【正文】 閉液、陰性陽(yáng)性對(duì)照、樣品稀釋液、洗滌液、酶結(jié)合物或酶稀釋液、底物或底物緩沖液、終止液等，對(duì)定量檢測(cè)試劑，還包括標(biāo)準(zhǔn)品（或校準(zhǔn)品）溶液。 企業(yè)質(zhì)控品的基質(zhì)應(yīng)與診斷試劑的待測(cè)樣品的基質(zhì)基本一致，如待測(cè)樣品為血清 /血漿，質(zhì)控品基質(zhì)也應(yīng)為血清 /血漿。 — 6— 企業(yè)質(zhì)控品一般包括陰 /陽(yáng)性參考品的符合率、靈敏度（最低檢出量）、精密性、鉤狀效應(yīng)（ hook效應(yīng)）等質(zhì)控樣品，對(duì)于定量檢測(cè)試劑，還包括線性質(zhì)控品樣品。 （ 2）液體試劑裝量瓶 包括陰陽(yáng)性對(duì)照、樣品稀釋液、洗滌液、酶結(jié)合物或酶稀釋液、底物或底物緩沖液等液體組分，均應(yīng)有相應(yīng)的裝量瓶，并建立相應(yīng)的質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)，如不同的液體試劑所用的裝量瓶規(guī)格、裝量瓶的顏色、瓶蓋的顏色等。 一般用一定 濃度的正常人免疫球蛋白 G(IgG)包被板條，再用一定濃度的抗人 IgG 酶結(jié)合物吸附，通過(guò)顯色反應(yīng)，使用酶標(biāo)儀讀數(shù)，計(jì)算 CV 值。 （ 1）酶標(biāo)板①外觀 明亮處用肉眼觀察板條的外觀質(zhì)量，如有欠注、飛邊、骯臟、表面光潔度差，底部有波紋及劃傷等應(yīng)剔除。 主要化學(xué)原材料的供應(yīng)商要求相對(duì)固定，不得隨意發(fā)生變更。 生物輔料的供應(yīng)商同樣要求相對(duì)固定，不得隨意變更供應(yīng)商。（ 4）標(biāo)記用酶 應(yīng)在產(chǎn)品的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中明示所使用的標(biāo)記用酶的名稱（如辣根過(guò)氧化物酶、堿性磷酸酶等），同時(shí)應(yīng)根據(jù)不同生產(chǎn)廠家的檢驗(yàn)方法和質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行檢驗(yàn)，酶的純度 RZ 值（ OD403nm/OD280nm）應(yīng)大于 。 BSA 的凈含量：總蛋白含量乘總蛋白中的 BSA 含量，其標(biāo)準(zhǔn)為≥90%。 總蛋白含量：用雙縮脲法，其標(biāo)準(zhǔn)為≥ 95％。 （ 2）牛血清白蛋白： 外觀：應(yīng)為淺黃色、黃色或乳白色的凍干粉末，無(wú)吸潮，無(wú)結(jié)塊，無(wú)肉眼可見的其它雜質(zhì)顆粒。 總蛋白含量：用雙縮脲法測(cè)定，蛋白含量≥ 32mg/ml。建議作以下檢驗(yàn)： （ 1）牛血清或羊血清 外觀：為淺黃色澄清稍粘稠的液體，無(wú)溶血或異物。 生物輔料一般指在生產(chǎn)過(guò)程中作為蛋白保護(hù)劑用途的一類生物原料，主要包括小牛血清、山羊血清、牛血清白蛋白和酪蛋白等。效價(jià)應(yīng)達(dá)到規(guī)定的要求。 （ 3）蛋白濃度 蛋白濃度可通過(guò) Lowry 法、 280nm 光吸收法、雙縮脲法或其他適宜的方法進(jìn)行檢測(cè)。根據(jù)所檢測(cè)生物原料的分子量選擇適宜聚丙烯酰胺凝膠濃度進(jìn)行電泳，一般每個(gè)電泳道加樣量為 5μ g，電泳后的凝膠可用考馬斯亮藍(lán)染色或銀染法染色。 主要生物原料的常規(guī)檢驗(yàn)項(xiàng)目一般包括：（ 1）外觀 肉眼觀察，大部分生物原料為澄清均一的液體，不含異物、渾濁或搖不散的沉淀或顆粒；或者為白色粉末，不含其他顏色的雜質(zhì)；特殊生 — 3— 物原料應(yīng)具備相應(yīng)外觀標(biāo)準(zhǔn)。 使用前應(yīng)按照工藝要求對(duì)這類生物原料進(jìn)行質(zhì)量檢驗(yàn)，以保證其達(dá)到規(guī)定的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。 （二）原材料質(zhì)量控制 與產(chǎn)品質(zhì)量最密切相關(guān)的生物原料主要包括各種天然抗原、重組抗原、單克隆抗體、多克隆抗體以及多肽類、激素類等生物原科。 