植物原生質體的分離實驗(存儲版)
【正文】 色能力。然后，由生長點向延長區(qū)觀察，在一些已分化長大的細胞內，液泡的染色較淺，體積增大，數(shù)目變少。在一給定的離心場中，同一時間內，密度和大小不同的顆粒其沉降速率不同。另外，在制作熒光顯微標本時最好使用無熒光載片、蓋片和無熒光油。 4. 取濾液4ml在1000r/min下離心2min。 二、菠菜葉手切片觀察 用剔須刀片將新鮮的嫩菠菜葉切削出一斜面置于載玻片上，滴加1~，加蓋片后輕壓，置顯微鏡下觀察。 (2)保衛(wèi)細胞: 為構成氣孔的成對存在的腎形細胞；(3)葉肉細胞: 為排列成柵狀的長形和橢圓形細胞。 2. 在熒光顯微鏡下，觀察葉綠體的自發(fā)熒光時，更換濾鏡系統(tǒng)，葉綠體的顏色是否有變化？ 3. 游離葉綠體和整體細胞內的葉綠體，在熒光顯微鏡下，其顏色和強度有無差異？為什么？ 思 考 題 1. 葉綠體分離的實驗原理是什么？在分離葉綠體時應注意些什么問題？ 2. 普通光學顯微鏡與熒光顯微鏡有何異同點？ 12 / 12。 3. 加入吖啶橙染色后，葉綠體可發(fā)出桔紅色熒光，而其中混有的細胞核則發(fā)綠色熒光。 (2)在熒光顯微鏡下觀察葉綠體的直接熒光。 2. 利用組織搗碎機低速(5000r/min)勻槳3~5min。 利用熒光顯微鏡對可發(fā)熒光的物質進行檢測時，將受到許多因素的影響，如溫度、光、淬滅劑等。 實 驗 原 理 將組織勻漿后懸浮在等滲介質中進行差速離心，是分離細胞器的常用方法。實 驗 方 法人口腔粘膜上皮細胞線粒體的超活染色與觀察清潔載玻片放在37℃恒溫水浴鍋的金屬板上 ↓ 滴2滴1/5000詹納斯綠B染液 ↓ 用牙簽口腔頰粘膜處稍用力刮取上皮細胞 ↓ 刮下的粘液狀物放大載玻片的染液滴中 ↓ 染色10~l5min(注意不可使染液干燥，必要時可再加滴染液) ↓ 蓋上蓋玻片,顯微鏡下觀察 植物細胞液泡系的超活染色與觀察 取豆芽的根尖 ↓用刀片縱切根尖 放入中性紅染液滴中，染色5~10min。中性紅為弱堿性染料，對液泡系(即高爾基體)的染色有專一性，只將活細胞中的液泡系染成紅色，細胞核與細胞質完全不著色，這可能是與液泡中某些蛋白質有關。一般說來，最為適用的是堿性染料，這可能是因為它具有溶解在類脂質(如卵磷脂、膽固醇等)的特性，易于被細胞吸收。六、實驗報告描繪所觀察到的洋蔥鱗葉細胞骨架圖。 儀器(請參看儀器圖庫)：顯微鏡，燒杯，鑷子。步驟同2。實驗二、細胞膜的通透性觀察實 驗 目 的 了解細胞膜的滲透性及各類物質進入細胞的速度。搖勻血細胞懸液，用滴管吸取，將滴管尖輕輕置于蓋玻片邊緣外，讓滴出的血細胞懸液憑毛細管作用吸入計數(shù)室內，剛好充滿計數(shù)室為宜(圖8－3)。因此，放上蓋玻片時，(圖81)。少許原生質體于載片上，蓋片觀察其形態(tài)，檢測純度。（酶液：4%纖維素酶， 2%果膠覆酶，）。但在實際操作中，只有幼嫩的組織才能完成去壁的過程。 其次,還應當考慮取材、酶的種類和純度、酶液 的滲透壓、酶解時間及溫度等因素對分離原生質 體的影響。二．重點：掌握分離和培養(yǎng)原生質體的技術、方法和原理。掌握細胞計數(shù)的原理和方法。由于原生質體內 部與外界環(huán)境之間僅隔一層薄薄的細胞膜,必須保持在滲透壓平衡的溶液中才能保持其完整性, 使原生質體分離后不致膨脹破裂，滲透劑常用甘露醇或蔗糖，酶液還應含一定Ca2+來穩(wěn)定原生質膜。從理論上講，植物體的任何一部分都可以通過酶解作用去除細胞壁而得到原生質體。讓去除下表皮的一面接觸酶液，輔滿一層。7．用1mL注射
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