【正文】 器材：電泳器材、分光光度計(jì)、離心機(jī)。并對(duì)兩只試管進(jìn)行標(biāo)記。二、實(shí)驗(yàn)步驟： 切取菜花表層約5g，放入研磨過濾器外套筒中，加入2ml研磨液，插入研磨桿，朝一個(gè)方向按壓旋轉(zhuǎn)研磨3min。教學(xué)過程中師生活動(dòng)設(shè)計(jì) RNA的種類及組成成分提綱、板書設(shè)計(jì)原理及簡(jiǎn)要操作步驟作業(yè)驗(yàn)證RNA中核糖的方法，可否用來檢驗(yàn)脫氧核糖，為什么？主要參考資料[1] 《生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)》，何幼鸞、湯文浩，華師出版社，2013[2]《生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)》，董曉燕主編，化學(xué)工業(yè)出版社，2010總結(jié)分析 復(fù)習(xí)離心機(jī)的使用； 實(shí)驗(yàn)原理的講解要強(qiáng)調(diào)RNA的三種組分鑒定方法及現(xiàn)象《醫(yī)學(xué)生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)》教案 第 15 次課 2學(xué)時(shí)實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目 花菜中核酸的分離實(shí)驗(yàn)性質(zhì)基礎(chǔ)性實(shí)驗(yàn) 教學(xué)目的和要求學(xué)習(xí)從植物組織中分離核酸的原理和操作方法。，加入1mL水解液，再加入1mL濃氨水，觀察有無白色嘌呤堿的銀化合物沉淀。，與另一組同學(xué)的離心管在托盤天平上平衡，然后兩組的離心管對(duì)稱地放入離心機(jī)中，4000r/min下離心10min▲。然后離心除去菌體等殘?jiān)?。?，~%。取干凈試管一支，加入10滴上述濾液和5～10滴95%乙醇溶液，然后再加入5~10滴鉬酸銨試劑，觀察現(xiàn)象；最后將試管放入熱水浴中加熱5～10min，觀察有何變化。蒸發(fā)乙醇至干，得油膏狀黃色物質(zhì)，所得產(chǎn)物即為卵磷脂。甘油與硫酸氫鉀共熱，可生成具有特殊臭味的丙烯醛；磷酸鹽在酸性條件下與鉬酸銨作用，生成黃色的磷鉬酸沉淀；膽堿在堿的進(jìn)一步作用下生成無色且具有氨和魚腥氣味的三甲胺。教學(xué)重點(diǎn)與難點(diǎn)重點(diǎn)：掌握卵磷脂的提取和鑒定的原理難點(diǎn)：如何去除蛋黃中除卵磷脂外的雜質(zhì)得到較純的卵磷脂實(shí)驗(yàn)材料小燒杯；試管；研缽；漏斗；濾紙；雞蛋黃；紅色石蕊試紙；95%乙醇； 10%氫氧化鈉溶液；鉬酸銨試劑；丙酮；3%溴的四氯化碳溶液；硫酸氫鉀實(shí)驗(yàn)內(nèi)容一、 實(shí)驗(yàn)原理★：磷脂是生物體組織細(xì)胞的重要成分，主要存在于大豆等植物組織以及動(dòng)物的肝、腦、脾、心等組織中，尤其在蛋黃中含量較多(10%左右)。 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與計(jì)算▲：計(jì)算含量和得率：酪蛋白含量（g/mL）=酪蛋白（g）/50mL100%；得率=測(cè)得含量/理論含量100%。二、實(shí)驗(yàn)步驟：，在水浴中加熱至40℃，在攪拌下漫漫加入預(yù)熱至40℃（應(yīng)注意兩種液體都應(yīng)先預(yù)熱至40℃再用），(用1%NaOH或10%醋酸溶液進(jìn)行調(diào)整)。試劑：95%乙醇；無水乙醚；實(shí)驗(yàn)內(nèi)容一、實(shí)驗(yàn)原理★：牛乳中的主要蛋白質(zhì)是酪蛋白。（2）取3支干燥試管，編號(hào)， mL（空白管）、 mL（標(biāo)準(zhǔn)管）、 mL(樣品管)， mL，搖勻，10 cm比色皿愉，用722型分光光度計(jì)在560 nm波長(zhǎng)下比色。