、生產(chǎn)過(guò)程中所用的各種材料及工藝，應(yīng)充分考慮可能涉及的安全性方面的事宜。企業(yè)應(yīng)對(duì)試劑的使用范圍做出明確規(guī)定，并經(jīng)國(guó)家藥品監(jiān)督管理部門批準(zhǔn)。 三、基本要求 （一）基本原則 、生產(chǎn)用的各種原料、輔料等應(yīng)制定其相應(yīng)的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，并應(yīng)符合有關(guān)法規(guī)的要求。 二、適用范圍 本指導(dǎo)原則適用于有關(guān)病原微生物檢測(cè)的第三類體外診斷試劑的注冊(cè)技術(shù)審查。應(yīng)在遵循相關(guān)法規(guī)的前提下使用本指導(dǎo)原則。 本指導(dǎo)原則系對(duì)酶聯(lián)免疫法檢測(cè)試劑的一般要求，申請(qǐng)人應(yīng)依據(jù)產(chǎn)品特性確定其中的具體內(nèi)容是否適用，若不適用，需詳細(xì)闡述其理由及相應(yīng)的科學(xué)依據(jù)。ApprovedGuideline， SecondEdition2021， CLSI/NCCLSEP9A2 五、編制單位天津市醫(yī)療器械技術(shù)審評(píng)中心。 四、參考文獻(xiàn)（一）馮仁豐，《臨床檢驗(yàn)質(zhì)量管理技術(shù)基礎(chǔ)》，第二版，上?？茖W(xué)技術(shù)文獻(xiàn)出版社， 2021 年 4 月（二）尚紅，王毓三，申子瑜 .《全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》，第四版，人民衛(wèi)生出版社， 2021年 3 月第 1 版（三）HowtoDefineandDetermineReferenceIntervalsintheClinicalLaboratory。 （六）說(shuō)明書中預(yù)期用途、儲(chǔ)存條件及有效期、檢驗(yàn)方法、參考區(qū)間、產(chǎn)品性能指標(biāo)等描述應(yīng)分別與臨床研究資料、穩(wěn)定性研究資料、參考區(qū)間研究資料、分析性能評(píng)估資料的研究結(jié)論相一致。臨床試驗(yàn)采用的樣本類型及病例是否滿足試劑（盒）聲稱的預(yù)期用途，樣本量及臨床研究單位的選擇、統(tǒng)計(jì)方法及研究結(jié)果、臨床方案及報(bào)告撰寫的格式等是否符合《體外診斷試劑臨床試驗(yàn)技術(shù)指導(dǎo)原則》（國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理總局通告 2021年第 16 號(hào)）對(duì)相關(guān)內(nèi)容的規(guī)定。 （三）試劑（盒）的穩(wěn)定性研究方法是否合理，穩(wěn)定性結(jié)論是否和說(shuō)明書聲稱一致。 三、審查關(guān)注點(diǎn)（一）技術(shù)要求中性能指標(biāo)的設(shè)定及檢驗(yàn)方法是否符合相關(guān)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)的要求； 技術(shù)要求的格式是否符合《醫(yī)療器械產(chǎn)品技術(shù)要求編寫指導(dǎo)原則》（國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理總局通告 2021 年第 9號(hào)）的相關(guān)規(guī)定。 。 有關(guān)人源組分（如有）的警告，如：試劑內(nèi)質(zhì)控品或其他可能含有人源物質(zhì)的組分，雖已經(jīng)通過(guò)了 HBsAg、 HIV1/2Ab、 HCVAb 等項(xiàng)目的檢測(cè)，但截至目前，沒(méi)有任何一項(xiàng)檢測(cè)可以確保絕對(duì)安全，故仍應(yīng)將這些組分作為潛在傳染源對(duì)待。 、樣本保存及處理等其他注意事項(xiàng)。 13.【產(chǎn)品 性能指標(biāo)】詳述以下性能指標(biāo)： 至少應(yīng)包括：檢出限、線性、準(zhǔn)確度、精密度（批內(nèi)精密度、批間精密度）、特異性。