【正文】 0。⑶ 不潔凈的空間和包裝材料引入⒉ 各種有機(jī)雜質(zhì)來源：⑴ 各個原料藥和輔料引入⑵ 不潔凈的工藝設(shè)備引入（清場不干凈）⑶ 降解物：因?yàn)闀r間或反應(yīng)引起的藥物分子的化學(xué)改變生成的雜質(zhì)。光照、溫度、酸、堿、氧化或還原、水分、或者與輔料、容器接觸反應(yīng)產(chǎn)生的物質(zhì)⑷ 與包裝材料產(chǎn)生的反應(yīng)物原料藥和制劑控制雜質(zhì)的 各異原料藥主要應(yīng)控制 ⑴ 合成工藝中的中間體和副產(chǎn)物，特別是后幾步合成工藝中的⑵ 降解物藥物制劑主要應(yīng)控制 ⑴ 降解物⑵ 由原料藥帶入且隨時間和環(huán)境的影響會不斷增加的原料藥的中間體和副產(chǎn)物⑶ 與包裝材料產(chǎn)生的反應(yīng)物關(guān)注之二 :雜質(zhì)檢查方法 216。 根據(jù)主成分及雜質(zhì)的理化性質(zhì)、化學(xué)結(jié)構(gòu)、雜質(zhì)的控制要根據(jù)主成分及雜質(zhì)的理化性質(zhì)、化學(xué)結(jié)構(gòu)、雜質(zhì)的控制要求，采用適當(dāng)手段將雜質(zhì)的信號放大，易于辨認(rèn)和定量。求，采用適當(dāng)手段將雜質(zhì)的信號放大，易于辨認(rèn)和定量。 216。 化合物結(jié)構(gòu)特征、理化性質(zhì)、劑型特征、工藝過程、標(biāo)準(zhǔn)化合物結(jié)構(gòu)特征、理化性質(zhì)、劑型特征、工藝過程、標(biāo)準(zhǔn)要素、要素、 …………216。 綜合設(shè)計、嚴(yán)謹(jǐn)研究、規(guī)范驗(yàn)證　　綜合設(shè)計、嚴(yán)謹(jǐn)研究、規(guī)范驗(yàn)證　　216。 專屬、靈敏、準(zhǔn)確、簡捷。專屬、靈敏、準(zhǔn)確、簡捷。216。 分析方法各有局限，注意不同原理分析方法間的相互補(bǔ)充分析方法各有局限，注意不同原理分析方法間的相互補(bǔ)充和驗(yàn)證。和驗(yàn)證。 －《化學(xué)藥物雜質(zhì)研究技術(shù)指導(dǎo)原則》雜質(zhì)檢查方法的科學(xué)、適用性是雜質(zhì)控制的關(guān)鍵。在研究過程中應(yīng)該高度關(guān)注 :該產(chǎn)品是否在 ICH成員國藥典有無收載其檢查方法與國內(nèi)藥典或已批準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)方法的差異進(jìn)行系統(tǒng)的比較研究和規(guī)范的方法學(xué)驗(yàn)證在此基礎(chǔ)上，選擇 科學(xué)、適用、高效 的檢查方法。 － CDE電子刊物 《 抗生素類藥物雜質(zhì)控制研究的技術(shù)要求 》 ? 方法之一 :雜質(zhì)對照品 的使用雜質(zhì)檢查 :HPLC法、 TLC法、 GC法過去 :采用主成分自身對照法現(xiàn)在 :越來越多的標(biāo)準(zhǔn)中采用已知結(jié)構(gòu)的雜質(zhì)對照品 外標(biāo) 法或用于系統(tǒng)適用性試驗(yàn)或用于雜質(zhì)定位或用于外標(biāo)法測定該雜質(zhì)的含量 已知雜質(zhì)與未知雜質(zhì)區(qū)別控制 ? CDE發(fā)補(bǔ)實(shí)例 1.枸櫞酸鉍雷尼替丁膠囊經(jīng)審查 ,本品關(guān)物質(zhì)檢查采用 TLC法 ,專屬性及靈敏度較差 ,建議參照美國藥典 31版鹽酸雷尼替丁原料藥有關(guān)物質(zhì)檢查法 ,重新進(jìn)行研究修訂。 美國藥典 USP31版，雷尼替丁原料藥有關(guān)物質(zhì)檢查方法采用的是 HPLC法，雜質(zhì)對照品法 ,9個已知雜質(zhì)。名 稱 相對保留時間雷尼替丁 單 硝基乙酰胺 1 雷尼替丁 肟 2 雷尼替丁 氨基 乙醇 l3 雷尼替丁 二胺 4 雷尼替丁 S氧化物 5 雷尼替丁 N氧化物 6 雷尼替丁 復(fù)合 硝基乙酰胺 7 雷尼替丁 甲醛 結(jié)合物 8 雷尼替丁 二聚體 9 ? CDE發(fā)補(bǔ)實(shí)例 2.