氨基酸、多肽、蛋白質(zhì)(參考版)
2025-05-10 18:01本頁面
【正文】 加生物堿試劑 ? 有：苦味酸、三氯醋酸、鞣酸和磺柳酸等 ? 原理：這是由于蛋白質(zhì)在 pHpI的溶液中帶正電荷，可與這些有機(jī)酸根結(jié)合成不溶性的蛋白鹽而沉淀。 ? 常用的中性鹽：硫酸銨、氯化鈉等 ? 原理：破壞蛋白質(zhì)膠體周圍的水化膜 ? 中和了蛋白質(zhì)分子的電荷 ? 一般用鹽析沉淀出來的蛋白質(zhì)不變性。 沉淀蛋白質(zhì)的方法： ?鹽析 常用 (NH4)2SO Na2SO NaCl、 MgSO4等 ?有機(jī)溶劑 常用甲醇 、 乙醇 、 丙酮等親水性溶劑 ?重金屬鹽 常用 Ag+、 Cu2+、 Pb2+ 等 ?常用的酸 ： 苦味酸 、 鎢酸 、 三氯乙酸 、 磺基水楊酸等 上頁 下頁 首頁 鹽析法 （ salting out） ? 鹽析法 是指加鹽使蛋白質(zhì)沉淀析出現(xiàn)象的方法。 ?目前很多蛋白質(zhì)變性后尚不能復(fù)性，如機(jī)體衰老時(shí)的蛋白質(zhì)變性尚屬不可逆過程。 如溶解度降低 ， 易于沉淀等 。 ? 四級結(jié)構(gòu)不包括亞基內(nèi)部的空間結(jié)構(gòu) ? 亞基：一般多為偶數(shù) ? 為 2～ 10個時(shí)，是較小的蛋白質(zhì) ? 多的可達(dá)上千個 四、蛋白質(zhì)的理化性質(zhì) ?（一）蛋白質(zhì)的兩性電離和等電點(diǎn) ?（二）蛋白質(zhì)的膠體性質(zhì) ?（三）蛋白質(zhì)的變性 ?（四）蛋白質(zhì)的沉淀 ?（五）蛋白質(zhì)的顏色反應(yīng) （一）蛋白質(zhì)的兩性電離和等電點(diǎn) pH ＜ pI pH=pI pH＞ pI 陽離子 電中性 陰離子 P rC O O N H 2H +O H H +O H P r C O ON H 3 +P rC O O HN H 3 +（二）蛋白質(zhì)的膠體性質(zhì) ? 蛋白質(zhì)的分子量：有的可達(dá)數(shù)千萬 ? 水中形成的顆粒直徑： 1～ lOOnm ? 有膠體溶液的性質(zhì)，不能通過半透膜 ? 可用半透膜將蛋白質(zhì)與小分子物質(zhì)分離而得以純化 ? 這種方法稱為 透析法 ? 透析法 是實(shí)驗(yàn)或工業(yè)生產(chǎn)上提取和純化蛋白質(zhì)常用的方法 （三）蛋白質(zhì)的變性 ? 是指蛋白質(zhì) ? 在某些 物理或化學(xué) 因素的作用下 ? 其空間結(jié)構(gòu)遭到破壞 ? 致使 蛋白質(zhì)生物活性喪失 和 理化性質(zhì)改變 引起蛋白質(zhì)變性的因素 ?物理因素有：加熱 、 紫外線照射 、 超聲波和劇烈振搖等 ?化學(xué)因素有：強(qiáng)酸 、 強(qiáng)堿 、 有機(jī)溶劑 、 重金屬鹽等 變性蛋白質(zhì) (denatured protein) ?變性作用并不破壞蛋白質(zhì)的一級結(jié)構(gòu) ?變性蛋白質(zhì)的表現(xiàn)： ?首先是 失去生物活性 。 ? 每一個具有三級結(jié)構(gòu)的多肽鏈稱為 亞基 （ subunit）。 例如：酶 、 運(yùn)動蛋白 、 運(yùn)輸?shù)鞍?、 激素蛋白和防御蛋白等 結(jié)構(gòu)蛋白質(zhì) （ structural protein） 此類是指擔(dān)負(fù)保護(hù)或支持作用的蛋白質(zhì) 例如：角蛋白 、 彈性蛋白和膠原蛋白等 三、蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu) （一）蛋白質(zhì)的一級結(jié)構(gòu) （ primary structure） ? 