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蛋白質(zhì)含量測(cè)定方法比較-資料下載頁(yè)

2024-11-19 03:36本頁(yè)面
  

【正文】 有較大的偏差,在制作 標(biāo)準(zhǔn)曲線時(shí)通常選用 g—球蛋白為標(biāo)準(zhǔn)蛋白質(zhì),以減少這方面的偏差。仍有一些物質(zhì)干擾此法的測(cè)定,主要的干擾物質(zhì)有:去污劑、 Triton X100、十二烷基硫酸鈉(SDS)。(。)標(biāo)準(zhǔn)曲線也有輕微的非線性,因而不能用Beer定律進(jìn)行計(jì)算,而只能用標(biāo)準(zhǔn)曲線來(lái)測(cè)定未知蛋白質(zhì)的濃度。應(yīng)用范圍凱氏定氮法 適用樣品廣泛是國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)第一法 。適合于各種食品中蛋白質(zhì)的測(cè)定以及各類(lèi)動(dòng)植物蛋白測(cè)定。~ ,誤差為 177。2%雙縮脲定氮法適用于1~20mg氮。紫外吸收定氮法適用于柱層析洗脫液的快速連續(xù)檢測(cè),因?yàn)榇藭r(shí)只需測(cè)定蛋白質(zhì)濃度的變化,而不需知道其絕對(duì)值。適用于50~100mg氮。酚試劑法可檢測(cè)的最低蛋白質(zhì)量達(dá)5mg。通常測(cè)定范圍是20~250mg。考馬斯亮藍(lán)法適用于1~5mg氮。生物153班 彭師韜 150501330內(nèi)容總結(jié)(1)蛋白質(zhì)含量測(cè)定主要有五種方法,分別是凱式定氮法、雙縮脲法、紫外吸收法、酚試劑法和考馬斯亮藍(lán)法(2)在強(qiáng)堿性溶液中,雙縮脲與CuSO4形成紫色絡(luò)合物,稱(chēng)為雙縮脲反應(yīng)(3)凡具有兩個(gè)酰胺基或兩個(gè)直接連接的肽鍵,或能過(guò)一個(gè)中間碳原子相連的肽鍵,這類(lèi)化合物都有雙縮脲反應(yīng)(4)此外,進(jìn)行紫外吸收法測(cè)定時(shí),由于蛋白質(zhì)吸收高峰常因pH的改變而有變化,因此要注意溶液的pH值,測(cè)定樣品時(shí)的pH要與測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)曲線的pH相一致
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