【正文】 人完成不少于 X次的完整檢測，從而對批內(nèi) /批間、日內(nèi) /日間以及不同操作者之間的精密度進(jìn)行綜合評價。應(yīng)對每項精密度指標(biāo)的評價標(biāo)準(zhǔn)做出合理要求，如標(biāo)準(zhǔn)差或變異系數(shù)的范圍等。詳細(xì)描述評價方法中樣本制備過程、評價方案、試驗過程、試驗數(shù)據(jù)、統(tǒng)計方法、研究結(jié)論等內(nèi)容?；厥章实慕Y(jié)果應(yīng)在可接受范圍內(nèi)。 正確度建議采用回收實驗方法進(jìn)行正確度的評價， 同時可結(jié)合其他合理方法（如方法學(xué)比對等）進(jìn)行研究。應(yīng)結(jié)合性能指標(biāo)和臨床意義，設(shè)定合理的線性范圍。 的模擬干血斑，分析至少 911 個濃度水平，每個水平重復(fù)多次，通過評價一定范圍內(nèi)的線性關(guān)系及準(zhǔn)確度等建立所有待測分析物的線性范圍。根據(jù)該類試劑的預(yù)期用途，每個待測分析物的檢測限應(yīng)等于或低于預(yù)期使用人群的內(nèi)源性水平。測量的結(jié)果符合試劑偏差及精密度等要求的最低濃度水平作為檢測限。例如，將不同濃度的內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)品添加至人全血中制備成一系列 干血斑，用空白萃取液萃取后進(jìn)行檢測； 或者用含不同濃度內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)品的萃取液對干血斑萃取后進(jìn)行檢測，等等。分析性能評估的實驗方法可以參考相關(guān)文件或國內(nèi)有關(guān)體外診斷產(chǎn)品性能評估的指導(dǎo)原則進(jìn)行。 （四）分析性能評估資料申請人應(yīng)提交對試劑盒的全部性能進(jìn)行評估的資料，對于每項分析性能的評價都應(yīng)包括研究目的、實驗 設(shè)計、研究方法、可接受標(biāo)準(zhǔn)、實驗數(shù)據(jù)、統(tǒng)計方法等詳細(xì)資料。 （包括各級工作液、萃取試劑、衍生化試劑、流動相等）的選擇、配比、用量的確定和驗證過程。應(yīng)標(biāo)明關(guān)鍵工藝質(zhì)控步驟，并詳細(xì)說明該步驟的質(zhì)控方法及質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)。 （三）主要生產(chǎn)工藝及反應(yīng)體系的研究資料主要生產(chǎn)工藝主要包括工作液的配制、分裝和包裝等，反應(yīng)體系研究指完成檢測所涉及到的最佳反應(yīng)條件的選擇確定過程。線性參考品應(yīng)選擇多個梯度濃度水平進(jìn)行設(shè)置并覆蓋整個線性范圍。 精密度參考品應(yīng)設(shè)置多個具有代表性意義的濃度水平，一般包括正常內(nèi)源性水平、醫(yī)學(xué)決定水平、異常值（異常高值 /異常低值）水平等，各待測分析物可根據(jù)臨床實際情況和指標(biāo)設(shè)置的 臨床意義，選擇不同的濃度水平設(shè)定參考品，并提交選擇設(shè)定的依據(jù)。 如需使用待測分析物 /內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)品的替代物質(zhì)制備參考品，應(yīng)提交相應(yīng)的評估資料。參考品中的待測分析物濃度應(yīng)為檢測限濃度，或略高于檢測限濃度。企業(yè)參考品應(yīng)盡量使用實際待測樣本即全血干血斑，如需采用向全血基質(zhì)中模擬添加被測物的形式制備干血斑（即模擬干血斑），則應(yīng)說明理由。