苯磺酸氨氯地平 /阿伐他汀鈣片經(jīng)審查 ,建議參照國外藥典采用的混合雜質(zhì)對照品法 ,對特定雜質(zhì)及非特定雜質(zhì)分別進(jìn)行控制。美國藥典 USP對 7個已知降解產(chǎn)物單獨(dú)控制了限度表 .各降解產(chǎn)物的相對保留CDE電子刊物 實(shí)例 .《氧氟沙星系列藥物有關(guān)物質(zhì)控制探討》BP收載了氧氟沙星雜質(zhì) A、 B、 C、 D、 E、 F共 6個已知雜質(zhì) ，依次分別為去哌嗪環(huán)、去羧基、去氟、氟取代位置不同、去甲基以及氮氧化的化合物。 原料藥采用 TLC法控制雜質(zhì) A，采用 HPLC法控制其他已知和未知雜質(zhì)。USP、 JP重點(diǎn)關(guān)注了氧氟沙星的去甲基化合物 ,與 BP的雜質(zhì) E相同 ,該化合物為氧氟沙星的主要降解產(chǎn)物，光照下極易產(chǎn)生。 USP給出其相應(yīng)因子為 。CP2023版 沒有明確已知雜質(zhì)。2023版 CP 實(shí)例 . 阿奇霉素原料藥雜質(zhì)控制 ? 近年， USP、 EP、 BP對阿奇霉素原料藥有關(guān)物質(zhì)控制越來越嚴(yán)格，成為目前雜質(zhì)控制最為嚴(yán)格的化學(xué)藥品之一。各國 藥 典阿奇霉素有關(guān)物 質(zhì) 控制情況有關(guān)物 質(zhì) USP31 BP2023 ChP2023檢測 方法 方法 1（ 電 化學(xué)法 檢測 ） 方法 2（ UV法 檢測 ）HPLCUV法 檢測等度洗脫HPLCUV法 檢測梯度洗脫TLC法特定 雜質(zhì) desosaminylazithromycin≤0.3％Ndemethylazithromycin≤％AzithromycinNoxide≤％雜質(zhì) B≤％雜質(zhì) A， C， E，F(xiàn)， G， H， I， L,M， N， O，P≤%雜質(zhì) D和 J之和≤％雜質(zhì) B≤％雜質(zhì) A， C，E,F,G， H， I， L， M， N， O,P≤%雜質(zhì) D和 J之和≤％未控制3’(N,Ndidemethyl)3’Nformylazithromycin≤％3’Ndemethyl3’Nformylazithromycin(rotamer1）≤％ 。3’Ndemethyl3’Nformylazithromycin(rotamer2） ≤％AzaerythromycinA≤％3’De(dimethylamino)3’oxoazithromycin≤%2Desethyl2propylazithromycin≤%,雜質(zhì) B≤％3’Ndemethyl3’N[(4methylphenyl)sulfonyl]azithromycin≤％其他任一 雜質(zhì) （非特定雜質(zhì) ）≤％ ≤％ ≤％ ≤％最大 雜質(zhì) ≤2％，其他任一 雜質(zhì) ≤1％總雜質(zhì) ≤％ ≤％ ≤％ ≤％? 歐洲藥典 （ HPLC法）要求雜質(zhì)總量不得過 %，同時規(guī)定 雜質(zhì) B≤％，雜質(zhì) A、 C、 E、 F、 G、 H、 I、 L、 M、 N、 O、 P≤%，雜質(zhì) D和 J之和 ≤％，其它任一雜質(zhì) ≤％ ；? BP07和 08均收載原料藥標(biāo)準(zhǔn)， BP07標(biāo)準(zhǔn)與， BP08標(biāo)準(zhǔn)做了很大改進(jìn)，測定方法由 等度洗脫改為梯度洗脫 ， 16種對照品定位 ， 對照品外標(biāo)法、雜質(zhì)自身對照法和主成分自身對照法相結(jié)合，雜質(zhì)定量的準(zhǔn)確性更為可靠，限度不變； ? USP30（ 2023年增補(bǔ)版）采用 HPLC法 UV檢測和 電化學(xué)檢測 兩種方式檢測有關(guān)物質(zhì)，要求雜質(zhì)總量不得過 %，同時規(guī)定 四種特定雜質(zhì) 限度在不超過 %～ %之間，其它任一雜質(zhì) ≤％； ? USP31更新了有關(guān)物質(zhì)檢查項(xiàng)，要求雜質(zhì)總量不得過 %，同時規(guī)定 九種特定雜質(zhì) 限度在不超過%、 %、 %、 %、 %、%之間，其它任一雜質(zhì) ≤％；? CP2023版阿奇霉素標(biāo)準(zhǔn)仍采用 TLC法控制有關(guān)物質(zhì)，要求最大雜質(zhì)不得過 2%，其它單個雜質(zhì)不得過 1%,未控制總雜質(zhì)。