植物原生質(zhì)體的分離實驗-文庫吧
2025-04-02 04:15 本頁面
【正文】 ，常用的改良牛氏(ImprovedNeubauer) 計數(shù)板在中央橫溝的兩邊各有一計數(shù)室，兩計數(shù)室結(jié)構(gòu)完全相同。因此，放上蓋玻片時，(圖81)。在低倍顯微鏡下可見計數(shù)室被雙線劃分成９個邊長為１毫米的大方格。四角的大方格又各分為１６個中方格，這是用來計數(shù)白細(xì)胞的。中央大方格被劃分為２５個中方格，每一中方格又劃分成１６個小方格(圖8－2稱２５１６=400小方格，也有的計數(shù)板為１６２５=400格的，小方格面積一致)。中央大方格的四角及中心５個中方格(１６２５者則為四角上的中方格)為紅細(xì)胞或血小板計數(shù)范圍。細(xì)胞計數(shù)先用試管稀釋法制備禽類血細(xì)胞懸液：將禽類紅細(xì)胞稀釋液Ⅰ、Ⅱ分別置水浴鍋中預(yù)熱到４１～４２℃，?、褚海眒L于試管中，用吸血管加入新鮮雞血(或肝素抗凝血)２０霯，再加入Ⅱ液１mL混勻，置該水浴鍋中保溫５０s左右，置室溫，即為待檢的血細(xì)胞懸液?？捎糜诔湟河嫈?shù)。取干潔的計數(shù)板，置于水平的顯微鏡載物臺上，蓋上蓋玻片，使兩側(cè)各空出少許。搖勻血細(xì)胞懸液，用滴管吸取，將滴管尖輕輕置于蓋玻片邊緣外，讓滴出的血細(xì)胞懸液憑毛細(xì)管作用吸入計數(shù)室內(nèi)，剛好充滿計數(shù)室為宜(圖8－3)。靜置２min后計數(shù)，先用低倍鏡觀察，不均勻則拋棄。計數(shù)時用虹彩、集光器、反光鏡等調(diào)節(jié)入射光角度和強(qiáng)度，認(rèn)清 計數(shù)室位置。采用“由上至下，由左至右，順序如弓”的順序，對壓邊線細(xì)胞采取“數(shù)上不數(shù)下，數(shù)左不數(shù)右”的原則(圖8～4)。依次計數(shù)并記錄５個中方格中分別有多少個紅細(xì)胞。注意事項1．計數(shù)板、蓋玻片和測定管用清水沖洗，再用綢布或細(xì)布沾干。2．.充液前應(yīng)充分混勻血細(xì)胞懸液，充液要連續(xù)、適量，充液后應(yīng)待血細(xì)胞下沉后再計數(shù)。、蓋玻片、吸血管及測定管等用過后必須立即按要求洗滌干凈。實驗二、細(xì)胞膜的通透性觀察實 驗 目 的 了解細(xì)胞膜的滲透性及各類物質(zhì)進(jìn)入細(xì)胞的速度。 實 驗 原 理 將紅細(xì)胞放入數(shù)種等滲溶液中，由于紅細(xì)胞對各種溶質(zhì)的透性不同，有的溶質(zhì)可以滲入，有的不能滲入，滲入的溶質(zhì)能夠提高紅細(xì)胞的滲透壓，所以促使水分進(jìn)入細(xì)胞，引起溶血，由于溶質(zhì)透入速度互不相同，因此溶血時間也不相同。 實 驗 用 品 一、器材 50ml燒杯, 試管（1～10cm）, 10ml移液管, 試管架。 二、材料 羊血。 三、試劑 ，，，，。 實 驗 方 法 一、羊血細(xì)胞懸液取50ml小燒杯一個，形成一種不透明的紅色液體，此即稀釋的羊血。二、低滲溶液取試管一支，加入10ml蒸餾水，再加入1ml稀釋羊血，注意觀察溶液顏色的變化，有不透明的紅色逐漸澄清，說明紅細(xì)胞發(fā)生破裂造成100%紅細(xì)胞溶血，使光線比較容易透過溶液。三、羊紅細(xì)胞的滲透性取試管一支，再加入1ml稀釋羊血，輕輕搖動，注意觀察溶液顏色有無變化？有無溶血現(xiàn)象？為什么？取試管一支，再加入1ml稀釋羊血，輕輕搖動，注意觀察溶液顏色有無變化？有無溶血現(xiàn)象？為什么？分別在另外8種等滲溶液中進(jìn)行同樣實驗。步驟同2。實 驗 結(jié) 果并對實驗結(jié)果進(jìn)行比較和分析。實驗三 細(xì)胞骨架的觀察一、實驗?zāi)康恼莆沼霉鈱W(xué)顯微鏡觀察植物細(xì)胞骨架的原理 及方法，觀察光學(xué)顯微鏡下細(xì)胞骨架的網(wǎng)狀 結(jié)構(gòu)。 二、實驗原理植物細(xì)胞用適當(dāng)濃度的TritonX—100處理 后，可破壞細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)，但細(xì)胞骨架系統(tǒng)的蛋 白質(zhì)卻保護(hù)完好。考馬斯亮藍(lán)R250(Coomassie brilliant blue R250)是一種蛋白質(zhì)染料，處理后 的材料用考馬斯亮藍(lán)R250(考馬斯亮藍(lán)R250)
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