消化液不易澄清透明時(shí)，可將凱氏燒瓶冷卻，加入 30％過(guò)氧化氫 2— 3 m1 后再繼續(xù)加熱消化 。 ③ 消化時(shí)應(yīng)注意不時(shí)轉(zhuǎn)動(dòng)凱氏燒瓶，以便利用冷凝酸液將附在瓶壁上的固體殘?jiān)聪拢⒋龠M(jìn)其消化完全。 ? 說(shuō)明： ① 所用試劑溶液應(yīng)用無(wú)氨蒸餾水配制 。 方法 溶解 g HgI2 + KI 10 g于適量少許水，后加水稀釋至 50 ml,靜置后，取其澄清液，棄去沉淀，儲(chǔ)存于棕色瓶中。 配制 方法 g KI + g HgCl2 溶于 70 毫升水 。 指示劑 紅色 綠色 紅色 （酸） （堿） （酸） 2 用過(guò)量的 H2SO4 或 HCl 標(biāo)準(zhǔn)溶液吸收，再用 NaOH 標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定過(guò)剩的酸液，用甲基紅指示劑。 另外：介紹“自動(dòng)回流消化儀” 2. 蒸餾 消化液 + 40%氫氧化鈉加熱蒸餾，放出氨氣。 3 加氧化劑 如雙氧水、次氯酸鉀等加速有機(jī) 物氧化速度。還可以作消化終點(diǎn)指示劑（做蒸餾時(shí)堿性指示劑）。也可加入硫酸鈉，氯化鉀等提 高沸點(diǎn)，但效果不如硫酸鉀。 ② 也可以用過(guò)量的標(biāo)準(zhǔn) H2SO4或標(biāo)準(zhǔn) HCl溶
教學(xué)課件相關(guān)推薦
鄂ICP備17016276號(hào)-1