CP2023版 修訂了該品有關(guān)物質(zhì)檢查項(xiàng)系統(tǒng)適用性試驗(yàn)中用 對照品定位 系 統(tǒng) 適用性 試驗(yàn) 中各 雜質(zhì) 的相關(guān)信息雜質(zhì) 名稱相 對 保留 時間 校正因 子紅 霉素 A偕 亞 胺 醚ErythromycinAIminoether 雜質(zhì) I+J N去甲基阿奇霉素（ NDemethylazithromycin）去氧糖胺基阿奇霉素 (Desosaminlyazithromycin） 雜質(zhì) H 3’N[[4acetylamino]phenyl]sulphonyl]3’NDemethylazithromycin,阿奇霉素 雜質(zhì) Gx， 雜質(zhì) B AzithromycinB,阿奇霉素 B 系統(tǒng)適用性試驗(yàn)附圖 ? 方法之二 : 梯度洗脫法的使用有效檢出極性相差懸殊的系列雜質(zhì)驗(yàn)證等度洗脫法對各類雜質(zhì)的檢出能力? CDE發(fā)補(bǔ)實(shí)例 1.注射用頭孢地嗪鈉本品有關(guān)物質(zhì)檢查采用 HPLC法 ,建議由等度洗脫改為 梯度洗脫 ,并與等度洗脫的方法進(jìn)行對比研究。 ? CDE發(fā)補(bǔ)實(shí)例 2.匹多莫德本品有關(guān)物質(zhì)檢查采用 HPLC法 ,建議參照國外藥典 ,由等度洗脫改為 梯度洗脫 ,并與等度洗脫的方法進(jìn)行對比研究。? 照高效液相色譜法試驗(yàn)，以氨基硅烷鍵合硅膠為填充劑，柱前接以十八烷基（或氨基）硅烷鍵合硅膠為填充劑的預(yù)柱（5cm 2cm） ,以 （用 10％磷酸調(diào)節(jié) pH值至 ）為流動相 A；乙腈為流動相 B，按梯度洗脫方法，梯度條件如下：? 檢測波長為 210nm，理論板數(shù)按匹多莫德峰計算應(yīng)不低于20230，各已知雜質(zhì)峰之間的分離度及匹多莫德峰與相鄰雜質(zhì)峰的分離度均應(yīng)符合要求。 時間 流 動 相 A 流 動 相 B 流速 2023版 CP實(shí)例 . 總 數(shù) 有關(guān)物 質(zhì) HPLC梯度洗脫原料 藥 27 27 12制 劑 42 36 17頭孢菌素的有關(guān)物質(zhì)檢查 總 數(shù) 有關(guān)物 質(zhì) HPLC梯度洗脫 原料 藥 20 20 11 制 劑 28 23 15 碳青霉烯與單環(huán) β 內(nèi) 酰 胺 類 有關(guān)物 質(zhì)檢查 總 數(shù) 有關(guān)物 質(zhì) HPLC梯度洗脫 原料 藥 2 2 1 制 劑 2 2 1青霉素類與酶 抑制劑 有關(guān)物 質(zhì)檢查方法之三 . 采用 多種手段 進(jìn)行雜質(zhì)種類和含量的比較由雜質(zhì)多樣性復(fù)雜性和方法局限性所決定 單一方法不能滿足多個雜質(zhì)的檢測時，可采用兩種或兩種以上的方法互為補(bǔ)充，控制雜質(zhì)– 同一方法采用不同的測試條件 如 :正相 HPLC、反相 HPLC、不同流動相的反相HPLC等–分離技術(shù)與檢測手段聯(lián)用 如 :HPLC、 GC、 LCMS、 GCMS、 HPLCDAD、 CE等–高新技術(shù)和方法的采用 如 :新增離子色譜法，核磁共振波譜法、拉曼光譜法等 CDE電子刊物 《 抗生素類藥物雜質(zhì)控制研究的技術(shù)要求 》 建議采用 LC/MS、 二極管陣列監(jiān)測器 ，以及在研品與研究對照產(chǎn)品 混合進(jìn)樣 等 多種方法 從不同側(cè)面綜合判斷，并以列表方式全面反映研究結(jié)果，綜合分析二者所含雜質(zhì)種類和含量的差異，進(jìn)而評價其質(zhì)量的差異。在上述規(guī)范研究的基礎(chǔ)上，結(jié)合相關(guān)技術(shù)指導(dǎo)原則，制定科學(xué)合理的雜質(zhì)限度。