試劑：10%三氯化鐵溶液、磷硫鐵試劑、膽固醇標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)存液、膽固醇標(biāo)準(zhǔn)溶液實(shí)驗(yàn)內(nèi)容一、實(shí)驗(yàn)原理★： 本實(shí)驗(yàn)采用化學(xué)比色法測(cè)定總膽固醇（包括游離型膽固醇和膽固醇酯）。二、實(shí)驗(yàn)步驟：1．辣椒勻漿的稀釋取辣椒勻漿7mL（），裝入小容量瓶，用2℅草酸稀釋定容至50mL刻度線。②器材：容量瓶，微量滴定管、小三角瓶、1℅草酸、2℅草酸、移液管。該法雖然也有缺點(diǎn)，但操作簡(jiǎn)便，不需要特殊儀器和試劑，故在臨床上被廣泛應(yīng)用。實(shí)驗(yàn)材料試劑：、1mol/L氫氧化鈉溶液、ALT底物液、2，4二硝基苯肼溶液、丙酮酸標(biāo)準(zhǔn)液。（本實(shí)驗(yàn)由于時(shí)間有限，授課時(shí)間安排首先由教師簡(jiǎn)單講解實(shí)驗(yàn)步驟并向?qū)W生演示操作方法后指導(dǎo)學(xué)生操作，在電泳的30min里教師給學(xué)生詳盡講解實(shí)驗(yàn)原理，操作步驟及其注意事項(xiàng)。通電，調(diào)節(jié)電壓至110V，電泳時(shí)間約為30min。（要求：輕、勻、直、細(xì)）3．電泳：預(yù)先要在電泳槽內(nèi)加入緩沖液，使兩個(gè)電極槽內(nèi)的液面等高，做好濾紙橋。然后把膜條從緩沖液中取出，夾在兩層濾紙內(nèi)用手指快速捋一下，以吸干表面多余的液體，隨即將粗糙面朝上平鋪在玻璃板上。其中清蛋白的泳動(dòng)速度最快，其余依次為ααβ及γ球蛋白。醋酸纖維素薄膜電泳具有微量、快速、簡(jiǎn)便、分辨力高，對(duì)樣品無拖尾和吸附現(xiàn)象等優(yōu)點(diǎn)。 影響電泳遷移率的外界因素：電場(chǎng)強(qiáng)度、溶液的pH值、溶液的離子強(qiáng)度和電滲現(xiàn)象。4．透明液（僅在定量分析時(shí)使用）：無水乙醇7份，冰醋酸3份，混勻。實(shí)驗(yàn)材料器材：DYYⅢ6型常壓電泳儀、醋酸纖維薄膜（2 cm8cm）、.培養(yǎng)皿、蓋玻片、濾紙、鑷子。主要參考資料[1] 《生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)》，何幼鸞、湯文浩，華師出版社，2013[2]《生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)》，董曉燕主編，化學(xué)工業(yè)出版社，2010總結(jié)分析 強(qiáng)調(diào)Folin酚試劑法測(cè)蛋白質(zhì)濃度的顯色原理； 鞏固分光光度計(jì)的使用《醫(yī)學(xué)生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)》教案 第 8 次課 2學(xué)時(shí)實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目 血清蛋白的醋酸纖維薄膜電泳 實(shí)驗(yàn)性質(zhì)基礎(chǔ)性實(shí)驗(yàn) 教學(xué)目的和要求。即在標(biāo)準(zhǔn)曲線測(cè)定的各試管后面，再增加3個(gè)試管。然后在室溫下放置30分鐘，以未加蛋白質(zhì)溶液的第一支試管作為空白對(duì)照，于700nm處測(cè)定各管中溶液的吸光度值。二、實(shí)驗(yàn)步驟▲：取16支大試管，1支作空白，3支留作未知樣品，其余試管分成兩組，分別加入0，（濃度為250mg/ml）。