明確干擾物對(duì)測(cè)定的影響，同時(shí)列出干擾物的具體濃度，不應(yīng)使用模糊的描述方式。 12.【檢驗(yàn)方法局限性】至少應(yīng)包括以下內(nèi)容： 本試劑的檢測(cè)結(jié)果僅供參考，不能單獨(dú)作為確診或排除病例的依據(jù)，對(duì)患者的臨床管理應(yīng)結(jié)合其癥狀 /體征、病史、其他實(shí)驗(yàn)室檢查及治療反應(yīng)等情況綜合考慮。 明確有可能存在引起樣本濃度升高及降低因素，并說(shuō)明在何種條件下需要進(jìn)行確認(rèn)試驗(yàn)，以及在確認(rèn)試驗(yàn)時(shí)，對(duì)待測(cè)樣本可能采取的優(yōu)化條件等進(jìn)行詳述。建議注明“由于地理、人種、性別和年齡等差異，建議各實(shí)驗(yàn)室建立自己的參考區(qū)間”。 結(jié)果計(jì)算：對(duì)于手工 /半自動(dòng)儀器，說(shuō)明校準(zhǔn)曲 線擬合方式及結(jié)果計(jì)算方法。對(duì)需專用儀器的產(chǎn)品，應(yīng)注明推薦的儀器校準(zhǔn)周期。 明確樣本檢測(cè)的操作步驟。 試劑使用方法、注意事項(xiàng)，試劑開封后注意事項(xiàng)等。冷藏 /冷凍樣本檢測(cè)前是否須恢復(fù)室溫，凍融次數(shù)的要求。 樣本采集：采集時(shí)間點(diǎn)是否受臨床癥狀、用藥情況等因素的影響，盡量減少由于樣本采集或處理不當(dāng)對(duì)實(shí)驗(yàn)造成的影響。 如適用儀器為非通用的儀器則需寫明具體適用儀器的型號(hào)，不能泛指某一 系列儀器，并且與分析性能評(píng)估資料一致。 注：保存條件不應(yīng)有模糊表述，如“常溫”、“室溫”。包括環(huán)境溫濕度、避光條件等。 對(duì)于產(chǎn)品中不包含，但對(duì)該試驗(yàn)必需的試劑組分，說(shuō)明書中應(yīng)列出此類試劑的名稱、純度，提供稀釋或混合方法及其他相關(guān)信息。 應(yīng)明確說(shuō)明質(zhì)控品的生物學(xué)來(lái)源、活性及其他特性，應(yīng)明確靶值范圍（如靶值范圍為批特異，可注明批特異，并附單獨(dú)的靶值單）。 建議對(duì)所包被抗體的相關(guān)信息進(jìn)行簡(jiǎn)單介紹。 與預(yù)期用途相關(guān)的臨床適應(yīng)癥背景情況，說(shuō)明相關(guān)的臨床或?qū)嶒?yàn)室診斷方法等。 2.【包裝規(guī)格】如不同包裝規(guī)格有與之特定對(duì)應(yīng)的機(jī)型，應(yīng)同時(shí)明確適用機(jī)型 3.【預(yù)期用途】 試劑盒用于定量檢測(cè)人樣本中的促卵泡生成素。 1.【產(chǎn)品名稱】 （盒）名稱由三部分組成：被測(cè)物名稱、用途、方法或原理。 以下內(nèi)容僅對(duì)促卵泡生成素檢測(cè)試劑說(shuō)明書的重點(diǎn)內(nèi)容進(jìn)行詳細(xì)說(shuō)明，說(shuō)明書其他內(nèi)容應(yīng)根據(jù)《體外診斷試劑說(shuō)明書編寫指導(dǎo)原則》要求進(jìn)行編寫。產(chǎn) 品說(shuō)明書的格式應(yīng)符合《醫(yī)療器械說(shuō)明書和標(biāo)簽管理規(guī)定》（國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理總局通告 2021年第 6號(hào)）、《體外診斷試劑說(shuō)明書編寫指導(dǎo)原則》（國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理總局通告 2021年第 17 號(hào)）的要求。 （十一）產(chǎn)品說(shuō)明書說(shuō)明書承載了產(chǎn)品預(yù)期用途、檢驗(yàn)原理、檢驗(yàn)方法、檢驗(yàn)結(jié)果解釋以及注意事項(xiàng)等重要信息，是指導(dǎo)實(shí)驗(yàn)室工作人員正確操作、臨床醫(yī)生針對(duì)檢驗(yàn)結(jié)果給出合理醫(yī)學(xué)解釋的重要依據(jù)。應(yīng)采用國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)行注冊(cè)檢驗(yàn)。