CDE“新藥申報與審評技術(shù) ”論文 —《 化學(xué)藥品雜質(zhì)研究思路探析 》 中國藥典、國家藥品標(biāo)準(zhǔn) 等:已知雜質(zhì)：奧美拉唑磺酰化物（ 氧化產(chǎn)物 ）等分析方法： HPLC法，檢測波長為 280nm，規(guī)定奧美拉唑峰與奧美拉唑磺?；锓宓姆蛛x度實(shí)例實(shí)例 : 注射用奧美拉唑鈉注射用奧美拉唑鈉方法補(bǔ)充： 歐洲藥典、英國藥典收載的 TLC法 －－奧美拉唑的 還原產(chǎn)物2023版 CP生化藥實(shí)例 . 肝素鈉采用 分離效能更高的 離子色譜法色譜條件：? IonPacAS11戴安陰離子分析柱， 2502mm? IonPacAG11戴安陰離子保護(hù)柱，502mm? 流動相 A： %NaH2PO4， pH? 流動相 B： %NaH2PO4/14%NaClO4， pH? 梯度洗脫? 流速： mL/min? 檢測波長 :202nm? 實(shí)際樣品測定譜圖? 肝素鈉產(chǎn)品中多硫酸軟骨素的測定（按照 2023年中國藥典）? 樣品前處理： 取樣品，制成 20mg/mL的水溶液。? 肝素鈉粗產(chǎn)品中多硫酸軟骨素的測定樣品前處理：稱取樣品 ，加水 mL，混勻溶解后加 mL乙腈，混勻后，于冰箱中沉降 10min，取出后用 10000rpm高速離心機(jī)離心 10min，取上層清液 4mL，用氮?dú)獯蹈珊?，用水定容?8mL，定容后的液體過 μm尼龍濾膜，之后過 OnGuardRP柱，濾液上機(jī)分析。關(guān)注之三 : 雜質(zhì)研究 對照用樣品－ CDE電子刊物 《 抗生素類藥物雜質(zhì)控制研究的技術(shù)要求 》 ? 主要針對仿制藥（ 1）首選 原研產(chǎn)品 ，如果原研企業(yè)產(chǎn)品已經(jīng)進(jìn)口中國，可采用原研進(jìn)口品；（ 2）如果無法獲得原研產(chǎn)品或者原研進(jìn)口產(chǎn)品，可以采用 ICH成員國的上市產(chǎn)品 ，即美國、歐盟或日本等國的同品種仿制產(chǎn)品。如果上述國家產(chǎn)品已經(jīng)進(jìn)口中國，可采用進(jìn)口品。（ 3）如果國內(nèi)企業(yè)采用 上述產(chǎn)地的無菌原料，進(jìn)行分裝的無菌粉針 ，也可采用該企業(yè)產(chǎn)品作為雜質(zhì)研究對照樣品。對于其他制劑，因可能采用的輔料、溶劑比較復(fù)雜，并使用可能產(chǎn)熱的某些工藝，即使采用進(jìn)口原料制得的制劑，其雜質(zhì)譜也可能與國外樣品有差異，對于上述制劑，仍建議采用上述第 (1)、 (2)種研究對照樣品。 ? （ 4）如果該仿制藥品仍在上述 ICH成員國上市，申請人未采用其上市品作為雜質(zhì)研究對照樣品，而采用其他產(chǎn)地的樣品（包括國內(nèi)產(chǎn)品）作為雜質(zhì)研究對照樣品，一般不予認(rèn)可。（ 5）如果該仿制藥品未在上述 ICH成員國上市，即企業(yè)無法獲得符合上述要求的國外樣品、進(jìn)口樣品或者國產(chǎn)樣品時，則建議充分考慮立題合理性的前提下，按照新藥的雜質(zhì)研究的技術(shù)要求，采用 多家國內(nèi)上市制劑 ，進(jìn)行深入的雜質(zhì)研究和控制，新報產(chǎn)品的質(zhì)量應(yīng)不低于多數(shù)國內(nèi)企業(yè)產(chǎn)品的質(zhì)量。（ 6）如果該藥物已收載于 EP、 BP、 USP、 JP等國際通用藥典 ，且該藥典標(biāo)準(zhǔn)中對有關(guān)物質(zhì)進(jìn)行了良好的控制，例如英國藥典納入的阿奇霉素明確了 16種已知雜質(zhì)的限度，此種情況下可參考藥典方法進(jìn)行申報藥品有關(guān)物質(zhì)的控制，但需提供 雜質(zhì)對照品（或雜質(zhì)定位對照液）的來源和相關(guān)證明 。 關(guān)注之四 :復(fù)方 制劑的雜質(zhì)研究1)現(xiàn)有國家質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中多數(shù)復(fù)方制劑沒有相應(yīng)有關(guān)物質(zhì)控制2)雖有控制，但沒有考慮復(fù)方制劑的特點(diǎn)，研究