植物原生質(zhì)體的分離實(shí)驗(yàn)(存儲(chǔ)版)
【正文】 色能力。然后，由生長(zhǎng)點(diǎn)向延長(zhǎng)區(qū)觀察，在一些已分化長(zhǎng)大的細(xì)胞內(nèi)，液泡的染色較淺，體積增大，數(shù)目變少。在一給定的離心場(chǎng)中，同一時(shí)間內(nèi)，密度和大小不同的顆粒其沉降速率不同。另外，在制作熒光顯微標(biāo)本時(shí)最好使用無熒光載片、蓋片和無熒光油。 4. 取濾液4ml在1000r/min下離心2min。 二、菠菜葉手切片觀察 用剔須刀片將新鮮的嫩菠菜葉切削出一斜面置于載玻片上，滴加1~，加蓋片后輕壓，置顯微鏡下觀察。 (2)保衛(wèi)細(xì)胞: 為構(gòu)成氣孔的成對(duì)存在的腎形細(xì)胞；(3)葉肉細(xì)胞: 為排列成柵狀的長(zhǎng)形和橢圓形細(xì)胞。 2. 在熒光顯微鏡下，觀察葉綠體的自發(fā)熒光時(shí)，更換濾鏡系統(tǒng)，葉綠體的顏色是否有變化？ 3. 游離葉綠體和整體細(xì)胞內(nèi)的葉綠體，在熒光顯微鏡下，其顏色和強(qiáng)度有無差異？為什么？ 思 考 題 1. 葉綠體分離的實(shí)驗(yàn)原理是什么？在分離葉綠體時(shí)應(yīng)注意些什么問題？ 2. 普通光學(xué)顯微鏡與熒光顯微鏡有何異同點(diǎn)？ 12 / 12。 3. 加入吖啶橙染色后，葉綠體可發(fā)出桔紅色熒光，而其中混有的細(xì)胞核則發(fā)綠色熒光。 (2)在熒光顯微鏡下觀察葉綠體的直接熒光。 2. 利用組織搗碎機(jī)低速(5000r/min)勻槳3~5min。 利用熒光顯微鏡對(duì)可發(fā)熒光的物質(zhì)進(jìn)行檢測(cè)時(shí)，將受到許多因素的影響，如溫度、光、淬滅劑等。 實(shí) 驗(yàn) 原 理 將組織勻漿后懸浮在等滲介質(zhì)中進(jìn)行差速離心，是分離細(xì)胞器的常用方法。實(shí) 驗(yàn) 方 法人口腔粘膜上皮細(xì)胞線粒體的超活染色與觀察清潔載玻片放在37℃恒溫水浴鍋的金屬板上 ↓ 滴2滴1/5000詹納斯綠B染液 ↓ 用牙簽口腔頰粘膜處稍用力刮取上皮細(xì)胞 ↓ 刮下的粘液狀物放大載玻片的染液滴中 ↓ 染色10~l5min(注意不可使染液干燥，必要時(shí)可再加滴染液) ↓ 蓋上蓋玻片,顯微鏡下觀察 植物細(xì)胞液泡系的超活染色與觀察 取豆芽的根尖 ↓用刀片縱切根尖 放入中性紅染液滴中，染色5~10min。中性紅為弱堿性染料，對(duì)液泡系(即高爾基體)的染色有專一性，只將活細(xì)胞中的液泡系染成紅色，細(xì)胞核與細(xì)胞質(zhì)完全不著色，這可能是與液泡中某些蛋白質(zhì)有關(guān)。一般說來，最為適用的是堿性染料，這可能是因?yàn)樗哂腥芙庠陬愔|(zhì)(如卵磷脂、膽固醇等)的特性，易于被細(xì)胞吸收。六、實(shí)驗(yàn)報(bào)告描繪所觀察到的洋蔥鱗葉細(xì)胞骨架圖。 儀器(請(qǐng)參看儀器圖庫)：顯微鏡，燒杯，鑷子。步驟同2。實(shí)驗(yàn)二、細(xì)胞膜的通透性觀察實(shí) 驗(yàn) 目 的 了解細(xì)胞膜的滲透性及各類物質(zhì)進(jìn)入細(xì)胞的速度。搖勻血細(xì)胞懸液，用滴管吸取，將滴管尖輕輕置于蓋玻片邊緣外，讓滴出的血細(xì)胞懸液憑毛細(xì)管作用吸入計(jì)數(shù)室內(nèi)，剛好充滿計(jì)數(shù)室為宜(圖8－3)。因此，放上蓋玻片時(shí)，(圖81)。少許原生質(zhì)體于載片上，蓋片觀察其形態(tài)，檢測(cè)純度。（酶液：4%纖維素酶， 2%果膠覆酶，）。但在實(shí)際操作中，只有幼嫩的組織才能完成去壁的過程。 其次,還應(yīng)當(dāng)考慮取材、酶的種類和純度、酶液 的滲透壓、酶解時(shí)間及溫度等因素對(duì)分離原生質(zhì) 體的影響。二．重點(diǎn)：掌握分離和培養(yǎng)原生質(zhì)體的技術(shù)、方法和原理。掌握細(xì)胞計(jì)數(shù)的原理和方法。由于原生質(zhì)體內(nèi) 部與外界環(huán)境之間僅隔一層薄薄的細(xì)胞膜,必須保持在滲透壓平衡的溶液中才能保持其完整性, 使原生質(zhì)體分離后不致膨脹破裂，滲透劑常用甘露醇或蔗糖，酶液還應(yīng)含一定Ca2+來穩(wěn)定原生質(zhì)膜。從理論上講，植物體的任何一部分都可以通過酶解作用去除細(xì)胞壁而得到原生質(zhì)體。讓去除下表皮的一面接觸酶液，輔滿一層。7．用1mL注射
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