應(yīng)提供質(zhì)控品的選擇、制備和賦值資料。應(yīng)至少設(shè)置高、低兩個濃度水平的質(zhì)控品。 ：質(zhì)控品為包含所有待測分析物的干血斑。應(yīng)提交內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)品的化學(xué)式、對應(yīng)的待測分析物、賦值資料以及質(zhì)量控制資料（一般包括分子量、化學(xué)純度、同位素純度等）。 、肉堿和琥珀酰丙酮內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)品：一般為經(jīng)過同位素標(biāo)記的待測分析物。 、樣品前處理方法、掃描模式及選擇依據(jù)、數(shù)據(jù)采集及處理方法等。 另外，建議申請人對以下幾方面內(nèi)容進(jìn)行著重介紹： 、臨床癥狀、 臨床發(fā)病率、檢測方法、治療方法等。其中，其他內(nèi)容包括同類產(chǎn)品在國內(nèi)外批準(zhǔn)上市的情況，應(yīng)著重從檢驗方法及臨床適用范圍等方面寫明擬申報產(chǎn)品與目前市場上已獲批準(zhǔn)的同類產(chǎn)品之間的主要區(qū)別。本指導(dǎo)原則不適用于對相關(guān)疾病的確證和產(chǎn)前篩查項目。 本指導(dǎo)原則主要適用于利用串聯(lián)質(zhì)譜法，對干血斑樣本中相關(guān)物質(zhì)進(jìn)行檢測的試劑，包括采用衍生法處理后對氨基酸和肉堿進(jìn)行檢測的試劑和采用非衍生法對氨基酸、琥珀酰丙酮和肉堿進(jìn)行檢測的試劑。四種掃描模式各有優(yōu)缺點，在實際中應(yīng)根據(jù)產(chǎn)品特性選擇適合的掃描模式。多反應(yīng)監(jiān)測掃描是將第一級質(zhì)譜設(shè)定為用于篩選特定的前體離子，在第二級質(zhì)譜中指定所需的產(chǎn)物離子，同時監(jiān)測前體離子 產(chǎn)物離子。前體離子掃描通常用于?；鈮A的分析檢測，在第二級質(zhì)量分析器中選擇特定質(zhì)荷比的產(chǎn)物離子，測定在第一級質(zhì)量分析器中一定質(zhì)量范圍內(nèi)所有能產(chǎn)生該碎片的前體離子。 該類試劑使用的串聯(lián)質(zhì)譜主要為三重四極桿串聯(lián)質(zhì)譜和四極桿離子阱串聯(lián)質(zhì)譜（ Qtrap）。 氨基酸、肉堿及琥珀酰丙酮檢測試劑（串聯(lián)質(zhì)譜法）的預(yù)期用途為利用串聯(lián)質(zhì)譜分析方法，對全血干血斑樣本中氨基酸、肉堿和琥珀酰丙酮的含量進(jìn)行測量，相關(guān)待測分析物濃度及分析物之間相互比例的異常，可能提示某種遺傳代謝病。我國相對常見的遺傳代謝病如下表所示： 表 1 我國相對常見的遺傳代謝病序號疾病名稱 1 高苯丙氨酸血癥（ HPA） 2 甲 基丙二酸血癥（ MMA） 3 原發(fā)性肉堿缺乏癥（ PCD） 4 中鏈?；o酶 A脫氫酶缺乏癥（ MCAD） 5極長鏈酰基輔酶 A脫氫酶缺乏癥（ VLCAD）6 異戊酸血癥（ IVA） 7 戊二酸血癥 I 型（ GAI） 8 楓糖尿?。?MSUD） 9瓜氨酸血癥 II 型 (希特林蛋白缺乏癥 )（ CITII） 10 瓜氨酸血癥 I 型（ CITⅠ） 11 丙酸血癥（ PA） 12 同型半胱氨酸血癥 I 型（ HCY）遺傳代謝病的臨床檢測方法一般包括實驗室生化檢測、影像學(xué)檢測、負(fù)荷試驗、酶學(xué)檢測、氣相色譜 質(zhì)譜（ GCMS）分析、串聯(lián)質(zhì)譜（ MSMS）分析、基因檢測等。 