實(shí)驗(yàn)1-大腸桿菌的培養(yǎng)與分離(存儲(chǔ)版)
【正文】 溫培養(yǎng)真菌 18~24h 。 制備無(wú)菌水 。 實(shí)驗(yàn)步驟： 第一步：在兩個(gè)菌種的試管上分別標(biāo)記 A． B 第二步：不含有胱氨酸和 甲基營(yíng)養(yǎng)物的 培養(yǎng)基，分別倒入 3個(gè)培養(yǎng)皿中，標(biāo)上 1． 2． 3， 第三步： 將 A菌（或 B菌）接種于 1． 2． 3號(hào)培養(yǎng)皿中，適宜條件下培養(yǎng)數(shù)天，觀察細(xì)菌生長(zhǎng)狀況 在 1號(hào)培養(yǎng)皿中加入適量胱氨酸：在 2號(hào)培養(yǎng)皿中加入等量甲基營(yíng)養(yǎng)物； 3號(hào)作為對(duì)照，一起滅菌 結(jié)果分析： ： ①若接種的 A菌在 1號(hào)培養(yǎng)皿中能生長(zhǎng)，在 2． 3號(hào)培養(yǎng)皿中不能生長(zhǎng)，則 A菌為胱氨酸依賴型細(xì)菌， B菌為甲基營(yíng)養(yǎng)細(xì)菌；②若接種的 A菌在 2號(hào)培養(yǎng)基上能生長(zhǎng)，在 1． 3號(hào)培養(yǎng)基中不能生長(zhǎng)，則 A菌為甲基營(yíng)養(yǎng)細(xì)菌 B菌為胱氨酸依賴型細(xì)菌 高壓蒸汽滅菌器： 1Kg/cm2，121℃ 溫度下維持 15min 。某同學(xué)的鑒別思路是配制 3個(gè)培養(yǎng)基，只接種其中的任一菌種，根據(jù)生長(zhǎng)狀況將其鑒別出來(lái)，另一種自然鑒別出來(lái)。 接種環(huán) 。 ℃ ~60℃ ~37℃ ~28℃ ℃ 用烘干機(jī)干熱滅菌 2~3h 。 例 1．下面對(duì)發(fā)酵工程中滅菌的理解 不正確 的是 答案： B 解析：滅菌是微生物發(fā)酵過程的一個(gè)重要環(huán)節(jié)。 長(zhǎng)期保存：甘油冷凍管藏法 ? （ 1） 菌落的形態(tài) 看，是否濕潤(rùn)，透明，粘稠，顏色等。 不能使用脫脂棉，否則容易吸水，造成污染。 LB液體培養(yǎng)基 —— 細(xì)菌的擴(kuò)大培養(yǎng) LB固體培養(yǎng)基 —— 細(xì)菌的劃線分離 封口膜：既通氣又不使菌進(jìn)入 （二）倒平板 滅菌后的培養(yǎng)基在 無(wú)菌操作臺(tái) 上， 酒精燈火焰 附近，倒入 4個(gè)培養(yǎng)皿中，倒后立即置于 水平 位置上，輕輕晃動(dòng)，使培養(yǎng)基鋪滿平皿底部，待凝，使之形成平面 倒平板技術(shù) 通過灼燒滅菌，防止瓶口的 微生物污染培養(yǎng)基。 ☆ 菌落 液體培養(yǎng)基： 表面生長(zhǎng) 均勻混濁生長(zhǎng) 沉淀生長(zhǎng) ☆ 無(wú)菌技術(shù) 無(wú)菌操作泛指在培養(yǎng)微生物的操作中，所有 防止雜菌污染 的方法。所謂革蘭氏陽(yáng)性菌就是用革蘭氏染液染色后，再用脫色液處理，細(xì)菌仍保留染色液的顏色；革蘭氏陰性菌則相反。 （ 1）按物理狀態(tài)來(lái)分： 培養(yǎng)基可分為 固體培養(yǎng)基 和 液體培養(yǎng)基 。
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