植物原生質(zhì)體的分離實驗(參考版)
2025-04-20 04:15本頁面
【正文】 2. 在熒光顯微鏡下，觀察葉綠體的自發(fā)熒光時，更換濾鏡系統(tǒng)，葉綠體的顏色是否有變化？ 3. 游離葉綠體和整體細(xì)胞內(nèi)的葉綠體，在熒光顯微鏡下，其顏色和強度有無差異？為什么？ 思 考 題 1. 葉綠體分離的實驗原理是什么？在分離葉綠體時應(yīng)注意些什么問題？ 2. 普通光學(xué)顯微鏡與熒光顯微鏡有何異同點？ 12 / 12。 3. 用吖啶橙染色后，葉綠體則發(fā)出桔紅色熒光，細(xì)胞核可發(fā)出綠色熒光, 氣孔仍為綠色。 2. 在熒光顯微鏡下，葉綠體發(fā)出火紅色熒光，但其熒光強度要比游離葉綠體弱, 氣孔發(fā)綠色熒光，兩保衛(wèi)細(xì)胞內(nèi)的火紅色葉綠體則環(huán)繞氣孔排列成一圈。 (2)保衛(wèi)細(xì)胞: 為構(gòu)成氣孔的成對存在的腎形細(xì)胞；(3)葉肉細(xì)胞: 為排列成柵狀的長形和橢圓形細(xì)胞。 3. 加入吖啶橙染色后，葉綠體可發(fā)出桔紅色熒光，而其中混有的細(xì)胞核則發(fā)綠色熒光。 實 驗 結(jié) 果 一、葉綠體的分離和觀察 1. 普通光鏡下，可看到葉綠體為綠色橄欖形，在高倍鏡下可看到葉綠體內(nèi)部含有較深的綠色小顆粒，即基粒。 (2)在熒光顯微鏡下觀察其直接熒光。 二、菠菜葉手切片觀察 用剔須刀片將新鮮的嫩菠菜葉切削出一斜面置于載玻片上，滴加1~，加蓋片后輕壓，置顯微鏡下觀察。 (2)在熒光顯微鏡下觀察葉綠體的直接熒光。 6. 、 7. 取葉綠體懸液一滴滴于載玻片上，加蓋玻片后即可在普通光鏡和熒光顯微鏡下觀察。 5. 將上清液在3000r/min下離心5min。 4. 取濾液4ml在1000r/min下離心2min。 2. 利用組織搗碎機低速(5000r/min)勻槳3~5min。 三、試劑 ，%吖啶橙(acridine orange)。 : 500ml燒杯2個, 250ml量筒1個, 滴管20支, 10ml刻度離心管20支, 試管架5個，紗布若干，無熒光載片和蓋片各4片。另外，在制作熒光顯微標(biāo)本時最好使用無熒光載片、蓋片和無熒光油。 利用熒光顯微鏡對可發(fā)熒光的物質(zhì)進(jìn)行檢測時，將受到許多因素的影響，如溫度、光、淬滅劑等。然后，在3000r/min的條件下離心5min，即可獲得沉淀的葉綠體(混有部分細(xì)胞核)。 葉綠體的分離應(yīng)在等滲溶液()中進(jìn)行, 以免滲透壓的改變使葉綠體到損傷。在一給定的離心場中，同一時間內(nèi)，密度和大小不同的顆粒其沉降速率不同。 實 驗 原 理 將組織勻漿后懸浮在等滲介質(zhì)中進(jìn)行差速離心，是分離細(xì)胞器的常用方法。 實 驗 目 的 1. 通過植物細(xì)胞葉綠體的分離, 了解細(xì)胞器分離的一般原理和方法。實驗報告（1）. 繪口腔上皮細(xì)胞示線粒體的形態(tài)與分布 （2）. 繪蟾蜍胸骨劍突軟骨細(xì)胞示液泡系的形態(tài)與分布實驗五 葉綠體的分離與熒光觀察葉綠體是植物細(xì)胞所特有的能量轉(zhuǎn)換細(xì)胞器，光合作用就是在葉綠體中進(jìn)行的, 由于具有這一重要功能，所以葉綠體一直是細(xì)胞生物學(xué)、遺傳學(xué)和分子生物學(xué)的重要研究對象。然后，由生長點向延長區(qū)觀察，在一些已分化長大的細(xì)胞內(nèi)，液泡的染色較淺，體積增大，數(shù)目變少。實 驗 方 法人口腔粘膜上皮細(xì)胞線粒體的超活染色與觀察清潔載玻片放在37℃恒溫水浴鍋的金屬板上 ↓ 滴2滴1/5000詹納斯綠B染液 ↓ 用牙簽口腔頰粘膜處稍用力刮取上皮細(xì)胞 ↓ 刮下的粘液狀物放大載玻片的染液滴中 ↓ 染色10~l5min(注意不可使染液干燥，必要時可再加滴染液) ↓ 蓋上蓋玻片,顯微鏡下觀察 植物細(xì)胞液泡系的超活染色與觀察 取豆芽的根尖 ↓用刀片
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