遺傳代謝病的發(fā)病機(jī)理為維持機(jī)體正常代謝所必需的酶類、受體和載體等蛋白質(zhì)缺陷，導(dǎo)致機(jī)體的生化反應(yīng)和代謝異常，從而引起一系列臨床表現(xiàn)。相關(guān) 的 遺 傳 代 謝 病 主 要 包 括 氨 基 酸 代 謝 障 礙（ Disordersofaminoacidmetabolism ）、 脂 肪 酸 氧 化 障 礙（ FattyAcidOxidationdisorders ） 和 有 機(jī) 酸 代 謝 障 礙（ Organicacademiadisorders）等。 本指導(dǎo)原則是在現(xiàn)行法規(guī)和標(biāo)準(zhǔn)體系以及當(dāng)前認(rèn)知水平下制定的，隨著法規(guī)和標(biāo)準(zhǔn)的不斷完善，以及科學(xué)技術(shù)的不斷發(fā)展，本指導(dǎo)原則相關(guān)內(nèi)容也將適時進(jìn)行調(diào)整。 本指導(dǎo)原則是供申請人和審查人員使用的指導(dǎo)性文件，不涉及注冊審批等行政事項，亦不作為法規(guī)強(qiáng)制執(zhí)行，如果有能夠滿足相關(guān)法規(guī)要求的其他方法，也可以采用，但應(yīng)提供詳細(xì)的研究資料和驗證資料。 第二篇：氨基酸、肉堿及琥珀酰丙酮檢測試劑注冊技術(shù)審查指導(dǎo)原則 附件 5 氨基酸、肉堿及琥珀酰丙酮檢測試劑注冊技術(shù)審查指導(dǎo)原則本指導(dǎo)原則旨在指導(dǎo)注冊申請人對氨基酸、肉堿及琥珀酰丙酮檢測試劑（串聯(lián)質(zhì)譜法）注冊申報資 料的準(zhǔn)備及撰寫，同時也為技術(shù)審評部門對注冊申報資料的技術(shù)審評提供參考。 四、參考文獻(xiàn) .《臨床遺傳代謝病》，人民衛(wèi)生出版社，.《中國藥典》（ 2021 年版），中國醫(yī)藥科技出版社 .3.《新生兒疾病 篩查技術(shù)規(guī)范》（ 2021 年版），（衛(wèi)婦社發(fā)〔 2021〕 96 號） ,2021 年12 月 1 日 .4.《新生兒疾病篩查管理辦法》（中華人民共和國衛(wèi)生部令第 64 號 ） ， 2021 年 3 月 5日 .,FreeCarnitine,andAcylcarnitinesUsingTandemMassSpectrometry ，GuidanceforIndustryandFDAStaff ， FDA ，； ,PA:ClinicalandLaboratoryStandardsInstitute。 ，將添加了其他物質(zhì)（例如待測物、干擾物質(zhì)等）的人全血（或模擬血液基質(zhì)）滴加至濾紙上，再經(jīng)過打孔處理的樣本。 相關(guān)操作人員應(yīng)經(jīng)過專業(yè)的培訓(xùn)，并嚴(yán)格按照說 明書的方法來進(jìn)行試驗。 12.【注意事項】應(yīng)至少包括以下內(nèi)容： 如該產(chǎn)品含有人源或動物源性物質(zhì)，應(yīng)給出具有潛在感染性的警告。各項評估應(yīng)包括評估方法、數(shù)據(jù)和結(jié)果。 。 。 樣本采集、運(yùn)輸及處理不當(dāng)、未按說明書操作等均有可能導(dǎo)致假陽性或 假陰性結(jié)果，例如：血液未均勻浸透血斑區(qū)域、濾紙干血片打孔時打得太靠近血斑的邊緣、樣品收集或樣品干燥有問題、由于樣品受熱受潮，不能洗脫血斑、血斑濾紙受排泄物污染等等。 本試劑盒適用于全血干血斑樣本檢測，不適用于其它樣本檢測。 10.【檢驗方法的局限性】 本試劑盒的檢測結(jié)果僅能初步提示某種遺傳代謝病，其結(jié)果僅供臨床參考，不能作為診斷。 