微生物原生質(zhì)體融合育種(參考版)
2025-01-16 23:11本頁面
【正文】 利用熒光染色法選擇融合體 Here es your footer ? Page 20 融合原生質(zhì) 體懸浮液 稀釋 完全再生培養(yǎng)基 選擇性再生培養(yǎng)基 培養(yǎng) 培養(yǎng) 重 組 體 100% 融合率（ %） = 選擇性培養(yǎng)基上再生的菌落數(shù) 完全培養(yǎng)基上再生的菌落數(shù) Here es your footer ? Page 21 三、原生質(zhì)體融合的應(yīng)用 ?提高產(chǎn)量或質(zhì)量，合成新物質(zhì) ?改良菌種遺傳物性 ?優(yōu)化菌種發(fā)酵物性 ?質(zhì)粒轉(zhuǎn)移 ?原生質(zhì)體與細胞核融合 ?進行遺傳分析 Here es your footer ? Page 22 。它對原生質(zhì)體活力無影響，攜帶色素的原生質(zhì)體能正常進行融合并具有再生能力。 利用營養(yǎng)缺陷型標記選擇融合體 Here es your footer ? Page 19 熒光染色法是事先使雙親染色而攜帶不同熒光色素標記，然后在顯微操作器和熒光顯微鏡下，挑取現(xiàn)時帶有雙親原生質(zhì)體熒光標記的融合體，直接分離到再生培養(yǎng)基上再生，最后得到融合體。 1. 利用營養(yǎng)缺陷型標記選擇融合體 2. 利用抗藥性選擇融合體 3. 利用滅活原生質(zhì)體檢出融合體 4. 利用熒光染色法選擇融合體 5. 雙親對碳源利用不同而檢出融合體 6. 利用形態(tài)差異檢出 融合體的檢出與分離 Here es your footer ? Page 18 ?這是一種傳統(tǒng)而有效的選擇方法，其檢出原則是：融合的雙親帶有不同的營養(yǎng)缺陷型標記，在分離培養(yǎng)基上只有融合體生長而不能讓雙親形成的原生質(zhì)體形成菌落。各菌種間略有差異。 ?促融時間：促融時間增加可以使原生質(zhì)體融合機會增多，但是， PEG對原生質(zhì)體有毒，為保證原生質(zhì)體的再生能力，促融時間不宜過長。但是高濃度的 PEG會導(dǎo)致原生質(zhì)體收縮，降低融合頻率，而且過高濃度的 PEG對原生質(zhì)體有毒害作用。 近年來，一種物理融合技術(shù) — 細胞電融合技術(shù)迅速崛起并顯示出強大的生命力。 ?PEG誘導(dǎo)細胞融合由于具有容易制備和控制、 活性穩(wěn)定、 使用方便等特點，在細胞融合領(lǐng)域取得了可喜的成績，大量的研究仍采用
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