蛋白質(zhì)含量測定方法比較-預(yù)覽頁
【正文】 曲線也不是嚴(yán)格的直線形式，且專一性較差，干擾物質(zhì)較多。濃度較低的尿素（%），硫酸納（1%），硝酸納（1%），三氯乙酸（%），乙醇（5%），乙醚（5%），丙酮（%）等溶液對顯色無影響，但這些物質(zhì)濃度高時，必須作校正曲線?？捡R斯亮藍(lán)法考馬斯亮蘭G250染料，在酸性溶液中與蛋白質(zhì)結(jié)合，使染料的最大吸收峰的位置（lmax），由465nm變?yōu)?95nm，溶液的顏色也由棕黑色變?yōu)樘m色。這是因為蛋白質(zhì)與染料結(jié)合后產(chǎn)生的顏色變化很大，蛋白質(zhì)－染料復(fù)合物有更高的消光系數(shù)，因而光吸收值隨蛋白質(zhì)濃度的變化比Lowry法要大的多。因而完全不用像Lowry法那樣費(fèi)時和嚴(yán)格地控制時間。仍有一些物質(zhì)干擾此法的測定，主要的干擾物質(zhì)有：去污劑、 Triton X100、十二烷基硫酸鈉（SDS）。適合于各種食品中蛋白質(zhì)的測定以及各類動植物蛋白測定。適用于50～100mg氮。生物153班 彭師韜 150501330內(nèi)容總結(jié)（1）蛋白質(zhì)含量測定主要有五種方法，分別是凱式定氮法、雙縮脲法、紫外吸收法、酚試劑法和考馬斯亮藍(lán)法（2）在強(qiáng)堿性溶液中，雙縮脲與CuSO4形成紫色絡(luò)合物，稱為雙縮脲反應(yīng)（3）凡具有兩個酰胺基或兩個直接連接的肽鍵，或能過一個中間碳原子相連的肽鍵，這類化合物都有雙縮脲反應(yīng)（4）此外，進(jìn)行紫外吸收法測定時，由于蛋白質(zhì)吸收高峰常因pH的改變而有變化，因此要注意溶液的pH值，測定樣品時的pH要與測定標(biāo)準(zhǔn)曲線的pH相一致
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