9.【檢驗結(jié)果的解釋】應(yīng)對不 同的檢驗結(jié)果進(jìn)行解釋，并明確后續(xù)處理方法。 說明檢測時應(yīng)特別注意的事項，如對精密度的控制措施、溶液的保存條件、其他影響檢測的因素等。 上機(jī)檢測：儀器準(zhǔn)備、設(shè)置、儀器使用相關(guān)參數(shù)及結(jié)果處理。 內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)品溶液、各級工作液的配制方式。 上述內(nèi)容均需在穩(wěn)定性研究資料中詳述并進(jìn)行性能評估驗證。明確采樣前處理、消毒、采樣量、保存條件及期限（短期、長期）、運(yùn)送條件、凍融次數(shù)的限制等。 5.【適用儀器】明確所有適用儀器的具體型號，并提供與儀器有關(guān)的重要信息以指導(dǎo)用戶操作。 試劑盒中不包含但該項檢測必需的組分，說明書中應(yīng)列出相關(guān)試劑 /耗材的名稱、生產(chǎn)企業(yè)、貨號、注冊證號 /備案憑證編號（如有）及其他相關(guān)信息，質(zhì)控品的濾紙應(yīng)明確型號。 2.【檢驗原理】詳細(xì)說明該產(chǎn)品檢測各類分析物的前處理方式（衍生 /非衍生）、檢測原理及掃描模式（必要時可用圖示說明）。建議聲稱的遺傳代謝病應(yīng)盡量覆蓋我國相對常見的病種，可參考表 1 中所列的疾病。 介紹臨床適應(yīng)癥及背景，說明相關(guān)的臨床或?qū)嶒炇以\斷方法等。 1.【預(yù)期用途】 第一自然段：描述預(yù)期用途，包括適用人群，樣本類型，被測物等。產(chǎn)品說明書的所有內(nèi)容均 應(yīng)與申請人提交的注冊申報資料中的相關(guān)研究結(jié)果保持一致，若某些內(nèi)容引用自參考文獻(xiàn)，則應(yīng)以規(guī)范格式對此內(nèi)容進(jìn)行標(biāo)注，并單獨列明參考文獻(xiàn)的相關(guān)信息。應(yīng)提供連續(xù) 3 個生產(chǎn)批次樣品的檢驗合格報告。附錄中應(yīng)將內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)品、標(biāo)準(zhǔn)品、質(zhì)控品 的設(shè)計及來源，參考品設(shè)置，生產(chǎn)工藝流程及質(zhì)控關(guān)鍵點等重點內(nèi)容予以明確。申請人應(yīng)當(dāng)在原材料質(zhì)量和生產(chǎn)工藝穩(wěn)定的前提下 ,根據(jù)申請人產(chǎn)品研制、前期臨床評價等結(jié)果，依據(jù)國家標(biāo)準(zhǔn)、行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)及有關(guān)文獻(xiàn)，按照《醫(yī)療器械產(chǎn)品技術(shù)要求編寫指導(dǎo)原則》（原國家食品藥品監(jiān)督管理總局通告 2021 年第 9 號）的有關(guān)要求編寫。具體情況可參見《用于罕見病防治醫(yī)療器械注冊審查指導(dǎo)原則》的相關(guān)要求。 ，對本次臨床研究有無特別說明，最后得出臨床試驗結(jié)論。 應(yīng)明確樣本的納入與排除情況。亦可同時對二者的陰 /陽性符合率和總符合率進(jìn)行分析，對結(jié)果進(jìn)行χ 2 檢驗或kappa檢驗以檢驗 其定性結(jié)果的一致性。同時，應(yīng)根據(jù)臨床診斷結(jié)果，統(tǒng)計并明確每種疾病與待測分析物指標(biāo)之間的對應(yīng)關(guān)系。 