臨床生物化學(xué)和生物化學(xué)檢驗(yàn)06-wenkub.com
2025-01-03 14:55 本頁面
【正文】 P174 75 臨床各系統(tǒng)疾病的酶學(xué)診斷 一、肝臟疾病 診斷肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞受損的酶： AST ALT LD(LD5) 反映肝細(xì)胞合成功能的酶： ChE LCAT 凝血酶原 診斷肝纖維化的酶： MAO 診斷膽道梗阻的酶： ALP GGT 5`NT 二、骨骼及骨骼肌疾病 診斷骨骼疾?。?ALP 診斷骨骼肌疾病： CK(CK MM) AST LD (LD5) 76 三、胰腺疾病 AMY LPS 四、前列腺疾病 ACP PSA 五、心肌酶譜 CKMB： AMI診斷的金指標(biāo) ASTm：判斷預(yù)后 LD： LD1LD2 77 小 結(jié) 機(jī)制 、同工酶及其亞型 、酶的免疫化學(xué)測定 同工酶及其亞型測定 。 臨床發(fā)現(xiàn)，凡血清 AMY升高的病例，其 LPS均升高；而 LPS升高者 AMY不一定升高。 (2) 急性胰腺炎早期檢測血 AMY，在后期測定尿 AMY更有價(jià)值。 2. 組織分布 人體胰腺含 AMY最多，唾液腺也分泌大量 AMY入口腔，還見于卵巢、肺、睪丸、橫紋肌和脂肪組織中。 3. 標(biāo)本 血清或肝素抗凝血漿， 37 ℃ 或偏堿時(shí)滅活很快， pH降至 ，酶比較穩(wěn)定。 (1) 診斷骨骼性疾病 (2)診斷肝膽系統(tǒng)疾病，尤其是黃疸 急性肝炎時(shí) ALP增高達(dá) 25ULN，肝硬化、膽石癥和腫瘤引起的膽汁淤積， ALP增高達(dá) 520ULN。血清中的 ALP主要來自肝臟和骨骼。 66 4. 臨床意義 亞急性心肌梗死診斷有一定價(jià)值，但其特異性差； (1) 診斷心臟疾病 心肌梗死和心肌炎時(shí)以 LD1和 LD2升高為主，大多數(shù) AMI患者血中會(huì)出現(xiàn)“反轉(zhuǎn)比率”，即 LD1LD2； (2) 診斷肝臟疾病 肝細(xì)胞損傷時(shí)常出現(xiàn) LD5LD4。 LD1為主，主要在心肌，可占總 LD活性 50％以上，也存在于 RBC內(nèi)； LD5為主，以橫紋肌為代表，肝臟中也有； LD3為主，存在于脾肺。 P168 62 4. 臨床意義 CK及其同工酶和亞型是目前臨床上測定次數(shù)最多的酶之一，主要用于心肌、骨骼肌和腦疾患的診斷。 磷酸肌酸＋ ADP 肌酸＋ ATP CK P168 61 2. 組織分布 廣泛分布于全身，在骨骼肌含量最高，其次是心肌和腦。 P167 59 4. 臨床意義 有助肝膽疾病的鑒別診斷 與 ALP聯(lián)合進(jìn)行肝臟疾病檢測 膽道疾病， GGT陽性率高，而且升高明顯，可高達(dá)530ULN，肝實(shí)質(zhì)疾病是 GGT一般只是中度升高，可達(dá) 25ULN。 P167 57 二、 γ谷氨酰轉(zhuǎn)移酶及其同工酶 γ谷氨酰轉(zhuǎn)移酶 （ γ glutamyl transpeptid, γ GT/GGT） 1. 催化反應(yīng) 又稱： γ谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶 （ γGTP/GGTP) 一種含巰基的線粒體酶 ，可催化 γ谷氨?；鶑?GSH或其它含 γ谷氨酰基化合物中轉(zhuǎn)移至另一肽或氨基酸分子上。 P166 55 溶血標(biāo)本不能用于檢測 宜用血清， 4℃ 冰箱中可貯存 1星期，活性無明顯改變。 AST存在多種器官，按含量多少為 心 、 肝、 骨骼肌和腎。 免疫電泳、 RIA、 EIA和CLIA P164 50 （四）動(dòng)力學(xué)分析法 底物特異性分析法 抑制劑分析法 pH分析法 熱失活分析法 （五）蛋白酶水解法 P165 51 三、同工酶檢測意義 提高酶診斷的特異性 提高診斷的靈敏度 對(duì)某些疾病的預(yù)后有評(píng)價(jià)價(jià)值 有些同工酶有明顯的組織分布和細(xì)胞內(nèi)定位差異 有些同工酶的變化可在總酶變化之前發(fā)生 線粒體酶的測定 52 第 五節(jié) 臨床常用血清酶分析 53 一、轉(zhuǎn)氨酶（ Aminotransferases ）及其同工酶 丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶 (Alanine aminotransferases， ALT) / 谷丙轉(zhuǎn)氨酶 GPT 天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶 (Aspartate aminotransferases， AST/ 谷草轉(zhuǎn)氨酶 GOT L丙氨酸＋ α酮戊二酸 α丙酮酸＋ L谷氨酸 L天冬氨酸＋ α酮戊二酸 α草酰乙酸＋ L谷氨酸 ALT AST 兩種酶均需要磷酸吡哆醛（ VitB6）為輔基，不含磷酸吡哆醛的酶蛋白為脫輔基酶蛋白，無催化活性。 P161 45 二、分析方法 臨床同工酶的分析可分為兩步 首先精確地分離出某酶的各同工酶組分 測定酶的總活性和各同工酶或亞型組分的活性 P162 46 二、分析方法 （一）電泳法 原理 使用最為廣泛 簡便、快速、分離效果好、不破壞酶的天然構(gòu)象 可分為：乙酸纖維素薄膜電泳、聚丙烯酰胺凝膠電泳、等電聚焦電泳及毛細(xì)管電泳 測定步驟為：區(qū)帶分離、活性顯色和檢測結(jié)果 方法 同工酶氨基酸組成不同（一級(jí)結(jié)構(gòu)不同）， pI不同，電泳遷移率也就不同，電泳可將其分開。 連續(xù)監(jiān)測法測定在線性范圍內(nèi)每分鐘吸光度的變化（ ΔA/min） U/L＝ ΔA min V 106 ε v L ΔA— 吸光度變化 106 — 把 mol換算成 μmol v— 樣品量 （ ml） L — 比色杯光徑（ cm） V— 反應(yīng)體系體積（ ml） ε — 摩爾消光系數(shù)（ cm2 P155 36 六、酶活性濃度單位 （一）酶活性單位 慣用單位 用首先報(bào)告該種酶測定方法的臨床酶學(xué)家的名字來命名其單位，即使同一種酶因方法不同而有數(shù)種活性單位，參考值差別很大。 例： 尿素＋ H2O 2NH3＋ CO2 NH3＋ α酮戊二酸 ＋ NADH＋ H+ 谷氨酸＋ NAD+＋ H2O 尿素酶 GLD P152 P+NAD(P)H+H+ PH2+NAD(P) + 34 五、血清酶活性濃度測定條件的優(yōu)化 方法 儀器設(shè)備 試劑 自動(dòng)生物化學(xué)分析儀參數(shù)設(shè)置 標(biāo)本的采集、運(yùn)輸與保存 P153 35 標(biāo)本的采集、運(yùn)輸與保存 溶血：細(xì)胞內(nèi)酶而言，細(xì)胞內(nèi)外濃度差異大；所以應(yīng)及時(shí)進(jìn)行分離， 靜
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