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蛋白質含量測定方法比較-預覽頁

2025-11-18 03:36 上一頁面

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【正文】 曲線也不是嚴格的直線形式,且專一性較差,干擾物質較多。濃度較低的尿素(%),硫酸納(1%),硝酸納(1%),三氯乙酸(%),乙醇(5%),乙醚(5%),丙酮(%)等溶液對顯色無影響,但這些物質濃度高時,必須作校正曲線??捡R斯亮藍法考馬斯亮蘭G250染料,在酸性溶液中與蛋白質結合,使染料的最大吸收峰的位置(lmax),由465nm變?yōu)?95nm,溶液的顏色也由棕黑色變?yōu)樘m色。這是因為蛋白質與染料結合后產生的顏色變化很大,蛋白質-染料復合物有更高的消光系數(shù),因而光吸收值隨蛋白質濃度的變化比Lowry法要大的多。因而完全不用像Lowry法那樣費時和嚴格地控制時間。仍有一些物質干擾此法的測定,主要的干擾物質有:去污劑、 Triton X100、十二烷基硫酸鈉(SDS)。適合于各種食品中蛋白質的測定以及各類動植物蛋白測定。適用于50~100mg氮。生物153班 彭師韜 150501330內容總結(1)蛋白質含量測定主要有五種方法,分別是凱式定氮法、雙縮脲法、紫外吸收法、酚試劑法和考馬斯亮藍法(2)在強堿性溶液中,雙縮脲與CuSO4形成紫色絡合物,稱為雙縮脲反應(3)凡具有兩個酰胺基或兩個直接連接的肽鍵,或能過一個中間碳原子相連的肽鍵,這類化合物都有雙縮脲反應(4)此外,進行紫外吸收法測定時,由于蛋白質吸收高峰常因pH的改變而有變化,因此要注意溶液的pH值,測定樣品時的pH要與測定標準曲線的pH相一致
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