統(tǒng)計學(xué)分析對臨床試驗數(shù)據(jù)的統(tǒng)計應(yīng)選擇合適的統(tǒng)計方法。 具體試驗過程，樣本檢測、數(shù)據(jù)收集、結(jié)果不一致樣本的校驗； 陽性病例后續(xù)操作方法、病例脫落情況，以及是否符合臨床試驗方案等。 各試驗機(jī)構(gòu)的病例數(shù)、陰性 /陽性檢出例數(shù)、檢出的遺傳代謝病情況等。 、統(tǒng)計軟件、評價統(tǒng)計結(jié)果的標(biāo)準(zhǔn)。 /排除的情況、盲法操作流程等。 點給予清晰、完整的闡述，應(yīng)該對整個臨床試驗實施過程、結(jié)果分析、結(jié)論等進(jìn)行條理分明的描述，并應(yīng)包 括必要的基礎(chǔ)數(shù)據(jù)和統(tǒng)計分析方法。 在試驗操作過程中和判定試驗結(jié)果時應(yīng)采用盲法，以保證試驗結(jié)果的客觀性，并在臨床試驗方案中明確。 試驗方案中應(yīng)確定合 理、嚴(yán)格的病例納入 /排除標(biāo)準(zhǔn)，任何已經(jīng)入選的病例再被排除出臨床試驗都應(yīng)記錄在案并明確說明原因。在整個臨床試驗過程中均應(yīng)遵循預(yù)定的方案，不可隨意改動。在產(chǎn)品說明書中應(yīng)根據(jù)臨床結(jié)果對檢出的遺傳代謝病和分析物指 標(biāo)異常情況進(jìn)行描述，其中采用回顧性病例進(jìn)行的研究應(yīng)另行說明。同時，臨床試驗檢測結(jié)果應(yīng)盡量覆蓋所有待測分析物指標(biāo)異常情況。 根據(jù)臨床發(fā)病率、臨床診治情況及其他因素綜合考慮，對于我國相對常見的遺傳代謝病如高苯丙氨酸血癥（ HPA）、甲基丙二酸血癥（ MMA）、原發(fā)性肉堿缺乏癥（ PCD）等 ,應(yīng)通過前瞻性臨床試驗檢出真陽性病例； 其他發(fā)病率相對更低的疾病也應(yīng)盡可能在前瞻性臨床試驗中檢出所聲稱疾病病例。 應(yīng)根據(jù)疾病發(fā)病率和性能要求等估算合理的樣本量，并在臨床試驗方案中明確樣本量確定的依據(jù)。所有樣本均應(yīng)可以溯源。試驗應(yīng)處于有效的質(zhì)量控制下，最大限度保證試驗數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性及可重復(fù)性。操作人員應(yīng)經(jīng)過相應(yīng)的培訓(xùn)，并能熟練操作實驗。臨床試驗機(jī)構(gòu)的選擇應(yīng)盡量考慮擬申報產(chǎn)品的特點和預(yù)期用途。 申請人還應(yīng)同時選擇已批準(zhǔn)上市、臨床普遍認(rèn)為質(zhì)量較好的 同類產(chǎn)品作為對比試劑，與考核試劑進(jìn)行一定例數(shù)的比較研究試驗，以評價考核試劑的臨床準(zhǔn)確性。 （七）臨床評價資料 主，以試驗用體外診斷試劑（以下稱考核試劑）與臨床診斷結(jié)果進(jìn)行比較研究的方法，評價考核試劑的臨床診斷性能相關(guān)指標(biāo)，從而證明其臨床性能滿足預(yù)期用途的要求。由于某些化合物在干血斑中不穩(wěn)定，應(yīng)對這些分析物的情況進(jìn)行研究，提供 其在干血斑中的儲存有效期數(shù)據(jù)。主要包括冷藏和冷凍條件下的儲存條件研究、有效期驗證、運(yùn)輸穩(wěn)定性驗證以及干血斑萃取后儲存條件的驗證等。對于實時穩(wěn)定性研究，應(yīng)提供至少三批樣品在實際儲存條件下保存至成品有效期后的研究資料。主要涉及兩部分內(nèi)容，申報產(chǎn)品的穩(wěn)定性和適用樣本的穩(wěn)定性研