技術(shù)要求應(yīng)不低于現(xiàn)行的國(guó)家 /行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)的相關(guān)要求。 （九）產(chǎn)品技術(shù)要求產(chǎn)品技術(shù)要求應(yīng)符合《體外診斷試劑注冊(cè)管理辦法》（國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理總局局令第 5 號(hào)）和《國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理總局關(guān)于發(fā)布醫(yī)療器械產(chǎn)品技術(shù)要 求編寫指導(dǎo)原則的通告》（國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理總局通告 2021 年第 9號(hào)）的相關(guān)規(guī)定。 體結(jié)果進(jìn)行總結(jié)性描述并簡(jiǎn)要分析試驗(yàn)結(jié)果，對(duì)本次臨床試驗(yàn)有無(wú)特別說(shuō)明，最后得出臨床試驗(yàn)結(jié)論。如無(wú)需復(fù)核，應(yīng)詳細(xì)說(shuō)明理由。 結(jié)合臨床試驗(yàn)數(shù)據(jù)的正 /偏態(tài)分布情況，建議統(tǒng)計(jì)學(xué)負(fù)責(zé)人選擇合理的統(tǒng)計(jì)學(xué)方法進(jìn)行分析，統(tǒng)計(jì)分析應(yīng)可以證明兩種方法的檢測(cè)結(jié)果是否存在明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。對(duì)于例外情況，如客觀上不可能獲得受試者的知情同意或該臨床試驗(yàn)對(duì)受試者幾乎沒(méi)有風(fēng)險(xiǎn)，可經(jīng)倫理委員會(huì)審查和批準(zhǔn)后免于受試者的知情同意。 ，必須獲得臨床試驗(yàn)機(jī)構(gòu)倫理委員會(huì)的同意。如無(wú)法避免使用貯存樣品時(shí)，注明貯存條件及時(shí)間，在數(shù)據(jù)分析 時(shí)應(yīng)考慮其影響。建議在臨床試驗(yàn)中選擇部分易產(chǎn)生交叉反應(yīng)的樣本，如早孕、甲減等相關(guān)疾病的樣本，以從臨床角度驗(yàn)證試劑的特異性。 應(yīng)明確臨床樣本的采集要求。 樣本濃度應(yīng)覆蓋考核試劑檢測(cè)范圍，盡可能均勻分布。建議參考《體外診斷試劑臨床試驗(yàn)技術(shù)指導(dǎo)原則》中增加樣本類型的變更要求。 對(duì)于不具有可比性的樣本類型，每種樣本類型臨床試驗(yàn)的總樣本數(shù)至少為 200 例。各臨床試驗(yàn)機(jī)構(gòu)選用的對(duì)比試劑應(yīng)一致，對(duì)比試劑的適用機(jī)型應(yīng)評(píng)估一致性后選用，以便進(jìn)行合理的統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。在試驗(yàn)操作過(guò)程中和判定試驗(yàn)結(jié)果時(shí)應(yīng)采用盲法及樣本隨機(jī)分配以保證試驗(yàn)結(jié)果的客觀性。整個(gè)試驗(yàn)過(guò)程應(yīng)在 臨床試驗(yàn)機(jī)構(gòu)的實(shí)驗(yàn)室內(nèi)并由本實(shí)驗(yàn)室的技術(shù)人員操作完成，申報(bào)單位的技術(shù)人員除進(jìn)行必要的技術(shù)指導(dǎo)外，不得隨意干涉實(shí)驗(yàn)進(jìn)程，尤其是數(shù)據(jù)收集過(guò)程。 ，研究人員應(yīng)從流行病學(xué)、統(tǒng)計(jì)學(xué)、臨床醫(yī)學(xué)、檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)等多方面考慮，設(shè)計(jì)科學(xué)合理的臨床研究方案。 