蛋白質(zhì)的一級結(jié)構(gòu)是指 蛋白質(zhì)中氨基酸殘基之間的排列順序 ? 一級結(jié)構(gòu)是蛋白質(zhì)的 基本結(jié)構(gòu) ? 其主要化學(xué)鍵是 肽鍵 ， 又稱 主鍵 ? 例如 ， 胰島素 ? 一級結(jié)構(gòu)：由－條 A鏈 (21肽 )和一條 B鏈 (30肽 )通過二硫鍵連 接而成 ， 分子中共有三個二硫鍵 ? 作 用：降低體內(nèi)血糖含量 ? 用 途：在臨床上治療糖尿病 人民衛(wèi)生電子音像出版社 59 人胰島素分子的一級結(jié)構(gòu) 蛋白質(zhì)二級結(jié)構(gòu)（ secondary structure） ?定義：是指多肽鏈的 主鏈骨架 在空間盤曲折疊形成的方式，并不涉及側(cè)鏈 R基團(tuán)的構(gòu)象 ?形式： ?螺旋、 ?折疊層、 ?轉(zhuǎn)角和無規(guī)卷曲等幾種類型 ?維系主鏈構(gòu)象穩(wěn)定的最主要因素是 主鏈的羰基 和 亞氨基 之間所形成的 氫鍵 （二）蛋白質(zhì)的空間結(jié)構(gòu) (二級、三級和四級結(jié)構(gòu) ) 三級結(jié)構(gòu)（ tertiary structure） ? 定義：是蛋白質(zhì)分子在二級結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)上進(jìn)一步盤曲折疊形成的三維結(jié)構(gòu) ， 是多肽鏈在空間的整體排布 。 ? 生命科學(xué)中的某些重要課題的研究 ? 例如 細(xì)胞分化、腫瘤發(fā)生、生殖控制以及某些疾病的病因與治療等 ，均涉及到 活性肽 的結(jié)構(gòu)和功能。 ? 現(xiàn)有： 神經(jīng)肽、腦啡肽、催產(chǎn)素、加壓素、谷胱甘肽、多肽生長因子、非蛋白質(zhì)來源多肽 ? 作用：在體內(nèi)一般 含量較少，結(jié)構(gòu)多樣 ，卻起著重要的生理作用。 C HH NC H2CC H2N HOSH3CC HRCO+ CB r Nδ+δS C NH3C B r+ H2OH CH2CH2COC H N H CH N N H C HRCO+ C HH 3 NRCO高 絲 氨 酸 內(nèi) 酯( h o m o s e r i n e l a c t o n e )C HH NC H2CC H2N HOSH3CC HRCOC NOO④ 、采用重疊法 —— 采用重疊法得出整個肽鏈的氨基酸順序 T 1T 2T 3T 4G A S M A L I KN G A A W H D F N P I D P RQ C V H S DW L I A C G P M T KT 2T 3p l a c e d a t N t e r m i n u sp a l c e d a t C t e r m i n u sC 1 C 2C 3N G A A W H D F N P I D P R G A S M T K Q C V H S DA L I K W L I A C G P MN G A A W H D F N P I D P R G A S M A L I K W L I A C G P M T K Q C V H S DN t e r m i n u s C t e r m i n u sT 2T 3T 4T 1C 1 C 3 C 2d i s u l f i d eTyrLys GluMet LeuGly Arg Ala— Gly ? 一個 9肽其組成是 2Gly、 Tyr、 Lys、 Arg、 Glu、Met、 Leu、 Ala；用 DNDCl 和羧肽酶法證明 N、C兩端分別為 Tyr和 Gly； ? 用蛋白酶水解得一組肽片段，測得各片段的氨基酸排列次序?yàn)椋? Ala
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