教學(xué)重點(diǎn)與難點(diǎn) 重點(diǎn)：分光光度計(jì)的使用 難點(diǎn)：標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制實(shí)驗(yàn)材料試劑：標(biāo)準(zhǔn)蛋白溶液，F(xiàn)olin酚試劑，樣品液蛋白質(zhì)器材：分光光度計(jì)、恒溫水浴鍋、試管、移液管實(shí)驗(yàn)內(nèi)容一、實(shí)驗(yàn)原理★Folin酚試劑法測(cè)蛋白質(zhì)濃度的顯色原理與雙縮脲方法是相同的，只是加入了第二種試劑，即Folin酚試劑，以增加顯色量，從而提高了檢測(cè)蛋白質(zhì)的靈敏度。若不是棕黃色，則繼續(xù)保溫，然后每隔1min繼續(xù)取1號(hào)管的混合液1滴于點(diǎn)滴板上，加1滴KII2溶液顯色，直至變成棕黃色時(shí)，向所有試管依次滴加1滴KII2溶液顯色。若不是棕黃色，則繼續(xù)保溫，然后每隔1min繼續(xù)取2號(hào)管的混合液1滴于點(diǎn)滴板上，加1滴KII2溶液顯色，直至變成棕黃色時(shí)，向所有試管內(nèi)依次滴加2滴KII2溶液顯色。 在不同溫度下，淀粉被唾液淀粉酶水解的程度不同，可由水解混合物遇碘顯現(xiàn)的顏色不同來判斷：淀粉(藍(lán)色)紅色糊精(紅色)無色糊精(不顯色)麥芽糖(不顯色)葡萄糖(不顯色) 二、實(shí)驗(yàn)步驟：：用蒸餾水漱口清除食物殘?jiān)俸豢谡麴s水一分鐘后使其流入量筒并稀釋50倍，混勻備用。 凡是能夠提高酶活性，加快酶促反應(yīng)速度的物質(zhì)都稱為酶的激活劑。 pH值也會(huì)影響酶促反應(yīng)速度。溫度降低時(shí)，酶促反應(yīng)速度降低以至完全停止；隨著溫度升高，反應(yīng)速度逐漸加快。難點(diǎn)：酶活性的影響因素。三、實(shí)驗(yàn)結(jié)果▲：（1）記下各斑點(diǎn)的位置、顏色，計(jì)算Rf值。用毛細(xì)管分別點(diǎn)上不同的糖樣品于4個(gè)點(diǎn)，樣品量控制在510μg，斑點(diǎn)直徑不超過3mm。經(jīng)過適當(dāng)?shù)娜軇┱归_后，糖在薄板上的移動(dòng)速度是戊糖＞己糖＞雙糖＞三糖。為了使所要分析的樣品各組分得到分離，必須選擇合適的吸附劑。 向6個(gè)試管中按下表加試劑，觀察現(xiàn)象并記錄。難點(diǎn)：鑒定蛋白質(zhì)與氨基酸的方法。解釋各管發(fā)生的全部現(xiàn)象。依下表順序加入試劑： 試劑（mL）管號(hào)蛋白質(zhì)溶液95%乙醇123111—1———11111—— 振搖混勻后，觀察各管有何變化。放置片刻傾出清液，向沉淀中加入少量水，觀察沉淀是否溶解。取出部分清蛋白，加少量蒸餾水，觀察沉淀的再溶解。由鹽析獲得的蛋白質(zhì)沉淀，當(dāng)降低其鹽類濃度時(shí)，又能再溶解，故蛋白質(zhì)的鹽析作用是可逆過程。最混濁的一管pH即為酪蛋白的等電點(diǎn)。試管號(hào)蒸餾水（mL） mol/L蠟酸（mL） mol/L蠟酸(mL) mol/L蠟酸(mL)1—2—3—4 （2）向以上試管中各加酪蛋白的醋酸鈉溶液1mL， 加一管，搖勻一管。蛋白質(zhì)與重金屬離子或某些有機(jī)酸的反應(yīng)都屬于此類。如大多數(shù)蛋白質(zhì)的鹽析作用或在低溫下用乙醇（或丙酮）短時(shí)間作用于蛋白質(zhì)。實(shí)驗(yàn)材料（一）材料新鮮雞蛋（二）試劑%酪蛋白醋酸鈉溶液200mL蛋白質(zhì)溶液500mL 5%卵清蛋白溶液或雞蛋清的水溶液（新鮮雞蛋清:水=1:9）—醋酸鈉的緩沖溶液100mL3%硝酸銀溶液10mL5%三氯乙酸溶液50mL95%乙醇250mL飽和硫酸銨溶液250mL1硫酸銨結(jié)晶粉末10000mL1111甲基紅溶液20mL（三）器具水浴鍋、溫度計(jì)、200mL錐形瓶、100mL容量瓶、吸管、試管及試管架 實(shí)驗(yàn)內(nèi)容★：蛋白質(zhì)是兩性電解質(zhì)。教學(xué)過程中師生活動(dòng)設(shè)計(jì)觀察和記錄各管顏色及顏色變化的時(shí)間后，說出各管顏色變化的原因。 mL，混勻。試管 中液體分成兩層，濃硫酸在試液下面。托倫反應(yīng)：戊糖在濃酸