臨床試驗(yàn)機(jī)構(gòu)應(yīng)有能力提供臨床試驗(yàn)所需的各類樣本，實(shí)驗(yàn)操作人員有足夠的時(shí)間熟悉檢測(cè)系統(tǒng)的各環(huán)節(jié)（儀器、試劑、質(zhì)控及操作程序等），熟悉評(píng)價(jià)方案。如方法學(xué)不同，則應(yīng)首選方法學(xué)性能較高的對(duì)比試劑進(jìn)行臨床試驗(yàn)。 、臨床普遍認(rèn)為質(zhì)量較好的同類產(chǎn)品作為參比試劑，采用擬申報(bào)產(chǎn)品（以下稱考核試劑）與之進(jìn)行同步盲法對(duì)比試驗(yàn)，證明本品與已上市產(chǎn)品等效或優(yōu)于已上市產(chǎn)品。 對(duì)于進(jìn)行臨床試驗(yàn)的產(chǎn)品，臨床試驗(yàn)總體要求及臨床試驗(yàn)資料的內(nèi)容應(yīng)符合《體外診斷試劑注冊(cè)管理辦法》、《關(guān)于公布體外診斷試劑注冊(cè)申報(bào)資料要求和批準(zhǔn)證明文件格式的公告》（國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理總局公告 2021 年第 44 號(hào)）和《體外診斷試劑臨床試驗(yàn)技術(shù)指導(dǎo)原則》（國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理總局通告 2021 年第 16 號(hào)）臨床研究資料有關(guān)的規(guī)定。申 請(qǐng)人如無(wú)法或不適于按照上述要求對(duì)產(chǎn)品進(jìn)行臨床評(píng)價(jià)，則應(yīng)按照《體外診斷試劑臨床試驗(yàn)技術(shù)指導(dǎo)原則》的要求開展臨床試驗(yàn)。 試劑穩(wěn)定性和樣本穩(wěn)定性兩部分內(nèi)容的研究結(jié)果均應(yīng)在說(shuō)明書【儲(chǔ)存條件及有效期】和【樣本要求】?jī)身?xiàng)中進(jìn)行詳細(xì)說(shuō)明。 后者主要包括冷藏和冷凍條件下的有效性驗(yàn)證，可以在合理的溫度范圍內(nèi)選擇溫度 點(diǎn)（溫度范圍），每間隔一定的時(shí)間段即對(duì)儲(chǔ)存樣本進(jìn)行穩(wěn)定性驗(yàn)證，從而確認(rèn)不同類型樣本的保存穩(wěn)定性。對(duì)于實(shí)時(shí)穩(wěn)定性研究，應(yīng)提供至少 3 批樣品在實(shí)際儲(chǔ)存條件下保存至成品有效期后的研究資料。 前者主要包括長(zhǎng)期穩(wěn)定性、運(yùn)輸穩(wěn)定性、開瓶穩(wěn)定性等研究，如組分為凍干粉，應(yīng)有復(fù)溶穩(wěn)定性研究，申請(qǐng)人可根據(jù)實(shí)際需要選擇合理的穩(wěn)定性研究方案。建議參考國(guó)際或國(guó)內(nèi)有關(guān)體外診斷產(chǎn)品參考區(qū)間確定的文件。 （五）參考區(qū)間確定資料應(yīng)提交參考區(qū)間建立或驗(yàn)證時(shí)所采用樣本來(lái)源及詳細(xì)的試驗(yàn)資料。 不具有可比性的樣本類型（血液、尿液）應(yīng)分別進(jìn)行分析性能評(píng)估。 對(duì)于適用多個(gè)機(jī)型的產(chǎn)品，應(yīng)提供在所有適用型號(hào)儀器上進(jìn)行的性能驗(yàn)證資料。凍干型校準(zhǔn)品和質(zhì)控品還應(yīng)檢測(cè)批內(nèi)瓶間差。同時(shí)，應(yīng)對(duì)校準(zhǔn)品、質(zhì)控品的瓶?jī)?nèi)均勻性、瓶間均勻性（凍干品適用），以及其賦值結(jié)果的準(zhǔn)確度進(jìn)行評(píng)價(jià)。建議采用高濃度的促卵泡生成素樣本進(jìn)行梯度稀釋后由低濃度至高濃度開始檢測(cè)，每個(gè)梯度的抗原樣本重復(fù) 3— 5份，將響應(yīng)值隨濃度升高反而變小時(shí)的濃度作為出現(xiàn)鉤狀效應(yīng)時(shí)促卵泡生成 素抗原的最低濃度，建議產(chǎn)品說(shuō)明書上明示出現(xiàn)鉤狀效應(yīng)時(shí)促卵泡生成素的最低濃度，或濃度達(dá)到一定數(shù)值時(shí)未發(fā)生鉤狀效應(yīng)。 試劑組成成分的干擾（如適用）應(yīng)考慮防腐劑對(duì)檢測(cè)結(jié)果的干擾，如氟化鈉、