蛋白質(zhì)含量測定方法比較-展示頁
2024-11-19 03:36本頁面
【正文】 NHCONH3）是兩個分子脲經(jīng)180℃左右加熱，放出一個分子氨后得到的產(chǎn)物。缺點(diǎn)：操作比較繁復(fù)，費(fèi)時,試劑消耗量大。因?yàn)槭称分谐鞍踪|(zhì)外，還含有其它含氮物質(zhì)，所以此蛋白質(zhì)稱為粗蛋白。凱氏定氮法 蛋白質(zhì)是含氮的化合物。蛋白質(zhì)含量測定主要有五種方法，分別是凱式定氮法、雙縮脲法、紫外吸收法、酚試劑法和考馬斯亮藍(lán)法。這五種方法各有特點(diǎn)，優(yōu)缺點(diǎn)明確。食品與濃硫酸和催化劑共同加熱消化，使蛋白質(zhì)分解，產(chǎn)生的氨與硫酸結(jié)合生成硫酸銨，留在消化液中，然后加堿蒸餾使氨游離，用硼酸吸收后，再用鹽酸標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定，根據(jù)酸的消耗量來乘以蛋白質(zhì)換算系數(shù)，即得蛋白質(zhì)含量。優(yōu)點(diǎn)：重現(xiàn)性好，是目前分析有機(jī)化合物含氮量常用的方法,是一種蛋白質(zhì)測定的經(jīng)典方法, ,測試結(jié)果準(zhǔn)確。且此法測定的蛋白質(zhì)含量實(shí)際上包括了核酸，生物堿，含氮類脂，卟啉，含氮色素等非蛋白質(zhì)含氮化合物。在強(qiáng)堿性溶液中，雙縮脲與CuSO4形成紫色絡(luò)合物，稱為雙縮脲反應(yīng)。紫色絡(luò)合物顏色的深淺與蛋白質(zhì)濃度成正比，而與蛋白質(zhì)分子量及氨基酸成分無關(guān)，故可用來測定蛋白質(zhì)含量。干擾這一測定的物質(zhì)主要有：硫酸銨、Tris緩沖液和某些氨基酸等。主要的缺點(diǎn)是靈敏度差。缺點(diǎn)：不太靈敏；不同蛋白質(zhì)顯色相似。蛋白質(zhì)分子中，酪氨酸、苯丙氨酸和色氨酸殘基的苯環(huán)含有共軛雙鍵，使蛋白質(zhì)具有吸收紫外光的性質(zhì)。實(shí)際測定時,必須預(yù)先用標(biāo)準(zhǔn)蛋白質(zhì)溶液制作一個標(biāo)準(zhǔn)校正曲線,通常用牛血清白蛋白水溶液做蛋白質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)溶液。然后將測得的值分別
環(huán)評公示相關(guān)推薦
鄂ICP備17016276號-1